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耐铝酵母菌的分离及土生隐球酵母铝响应基因的鉴定

摘要第1-6页
Abstract第6-11页
插图和附表清单第11-13页
缩略词第13-14页
第一章 文献综述第14-22页
   ·研究背景第14页
   ·耐铝微生物的分离第14-16页
   ·微生物的耐铝机制的研究进展第16-21页
     ·酵母耐铝机制的研究进展第16-17页
     ·假单胞菌耐铝机制第17-19页
     ·菌根真菌的耐铝机制第19-20页
     ·其它微生物耐铝机制第20页
     ·小结第20-21页
   ·研究目的和意义第21-22页
第二章 耐铝微生物的分离纯化及其鉴定第22-40页
   ·材料与方法第22-24页
     ·土壤样品的采集第22页
     ·培养基的配制第22页
     ·菌株分离纯化第22-23页
     ·菌落及菌体形态观察第23页
     ·酵母基因组DNA的提取第23页
     ·ITS和26S rDNAD1/D2片段的PCR扩增第23-24页
     ·分子鉴定及系统发育分析第24页
     ·耐铝酵母菌株生长曲线的测定第24页
     ·耐铝能力检测第24页
   ·结果第24-39页
     ·菌体形态第24-25页
     ·ITS和26S rDNA的D1/D2区序列扩增第25-27页
     ·测序结果第27-31页
     ·构建系统进化树第31-36页
     ·酵母菌株生长曲线的测定第36-38页
     ·酵母耐铝性能检测第38-39页
   ·讨论第39-40页
第三章 铝胁迫下土生隐球酵母生理分析第40-56页
   ·实验材料与方法第40-45页
     ·铝胁迫下酵母细胞的流式分析第40页
     ·FDA-PI双染色观察铝胁迫下土生隐球酵母的细胞凋亡第40-41页
     ·培养过后培养液中活性铝含量测定第41页
     ·总蛋白含量测定第41-42页
     ·铝胁迫下酵母PC含量的测定第42页
     ·SOD活性的测定第42-43页
     ·可溶性糖含量的测定第43-44页
     ·丙二醛含量的测定第44-45页
   ·结果第45-54页
     ·铝胁迫下酵母细胞的流式分析第45-49页
     ·FDA-PI双染色观察铝胁迫下土生隐球酵母第49页
     ·培养基中剩余活性铝含量的测定第49-50页
     ·总蛋白含量的测定第50-51页
     ·PC含量的测定第51-52页
     ·SOD酶活性的测定第52页
     ·可溶性糖含量的测定第52-53页
     ·丙二醛含量的测定第53-54页
   ·讨论第54-56页
第四章 土生隐球酵母铝胁迫响应基因的鉴定第56-83页
   ·材料和方法第56-66页
     ·酵母的铝胁迫处理第56页
     ·隐球酵母总RNA的提取和纯化第56-57页
     ·分光光度法检测RNA浓度第57页
     ·mRNA的分离第57-58页
     ·土生隐球酵母SSH文库的构建第58-64页
     ·SSH文库克隆插入片段长度的检测第64-65页
     ·SSH文库克隆测序分析第65页
     ·RT-PCR分析第65-66页
   ·结果第66-79页
     ·土生隐球酵母RNA的提取与质量分析第66-67页
     ·mRNA的分离第67-68页
     ·cDNA合成与Rsa Ⅰ酶切第68-69页
     ·消减杂交和抑制PCR第69-71页
     ·PCR鉴定插入片段第71页
     ·阳性克隆的序列测定及其同源性分析第71-77页
     ·表达谱分析第77-79页
   ·讨论第79-83页
     ·细胞结构相关基因第80页
     ·能量和代谢相关基因第80-81页
     ·防御胁迫相关基因第81页
     ·信号转导相关基因第81-83页
第五章 总结第83-85页
致谢第85-86页
参考文献第86-95页
附录A 攻读硕士期间发表论文第95页

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