| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-20页 |
| 第二章 基因工程菌毕赤嗜甲醇酵母inu-26高密度培养表达黑曲霉菊粉内切酶 | 第20-38页 |
| 1 前言 | 第20页 |
| 2 实验材料 | 第20-23页 |
| ·菌种 | 第21页 |
| ·培养基及其它营养成分 | 第21-22页 |
| ·实验仪器及设备 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| 3 实验方法 | 第23-24页 |
| ·培养方法 | 第23页 |
| ·摇瓶培养 | 第23页 |
| ·发酵罐培养 | 第23页 |
| ·测定方法 | 第23-24页 |
| ·酵母细胞密度测定 | 第23-24页 |
| ·pH值测定 | 第24页 |
| ·溶氧(DO)测定 | 第24页 |
| ·还原糖测定 | 第24页 |
| ·酶活测定 | 第24页 |
| ·蛋白定性 | 第24页 |
| ·甲醇测定 | 第24页 |
| 4 结果与讨论 | 第24-36页 |
| ·摇瓶培养条件的研究 | 第24-31页 |
| ·不同碳源对酵母生长的影响 | 第24-25页 |
| ·微量元素浓度对酵母生长的影响 | 第25-26页 |
| ·不同诱导培养基对酶表达的影响 | 第26页 |
| ·菌体密度对酶表达的影响 | 第26-27页 |
| ·甲醇浓度对酶表达的影响 | 第27-28页 |
| ·pH值对酶表达的影响 | 第28-29页 |
| ·甲醇诱导周期对酶表达的影响 | 第29-30页 |
| ·优化诱导培养基与INVITROGEN系统诱导培养基产酶水平的比较 | 第30-31页 |
| ·高密度培养培养基的优化 | 第31页 |
| ·高密度培养 | 第31-36页 |
| ·分批培养阶段 | 第31-33页 |
| ·发酵培养基F_1,F_2,F_3的生长模型 | 第32-33页 |
| ·补料-分批培养阶段的控制 | 第33-34页 |
| ·混合补料诱导阶段的控制 | 第34页 |
| ·100%甲醇诱导阶段的控制 | 第34页 |
| ·菌体密度对诱导产酶的影响 | 第34-36页 |
| 5 小结 | 第36-38页 |
| 第三章 酶的特性研究 | 第38-44页 |
| 1 前言 | 第38页 |
| 2 材料及方法 | 第38-39页 |
| ·粗酶液 | 第38页 |
| ·主要仪器及试剂 | 第38-39页 |
| ·温度对酶活性的影响 | 第39页 |
| ·温度对酶稳定性的影响 | 第39页 |
| ·pH对酶活性的影响 | 第39页 |
| ·pH对酶稳定性的影响 | 第39页 |
| ·金属离子和化学试剂对酶活性的影响 | 第39页 |
| ·酶的底物特异性 | 第39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-43页 |
| ·温度对酶活性的影响 | 第39-40页 |
| ·温度对酶稳定性的影响 | 第40页 |
| ·pH对酶活性的影响 | 第40-41页 |
| ·pH对酶稳定性的影响 | 第41-42页 |
| ·金属离子对酶活性的影响 | 第42页 |
| ·酶的底物特异性 | 第42-43页 |
| 4 小结 | 第43-44页 |
| 第四章 菊粉提取工艺条件的研究 | 第44-51页 |
| 1 前言 | 第44页 |
| 2 材料与方法 | 第44-46页 |
| ·试验材料 | 第44页 |
| ·主要仪器 | 第44-45页 |
| ·菊苣粉的制备 | 第45页 |
| ·菊苣粉主要成分分析 | 第45页 |
| ·菊苣粉中总糖的测定方法 | 第45页 |
| ·菊粉的提取 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-50页 |
| ·菊苣粉成分分析 | 第46-47页 |
| ·菊苣粉中总糖的测定 | 第47-48页 |
| ·菊粉的提取 | 第48-50页 |
| 4 小结 | 第50-51页 |
| 第五章 酶解工艺及酶解产物的分析 | 第51-60页 |
| 1 前言 | 第51页 |
| 2 实验材料与方法 | 第51-53页 |
| ·实验材料 | 第51页 |
| ·主要仪器及设备 | 第51-52页 |
| ·主要试剂 | 第52页 |
| ·酶解工艺 | 第52页 |
| ·酶解产物的TLC分析 | 第52-53页 |
| ·酶解产物的离子色谱分析(IC) | 第53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-59页 |
| ·酶浓度对生产低聚果糖的影响 | 第53-55页 |
| ·底物浓度对生产低聚果糖的影响 | 第55页 |
| ·酶解产物的薄层层析(TLC)分析 | 第55-56页 |
| ·酶解产物的离子色谱(IC)分析 | 第56-59页 |
| 4 小结 | 第59-60页 |
| 第六章 结论 | 第60-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 附录 | 第68页 |