摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第10-18页 |
1.1 木聚糖和木聚糖酶简介 | 第10-12页 |
1.1.1 木聚糖酶的分类 | 第11-12页 |
1.1.2 木聚糖酶的催化机制 | 第12页 |
1.2 木聚糖酶在工业上的应用 | 第12-14页 |
1.2.1 木聚糖酶在造纸行业上的应用 | 第12-13页 |
1.2.2 木聚糖酶在食品与饲料行业上的应用 | 第13-14页 |
1.2.3 木聚糖酶在生物燃料行业上的应用 | 第14页 |
1.3 木聚糖酶的研究进展 | 第14-15页 |
1.4 大肠杆菌表达系统 | 第15-16页 |
1.5 毕赤酵母表达系统 | 第16-17页 |
1.6 本研究的研究目的及意义 | 第17-18页 |
第2章 材料与方法 | 第18-39页 |
2.1 实验材料 | 第18-22页 |
2.1.1 菌株与质粒 | 第18-19页 |
2.1.2 主要仪器和设备 | 第19-20页 |
2.1.3 主要试剂和培养基 | 第20-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-39页 |
2.2.1 产木聚糖酶的蛾微杆菌YD-01基因组分析 | 第22-24页 |
2.2.2 木聚糖酶基因克隆到pET28a载体 | 第24-28页 |
2.2.3 木聚糖酶基因在 E.coli Rosetta(DE3)进行原核表达 | 第28-31页 |
2.2.4 木聚糖酶的活性检测 | 第31-32页 |
2.2.5 木聚糖酶Xyn1923的酶学性质研究 | 第32-33页 |
2.2.6 截短木聚糖酶基因 Xyn As 在毕赤酵母中的表达 | 第33-39页 |
第3章 实验结果 | 第39-54页 |
3.1 木聚糖基因在E.coli Rosstea(DE3)中表达和纯化及浓度检测 | 第39-46页 |
3.1.1 蛾微杆菌YD-01基因组的提取 | 第39页 |
3.1.2 PCR扩增木聚糖酶基因 | 第39-41页 |
3.1.3 木聚糖酶基因克隆到 pGEM-TEasy 载体上 | 第41-42页 |
3.1.4 木聚糖酶基因克隆到pET28a载体上 | 第42-44页 |
3.1.5 木聚糖酶基因在 E.coli Rosetta(DE3)中表达 | 第44-46页 |
3.1.6 BSA法检测木聚糖酶Xyn1923 浓度 | 第46页 |
3.2 木聚糖酶Xyn1923酶学性质分析 | 第46-51页 |
3.2.1 木糖标准曲线的绘制 | 第46-47页 |
3.2.2 木聚糖酶Xyn1923的最适pH | 第47-48页 |
3.2.3 木聚糖酶Xyn1923的最适温度 | 第48页 |
3.2.4 木聚糖酶Xyn1923的pH稳定性 | 第48-49页 |
3.2.5 木聚糖酶Xyn1923的温度稳定性 | 第49-50页 |
3.2.6 金属离子对木聚糖酶Xyn1923活性的影响 | 第50-51页 |
3.2.7 木聚糖酶Xyn1923的比活力 | 第51页 |
3.3 木聚糖酶基因xynAs在毕赤酵母中的表达 | 第51-54页 |
3.3.1 PCR 扩增截短的木聚糖酶基因 xynAs | 第51页 |
3.3.2 表达载体 pPIC9K-xynAs 的构建 | 第51-53页 |
3.3.3 阳性转化子的筛选 | 第53页 |
3.3.4 截短木聚糖酶基因 xynAs 在毕赤酵母分泌表达 | 第53-54页 |
第4章 总结与展望 | 第54-56页 |
4.1 本实验的主要研究内容及结论 | 第54页 |
4.2 本研究的创新之处 | 第54页 |
4.3 实验中存在的问题及工作展望 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-61页 |
致谢 | 第61-62页 |
符号缩写说明 | 第62页 |