| 独创性声明 | 第1-7页 |
| LIST OF ABBREVIATION | 第7-9页 |
| 摘要 | 第9-11页 |
| 引言 | 第11-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-35页 |
| ·发根农杆菌及毛状根 | 第12-28页 |
| ·发根农杆菌 | 第12页 |
| ·发根农杆菌的Ri质粒 | 第12-16页 |
| ·Ri质粒的结构与功能 | 第12-13页 |
| ·Ri质粒Vir区基因结构与功能 | 第13-14页 |
| ·Ri质粒T区的基因结构与功能 | 第14-16页 |
| ·发根农杆菌Ri质粒与根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)Ti质粒立的比较 | 第16页 |
| ·发根农杆菌诱导毛状根形成的机制 | 第16-17页 |
| ·毛状根的诱导方法 | 第17-18页 |
| ·植物体直接接种法 | 第17-18页 |
| ·外植体共培养法 | 第18页 |
| ·原生质体共培养法 | 第18页 |
| ·影响发根农杆菌遗传转化效率的因素 | 第18-21页 |
| ·菌株 | 第18页 |
| ·Vir区基因的影响 | 第18页 |
| ·发根农杆菌染色体基因的影响 | 第18-19页 |
| ·外植体对遗传转化的影响 | 第19页 |
| ·化学因子 | 第19-20页 |
| ·物理因子 | 第20页 |
| ·培养方法 | 第20-21页 |
| ·毛状根的特性 | 第21页 |
| ·毛状根的鉴定 | 第21-22页 |
| ·毛状根在生产植物次生代谢物方面的应用 | 第22-28页 |
| ·植物的次生代谢 | 第22页 |
| ·植物次生代谢产物的种类 | 第22页 |
| ·植物次生代谢产物的作用 | 第22-23页 |
| ·毛状根生产次生代谢产物 | 第23-24页 |
| ·提高毛状根生产能力的技术 | 第24-26页 |
| ·生物反应器对毛状根次生代谢产物的影响 | 第26-28页 |
| ·八角莲研究概况 | 第28-30页 |
| ·分布及资源现状 | 第28页 |
| ·八角莲生活史 | 第28-29页 |
| ·化学成分 | 第29-30页 |
| ·木脂素类 | 第29-30页 |
| ·氨基酸类 | 第30页 |
| ·微量元素 | 第30页 |
| ·鬼臼毒素资源研究现状 | 第30-34页 |
| ·鬼臼毒素及其作用机制 | 第30-31页 |
| ·解决鬼臼毒素资源短缺的几条途径 | 第31-34页 |
| ·化学合成 | 第31-32页 |
| ·从植物中提取是目前获得鬼臼毒素的主要途径 | 第32页 |
| ·植物细胞组织培养是获取鬼臼毒素的一条重要途径 | 第32-33页 |
| ·利用植物内生菌发酵是一条全新的途径 | 第33-34页 |
| ·课题的研究思路与内容 | 第34-35页 |
| ·课题的研究思路 | 第34页 |
| ·研究内容 | 第34-35页 |
| 1) 八角莲毛状根诱导培养体系的建立 | 第34页 |
| 2) 八角莲毛状根中鬼臼毒素含量分析 | 第34-35页 |
| 第二章 八角莲毛状根遗传转化体系的建立 | 第35-59页 |
| ·研究材料 | 第35-38页 |
| ·植物材料 | 第35页 |
| ·发根农杆菌菌株 | 第35页 |
| ·实验试剂 | 第35-38页 |
| ·研究方法 | 第38-46页 |
| ·菌株的活化 | 第38页 |
| ·外植体的制备 | 第38页 |
| ·外植体的转化 | 第38-39页 |
| ·毛状根的除菌及培养 | 第39页 |
| ·八角莲毛状根诱导率的计算 | 第39页 |
| ·毛状根的检测 | 第39-46页 |
| ·发根农杆菌15834的质粒DNA的提取 | 第39-40页 |
| ·八角莲基因组DNA的提取 | 第40页 |
| ·毛状根的PCR检测 | 第40-41页 |
| ·PCR—Southen分子杂交检测目的基因 | 第41-46页 |
| ·结果与讨论 | 第46-56页 |
| ·毛状根诱导过程观察 | 第46页 |
| ·毛状根的诱导与培养 | 第46-55页 |
| ·不同菌株对诱导率的影响 | 第49页 |
| ·八角莲外植体不同部位对转化的影响 | 第49-50页 |
| ·光照和黑暗条件下对毛状根诱导率的影响 | 第50-51页 |
| ·不同激素组合对八角莲转化效率的影响 | 第51-52页 |
| ·预培养时间对毛状根诱导率的影响 | 第52-53页 |
| ·共培养时间对诱导率的影响 | 第53-55页 |
| ·15834转染获得的毛状根的PCR、PCR-Southern鉴定 | 第55-56页 |
| ·小结 | 第56-59页 |
| 第三章 八角莲毛状根有效成分分析 | 第59-67页 |
| ·仪器、试剂与材料 | 第59-60页 |
| ·仪器 | 第59页 |
| ·试剂与材料 | 第59-60页 |
| ·方法 | 第60页 |
| ·色谱条件 | 第60页 |
| ·标准曲线的制备 | 第60页 |
| ·待测样品制备 | 第60页 |
| ·结果与分析 | 第60-65页 |
| ·含量测定方法 | 第60-61页 |
| ·标准曲线的制备 | 第60-61页 |
| ·八角莲样品及鬼臼毒素对照品色谱图 | 第61页 |
| ·八角莲毛状根与八角莲组培根、野生根中鬼臼毒素含量的比较 | 第61-63页 |
| ·不同培养条件下的八角莲毛状根中鬼臼毒素含量的比较 | 第63页 |
| ·八角莲毛状根所形成的愈伤组织与八角莲非转化愈伤组织中鬼臼毒素含量的比较 | 第63-65页 |
| ·小结 | 第65-66页 |
| ·不足与展望 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-75页 |
| 创新点 | 第75-76页 |
| 硕士期间承担课题及发表文章 | 第76-77页 |
| 致谢 | 第77-78页 |
