| 目录 | 第1-4页 |
| 中文摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩写简表 | 第8-9页 |
| 1 引言 | 第9-18页 |
| ·视网膜的结构 | 第9-10页 |
| ·水平细胞的功能与其表达的缝隙连接蛋白 | 第10-12页 |
| ·缝隙连接(电突触)的结构与功能 | 第12-14页 |
| ·缝隙连接的研究现状 | 第14-15页 |
| ·视网膜水平细胞中的缝隙连接蛋白仍然有待鉴定 | 第15-18页 |
| 2 材料和方法 | 第18-30页 |
| ·材料 | 第18-22页 |
| ·视网膜和水平细胞分离 | 第18页 |
| ·cDNA 合成及单细胞反转录聚合酶链式反应 | 第18-19页 |
| ·RACE | 第19页 |
| ·体外转录及爪蟾卵母细胞微注射 | 第19页 |
| ·核酸片段的克隆及限制性内切酶反应 | 第19-20页 |
| ·缓冲液配方 | 第20-22页 |
| ·方法 | 第22-30页 |
| ·兔视网膜的分离 | 第22页 |
| ·兔视网膜组织总RNA 的抽提 | 第22页 |
| ·第一链cDNA 的合成 | 第22-23页 |
| ·PCR | 第23页 |
| ·PCR 扩增片段的克隆 | 第23页 |
| ·用DAPI 标记水平细胞细胞核 | 第23页 |
| ·兔视网膜水平细胞急性分离 | 第23-24页 |
| ·单细胞反转录聚合酶链式反应 | 第24-26页 |
| ·DNaseI 消化基因组 | 第24页 |
| ·反转录 | 第24-25页 |
| ·PCR 扩增 | 第25-26页 |
| ·5’-RACE 和3’-RACE | 第26-27页 |
| ·体外转录与产物RNA 的纯化 | 第27-28页 |
| ·爪蟾卵母细胞的微注射, | 第28-29页 |
| ·其余限制性内切酶酶切反应,琼脂糖凝胶电泳,质粒抽提,转化等均参见《分子克隆》。质粒小抽,PCR 产物纯化试剂盒方法均参见厂商提供的方法 | 第29-30页 |
| 3 结果 | 第30-43页 |
| ·兔缝隙连接蛋白50,57 的部分基因的克隆 | 第30-35页 |
| ·单细胞RT-PCR 鉴定兔视网膜A 类水平细胞中connexi1150,57 的转录 | 第35-37页 |
| ·兔缝隙连接蛋白Cx50,Cx57 的全长基因的克隆 | 第37-40页 |
| ·兔缝隙连接蛋白Cx50 和Cx57 在爪蟾卵母细胞中的表达 | 第40-43页 |
| ·缝隙连接蛋白基因爪蟾卵母细胞表达质粒的构建 | 第40页 |
| ·缝隙连接蛋白-绿色荧光蛋白融合蛋白爪蟾卵母细胞表达质粒的构建 | 第40-41页 |
| ·体外转录 | 第41-42页 |
| ·爪蟾卵母细胞微注射 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-51页 |
| ·克隆兔缝隙连接蛋白50 和57 的部分核酸序列 | 第43页 |
| ·在形态上鉴定了的急性分离水平细胞上鉴定了Connexi1150 和57 的转录 | 第43-47页 |
| ·A 类水平细胞急性分离方法的建立 | 第43-44页 |
| ·单细胞RT-PCR 分别检测了A 类水平细胞中connexi1150 和57 的mRNA.. | 第44-46页 |
| ·单细胞多重RT-PCR 鉴定了connexi1150 和57 有可能在一个A 类水平细胞中同时转录 | 第46-47页 |
| ·兔缝隙连接蛋白50,57 全长基因的克隆 | 第47-50页 |
| ·兔缝隙连接蛋白Cx50 在爪蟾卵母细胞中的表达 | 第50-51页 |
| ·Cx50 的GFP 融合蛋白成功地转运到了膜上 | 第50-51页 |
| 5 致谢 | 第51-52页 |
| 6 参考文献 | 第52-59页 |
