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基因工程菊粉内切酶毕赤酵母表达优化与菊寡糖制备研究

摘要第1-7页
Abstract第7-9页
第一章 文献综述第9-20页
第二章 基因工程菌毕赤嗜甲醇酵母inu-26高密度培养表达黑曲霉菊粉内切酶第20-38页
 1 前言第20页
 2 实验材料第20-23页
   ·菌种第21页
   ·培养基及其它营养成分第21-22页
   ·实验仪器及设备第22-23页
   ·主要试剂第23页
 3 实验方法第23-24页
   ·培养方法第23页
     ·摇瓶培养第23页
     ·发酵罐培养第23页
   ·测定方法第23-24页
     ·酵母细胞密度测定第23-24页
     ·pH值测定第24页
     ·溶氧(DO)测定第24页
     ·还原糖测定第24页
     ·酶活测定第24页
     ·蛋白定性第24页
     ·甲醇测定第24页
 4 结果与讨论第24-36页
   ·摇瓶培养条件的研究第24-31页
     ·不同碳源对酵母生长的影响第24-25页
     ·微量元素浓度对酵母生长的影响第25-26页
     ·不同诱导培养基对酶表达的影响第26页
     ·菌体密度对酶表达的影响第26-27页
     ·甲醇浓度对酶表达的影响第27-28页
     ·pH值对酶表达的影响第28-29页
     ·甲醇诱导周期对酶表达的影响第29-30页
     ·优化诱导培养基与INVITROGEN系统诱导培养基产酶水平的比较第30-31页
     ·高密度培养培养基的优化第31页
   ·高密度培养第31-36页
     ·分批培养阶段第31-33页
       ·发酵培养基F_1,F_2,F_3的生长模型第32-33页
     ·补料-分批培养阶段的控制第33-34页
     ·混合补料诱导阶段的控制第34页
     ·100%甲醇诱导阶段的控制第34页
     ·菌体密度对诱导产酶的影响第34-36页
 5 小结第36-38页
第三章 酶的特性研究第38-44页
 1 前言第38页
 2 材料及方法第38-39页
   ·粗酶液第38页
   ·主要仪器及试剂第38-39页
   ·温度对酶活性的影响第39页
   ·温度对酶稳定性的影响第39页
   ·pH对酶活性的影响第39页
   ·pH对酶稳定性的影响第39页
   ·金属离子和化学试剂对酶活性的影响第39页
   ·酶的底物特异性第39页
 3 结果与分析第39-43页
   ·温度对酶活性的影响第39-40页
   ·温度对酶稳定性的影响第40页
   ·pH对酶活性的影响第40-41页
   ·pH对酶稳定性的影响第41-42页
   ·金属离子对酶活性的影响第42页
   ·酶的底物特异性第42-43页
 4 小结第43-44页
第四章 菊粉提取工艺条件的研究第44-51页
 1 前言第44页
 2 材料与方法第44-46页
   ·试验材料第44页
   ·主要仪器第44-45页
   ·菊苣粉的制备第45页
   ·菊苣粉主要成分分析第45页
   ·菊苣粉中总糖的测定方法第45页
   ·菊粉的提取第45-46页
 3 结果与分析第46-50页
   ·菊苣粉成分分析第46-47页
   ·菊苣粉中总糖的测定第47-48页
   ·菊粉的提取第48-50页
 4 小结第50-51页
第五章 酶解工艺及酶解产物的分析第51-60页
 1 前言第51页
 2 实验材料与方法第51-53页
   ·实验材料第51页
   ·主要仪器及设备第51-52页
   ·主要试剂第52页
   ·酶解工艺第52页
   ·酶解产物的TLC分析第52-53页
   ·酶解产物的离子色谱分析(IC)第53页
 3 结果与分析第53-59页
   ·酶浓度对生产低聚果糖的影响第53-55页
   ·底物浓度对生产低聚果糖的影响第55页
   ·酶解产物的薄层层析(TLC)分析第55-56页
   ·酶解产物的离子色谱(IC)分析第56-59页
 4 小结第59-60页
第六章 结论第60-62页
参考文献第62-67页
致谢第67-68页
附录第68页

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