1 引言 | 第1-27页 |
·病原 | 第9-12页 |
·流行病学 | 第12页 |
·MD 的发病机制 | 第12-16页 |
·早期溶细胞感染 | 第13页 |
·潜伏感染期 | 第13-14页 |
·第二次溶细胞性感染 | 第14页 |
·肿瘤细胞增生的转化期 | 第14-16页 |
·免疫抑制 | 第16页 |
·毒力的漂移 | 第16-18页 |
·诊断技术 | 第18-23页 |
·病毒分离 | 第18页 |
·病毒抗原和抗体的检测 | 第18页 |
·DNA 探针技术 | 第18页 |
·聚合酶链反应(PCR) 技术 | 第18-23页 |
·免疫接种 | 第23-27页 |
·常规MD 疫苗的类型 | 第23-24页 |
·MD 基因工程疫苗 | 第24-27页 |
2 实验一 血清1 型马立克氏病病毒双重荧光定量PCR 检测方法的建立及应用 | 第27-41页 |
·材料 | 第27页 |
·毒株和菌种 | 第27页 |
·病料 | 第27页 |
·试剂与工具酶 | 第27页 |
·主要仪器 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-32页 |
·MDV1 的FQ-PCR 引物/探针 | 第27-28页 |
·动物试验 | 第28页 |
·病毒培养 | 第28页 |
·病毒DNA 提取 | 第28-29页 |
·常规PCR | 第29页 |
·阳性标准品的制备 | 第29-31页 |
·MDV1 双重FQ-PCR 不交叉反应 | 第31页 |
·MDV1 双重FQ-PCR 检测方法的重复性及敏感性试验 | 第31页 |
·MDV1 双重FQ-PCR 检测方法的特异性试验及对样品的检测 | 第31页 |
·琼脂扩散试验 | 第31-32页 |
·实验结果 | 第32-38页 |
·全基因组的获得 | 第32页 |
·MEQ 基因及OVO 基因PCR 扩增结果 | 第32页 |
·Meq 基因及Ovo 基因鉴定结果 | 第32-34页 |
·MDV1 双重 FQ-PCR 不交叉反应实验结果 | 第34-35页 |
·MDV1 双重 FQ-PCR 检测方法的重复性及敏感性试验结果 | 第35-37页 |
·MDV1 双重 FQ-PCR 检测方法的特异性试验及对样品的检测结果 | 第37-38页 |
·琼脂扩散试验结果 | 第38页 |
·讨论 | 第38-41页 |
3 实验二 三种血清型马立克氏病病毒FQ-PCR 检测方法的建立及其在疫苗研究中的应用 | 第41-63页 |
·材料 | 第41页 |
·毒株和菌种 | 第41页 |
·试剂与工具酶 | 第41页 |
·主要仪器 | 第41页 |
·实验方法 | 第41-46页 |
·MDV 的FQ-PCR 引物/探针 | 第41-42页 |
·病毒培养 | 第42页 |
·病毒DNA 提取 | 第42页 |
·常规PCR 反应 | 第42页 |
·阳性标准品的制备 | 第42-44页 |
·MDV 双重FQ-PCR 不交叉反应 | 第44页 |
·MDV 双重FQ-PCR 检测方法的重复性及敏感性试验 | 第44页 |
·MDV 双重FQ-PCR 检测方法的特异性试验 | 第44页 |
·MDV 双重FQ-PCR 检测方法在疫苗株体外增殖研究中的应用 | 第44-46页 |
·实验结果 | 第46-60页 |
·全基因的获得 | 第46页 |
·DNA 聚合酶及SORF1 基因 PCR 扩增结果 | 第46-47页 |
·DNA 聚合酶基因及SORF1 基因鉴定结果 | 第47-49页 |
·MDV1、MDV2、MDV3 双重FQ-PCR 不交叉反应实验结果 | 第49-50页 |
·MDV2、MDV3 双重FQ-PCR 检测方法的重复性及敏感性试验结果 | 第50-52页 |
·MDV2、MDV3 双重FQ-PCR 检测方法的特异性试验 | 第52-53页 |
·三种血清型疫苗种毒效价的测定 | 第53-54页 |
·应用MDV1 双重FQ-PCR 检测方法测定814 株疫苗的病毒载量 | 第54-56页 |
·应用MDV2 双重FQ-PCR 检测方法测定SBI 株疫苗的病毒载量 | 第56-58页 |
·应用MDV3 双重 FQ-PCR 检测方法测定FC-126 株疫苗的病毒载量 | 第58-60页 |
·双重FQ-PCR 方法测定不同时间单位蚀斑的病毒载量 | 第60页 |
·讨论 | 第60-63页 |
4 实验三 应用FQ-PCR 方法监测三种血清型疫苗毒在鸡体内动态变化规律及其免疫相关性 | 第63-76页 |
·材料 | 第63页 |
·毒株和疫苗株 | 第63页 |
·细胞 | 第63页 |
·主要试剂 | 第63页 |
·主要器材 | 第63页 |
·实验方法 | 第63-65页 |
·病毒的准备 | 第63页 |
·试验动物 | 第63页 |
·病毒培养 | 第63-64页 |
·病毒全基因组的提取 | 第64页 |
·MDV 的双重FQ-PCR 检测方法检测病毒 | 第64页 |
·三价苗的配制 | 第64页 |
·三价苗与CV1988 免疫效力试验 | 第64-65页 |
·统计学分析 | 第65页 |
·结果 | 第65-72页 |
·三价苗在鸡体内的增殖情况 | 第65-66页 |
·单价苗 CV1988 对强毒在鸡体内复制的影响 | 第66-67页 |
·免疫三价苗对强毒在鸡体内复制的影响 | 第67-68页 |
·强毒对三价苗中三种血清型病毒在鸡体内复制的影响 | 第68-71页 |
·免疫保护实验结果 | 第71-72页 |
·讨论 | 第72-76页 |
5 结论 | 第76-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-84页 |
作者简介 | 第84页 |