中文摘要 | 第1-5页 |
英文摘要 | 第5-11页 |
英文缩写注释 | 第11-12页 |
论文正文 | 第12-59页 |
前言 | 第12-15页 |
第一部分 热休克蛋白在肺腺癌细胞及组织中的表达 | 第15-32页 |
一、材料与方法 | 第16-19页 |
一)、材料 | 第16-17页 |
二)、方法 | 第17-19页 |
1、组织标本的获取及HE染色 | 第17页 |
2、细胞培养及分组 | 第17页 |
3、总RNA提取及RT-PCR检测热休克蛋白mRNA的表达 | 第17-18页 |
4、免疫印迹(Western blot)分析 | 第18页 |
5、Western blot条带的灰度扫描及其定量分析 | 第18页 |
6、蛋白定量(Bradford法) | 第18-19页 |
7、统计学处理 | 第19页 |
二、实验结果 | 第19-28页 |
1、热休克蛋白在肺腺癌细胞A945和人胚肺细胞W1-38中的表达 | 第19-23页 |
2、热休克蛋白在肺腺癌组织中的表达 | 第23-28页 |
三、分析与讨论 | 第28-30页 |
四、结论 | 第30页 |
五、附表:文中统计图数据 | 第30-32页 |
第二部分 HSP70表达下调对放线菌素D诱导A549细胞凋亡与增殖的影响 | 第32-47页 |
一、材料与方法 | 第33-36页 |
一)、材料 | 第33页 |
二)、方法 | 第33-36页 |
1、细胞培养及分组 | 第33-34页 |
2、HSP70反义寡核苷酸的设计 | 第34页 |
3、脂质体转染 | 第34-35页 |
4、MTT检测 | 第35页 |
5、流式细胞术检测细胞凋亡 | 第35页 |
6、Hoechst 33258染色及荧光显微镜下观察细胞凋亡 | 第35页 |
7、统计学处理 | 第35-36页 |
二、实验结果 | 第36-43页 |
1、反义寡核苷酸对HSP70蛋白表达的影响 | 第36-38页 |
2、HSP70表达下调对放线菌素D诱导A549细胞增殖抑制的影响 | 第38-39页 |
3、HSP70反义寡核苷酸对放线菌素D诱导A549细胞凋亡的影响 | 第39-43页 |
三、分析与讨论 | 第43-44页 |
四、结论 | 第44-45页 |
五、附表:文中统计图数据 | 第45-47页 |
第三部分 HSP70过表达对放线菌素D诱导A549细胞凋亡与增殖的影响 | 第47-59页 |
一、材料与方法 | 第47-49页 |
一)、材料 | 第47-48页 |
二)、方法 | 第48-49页 |
1、实验分组 | 第48页 |
2、pcDNA3.1-HSP70重组质粒的构建 | 第48-49页 |
3、脂质体瞬时转染方法 | 第49页 |
4、细胞DNA抽提及琼脂糖电泳 | 第49页 |
5 免疫印迹及流式细胞术检测方法同前 | 第49页 |
6、统计学处理 | 第49页 |
二、实验结果 | 第49-55页 |
1、pcDNA3.1-HSP70重组质粒的构建 | 第49-51页 |
2、HSP70基因转染升高HSP70蛋白的表达水平 | 第51-52页 |
3、HSP70过表达对放线菌素D诱导A549细胞增殖抑制的影响 | 第52-53页 |
4、HSP70过表达对放线菌素D诱导A549细胞凋亡的影响 | 第53-55页 |
三、分析与讨论 | 第55-57页 |
四、结论 | 第57页 |
五、附表:文中统计图数据 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
综述一:HSP70与肿瘤研究进展 | 第63-75页 |
综述二:NSCLC治疗进展 | 第75-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
攻读学位期间的主要研究成果 | 第83页 |