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蛾微杆菌YD-01木聚糖酶基因的克隆、表达及酶学性质研究

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-7页
第1章 绪论第10-18页
    1.1 木聚糖和木聚糖酶简介第10-12页
        1.1.1 木聚糖酶的分类第11-12页
        1.1.2 木聚糖酶的催化机制第12页
    1.2 木聚糖酶在工业上的应用第12-14页
        1.2.1 木聚糖酶在造纸行业上的应用第12-13页
        1.2.2 木聚糖酶在食品与饲料行业上的应用第13-14页
        1.2.3 木聚糖酶在生物燃料行业上的应用第14页
    1.3 木聚糖酶的研究进展第14-15页
    1.4 大肠杆菌表达系统第15-16页
    1.5 毕赤酵母表达系统第16-17页
    1.6 本研究的研究目的及意义第17-18页
第2章 材料与方法第18-39页
    2.1 实验材料第18-22页
        2.1.1 菌株与质粒第18-19页
        2.1.2 主要仪器和设备第19-20页
        2.1.3 主要试剂和培养基第20-22页
    2.2 实验方法第22-39页
        2.2.1 产木聚糖酶的蛾微杆菌YD-01基因组分析第22-24页
        2.2.2 木聚糖酶基因克隆到pET28a载体第24-28页
        2.2.3 木聚糖酶基因在 E.coli Rosetta(DE3)进行原核表达第28-31页
        2.2.4 木聚糖酶的活性检测第31-32页
        2.2.5 木聚糖酶Xyn1923的酶学性质研究第32-33页
        2.2.6 截短木聚糖酶基因 Xyn As 在毕赤酵母中的表达第33-39页
第3章 实验结果第39-54页
    3.1 木聚糖基因在E.coli Rosstea(DE3)中表达和纯化及浓度检测第39-46页
        3.1.1 蛾微杆菌YD-01基因组的提取第39页
        3.1.2 PCR扩增木聚糖酶基因第39-41页
        3.1.3 木聚糖酶基因克隆到 pGEM-TEasy 载体上第41-42页
        3.1.4 木聚糖酶基因克隆到pET28a载体上第42-44页
        3.1.5 木聚糖酶基因在 E.coli Rosetta(DE3)中表达第44-46页
        3.1.6 BSA法检测木聚糖酶Xyn1923 浓度第46页
    3.2 木聚糖酶Xyn1923酶学性质分析第46-51页
        3.2.1 木糖标准曲线的绘制第46-47页
        3.2.2 木聚糖酶Xyn1923的最适pH第47-48页
        3.2.3 木聚糖酶Xyn1923的最适温度第48页
        3.2.4 木聚糖酶Xyn1923的pH稳定性第48-49页
        3.2.5 木聚糖酶Xyn1923的温度稳定性第49-50页
        3.2.6 金属离子对木聚糖酶Xyn1923活性的影响第50-51页
        3.2.7 木聚糖酶Xyn1923的比活力第51页
    3.3 木聚糖酶基因xynAs在毕赤酵母中的表达第51-54页
        3.3.1 PCR 扩增截短的木聚糖酶基因 xynAs第51页
        3.3.2 表达载体 pPIC9K-xynAs 的构建第51-53页
        3.3.3 阳性转化子的筛选第53页
        3.3.4 截短木聚糖酶基因 xynAs 在毕赤酵母分泌表达第53-54页
第4章 总结与展望第54-56页
    4.1 本实验的主要研究内容及结论第54页
    4.2 本研究的创新之处第54页
    4.3 实验中存在的问题及工作展望第54-56页
参考文献第56-61页
致谢第61-62页
符号缩写说明第62页

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