| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 植物抗冻机制及CBF基因在植物抗冻中的作用 | 第10-24页 |
| 第一节 植物在低温胁迫下的伤害机制 | 第10-12页 |
| 1.低温驯化 | 第10-11页 |
| 2.低温引起的细胞伤害 | 第11-12页 |
| ·冰冻时植物体内冰晶的形成和水份的再分配 | 第11页 |
| ·冰冻脱水所引起的伤害 | 第11-12页 |
| 第二节 植物冻害胁迫的感受 | 第12-14页 |
| 1.Ca~(2+)细胞内转导低温信号的第二信使 | 第12页 |
| 2.冷信号转导中的蛋白质磷酸化和去磷酸化反应 | 第12-13页 |
| 3.ABA在低温信号传导中的作用 | 第13-14页 |
| 第三节 低温驯化植物的生理生化变化 | 第14-17页 |
| 1.冷诱导基因在低温驯化过程中的作用 | 第14-16页 |
| ·冷诱导基因COR15a | 第14-15页 |
| ·冷诱导基因AFPs | 第15-16页 |
| ·LEA蛋白 | 第16页 |
| 2.CRT／DRE元件在低温驯化中的作用 | 第16-17页 |
| 第四节 CBF基因家族与植物抗冻性 | 第17-24页 |
| 1.CBF基因家族的发现 | 第17-18页 |
| 2.CBF基因的结构特点 | 第18-19页 |
| 3.CBF基因的定位 | 第19页 |
| 4.CBF基因的表达和调控 | 第19-22页 |
| ·CBF基因是受低温诱导的转录因子 | 第19-20页 |
| ·CBF基因的冷诱导表达不涉及自身调节 | 第20页 |
| ·ICE基因对CBF的调控 | 第20-22页 |
| ·HOS1对CBF基因的调控 | 第22页 |
| ·HvCBF2直接受到低温的调控 | 第22页 |
| 5.CBF基因的生理生化功能与植物的抗冻性 | 第22-24页 |
| 第二章 转CBF1基因烟草的遗传分析和抗逆性研究 | 第24-64页 |
| 第一节 转CBF1基因烟草后代的遗传分析 | 第24-29页 |
| 1 前言 | 第24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-26页 |
| ·植物材料的培养 | 第24-25页 |
| ·卡那霉素抗性检测 | 第25页 |
| ·数据的统计分析 | 第25页 |
| ·CBF1基因的PCR检测 | 第25-26页 |
| 3 结果与分析 | 第26-29页 |
| ·T代烟草小苗的卡那霉素筛选 | 第26页 |
| ·T2代烟草小苗的卡那霉素筛选 | 第26-27页 |
| ·T3代烟草小苗的卡那霉素筛选实验和转基因烟草的PCR鉴定 | 第27-29页 |
| 第二节 转化烟草中CBF1基因的分子鉴定 | 第29-36页 |
| 1 材料和方法 | 第29-34页 |
| ·转基因烟草的Southern杂交检测 | 第29-32页 |
| ·转基因烟草的Northern杂交检测 | 第32-34页 |
| 2.结果和分析 | 第34-36页 |
| ·CBF1基因的Southern杂交分析 | 第34-35页 |
| ·转CBF1基因T3代烟草的Northern杂交分析 | 第35-36页 |
| 第三节 转CBF1烟草植株的抗冻性测定 | 第36-40页 |
| 1 前言 | 第36页 |
| 2 材料和方法 | 第36-37页 |
| ·烟草小苗的培养 | 第36-37页 |
| ·电导率法测定烟草存活率 | 第37页 |
| ·转基因烟草小苗抗冻性测定 | 第37页 |
| 3.结果和分析 | 第37-40页 |
| ·不同低温温度对转基因烟草和野生型烟草存活率的影响 | 第37-38页 |
| ·转基因烟草和野生型烟草小苗抗冻性比较 | 第38-40页 |
| 第四节 转基因烟草抗旱和抗盐性测定 | 第40-46页 |
| 1 前言 | 第40页 |
| 2 材料和方法 | 第40-41页 |
| ·烟草小苗的培养 | 第40页 |
| ·不同PEG浓度的MS培养基配制 | 第40页 |
| ·转基因烟草的耐干旱测定 | 第40-41页 |
| ·转基因烟草耐高盐测定 | 第41页 |
| 3 结果和分析 | 第41-46页 |
| ·T2—19转基因烟草和野生型烟草的耐干旱性 | 第41-43页 |
| ·空气干燥法对转基因株系的耐干旱性测定 | 第43-44页 |
| ·转基因烟草抗盐性 | 第44-46页 |
| 第五节 转基因烟草的叶绿素荧光值和脯氨酸含量测定 | 第46-53页 |
| 1 前言 | 第46页 |
| 2 材料和方法 | 第46-49页 |
| ·烟草小苗的培养 | 第46-47页 |
| ·叶绿素荧光值的测定 | 第47-48页 |
| ·脯氨酸含量的测定 | 第48-49页 |
| 3 结果和分析 | 第49-53页 |
| ·低温对转基因烟草和野生型烟草叶绿素荧光值的影响 | 第49-50页 |
| ·转CBF1基因对烟草植株脯氨酸含量的影响 | 第50-53页 |
| 第六节 转基因烟草后代的表型变异和T—DNA侧翼序列分析 | 第53-62页 |
| 1 前言 | 第53-54页 |
| 2 材料和方法 | 第54-56页 |
| ·烟草的培养和表型观察 | 第54页 |
| ·转化植株的T—DNA插入位点的确定 | 第54-56页 |
| 3 结果和分析 | 第56-62页 |
| ·转基因植株小苗生长的变异 | 第56-57页 |
| ·转基因烟草后代花器官和叶子的变异 | 第57-59页 |
| ·转基因烟草T—DNA侧翼序列的克隆和分析 | 第59-60页 |
| ·T—DNA插入区侧翼序列与GenBank database的比对 | 第60-62页 |
| 第七节 讨论 | 第62-64页 |
| 1.转CBF1烟草的抗逆境分析 | 第62-63页 |
| 2.CBF1基因的组成性表达和烟草植株的表型影响 | 第63-64页 |
| 第三章 展望 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
