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对虾白斑综合症病毒(WSSV)囊膜基因vp19、vp28的克隆、融合表达及中和抗体的制备

第一章 对虾白斑综合症病毒第1-28页
   ·对虾白斑综合症的病原体第11-13页
     ·对虾白斑综合症病毒(WSSV)的命名第11-12页
     ·对虾白斑综合症病毒(WSSV)的分类地位第12-13页
   ·对虾白斑综合症的症状及病理变化第13页
     ·对虾白斑综合症的症状第13页
     ·对虾白斑综合症的病理变化第13页
   ·WSSV在对虾体内的感染增殖及分布第13-15页
     ·WSSV在对虾体内的感染增殖第13-14页
     ·WSSV在感染患病对虾体内的分布第14-15页
   ·WSSV的理化特性第15页
   ·WSSV的大小、形态结构及其检测第15-17页
     ·WSSV的大小、形态结构第15-16页
     ·WSSV的检测第16-17页
   ·WSSV的感染宿主、传播途径及暴发性流行的因素第17-18页
     ·WSSV的感染宿主第17-18页
     ·WSSV的传播途径第18页
     ·WSSV造成对虾养殖重大损失的因素第18页
   ·对虾组织培养及WSSV感染的动物模型第18-19页
     ·对虾组织培养第18-19页
     ·WSSV感染的动物模型第19页
   ·WSSV的基因组及其编码的多肽第19-26页
     ·WSSV的基因组及其稳定性第19-21页
     ·WSSV基因组编码的多肽第21-26页
       ·WSSV病毒粒子的主要结构蛋白第21-25页
       ·编码结构蛋白的基因在基因组中的定位第25页
       ·结构蛋白之间的同源性及其理化特点第25-26页
   ·本研究的背景、目的和意义第26-28页
第二章 囊膜蛋白基因vp19、vp28的克隆、融合表达与纯化第28-43页
   ·前言第28-29页
   ·材料和方法第29-37页
     ·材料第29页
     ·重组表达载体pET-vp(19+28)的构建第29-35页
       ·WSSV病毒基因组的制备第29页
       ·PCR扩增vp19和vp28基因第29-30页
       ·大肠杆菌感受态细胞的制备及质粒的转化和提取第30-31页
       ·vp(28+19)融合基因的克隆第31-32页
       ·重组表达载体的构建第32-35页
     ·外源蛋白在E.coli BL21(DE3)中的表达第35-37页
       ·E.coli BL21(DE3)-pET-vp(19+28)的诱导表达第35页
       ·表达产物的处理第35页
       ·表达产物的SDS-PAGE鉴定第35页
       ·Ni~(2+)柱亲和层析法纯化带His6标记的VP(19+28)蛋白第35-36页
       ·组氨酸亲和层析柱的洗涤、再生和保存第36-37页
   ·结果第37-41页
     ·PCR扩增vp19和vp28基因第37页
     ·vp(28+19)融合基因的克隆第37-39页
     ·重组质粒pET-vp(19+28)的构建和鉴定第39页
     ·外源蛋白在E.coli BL21(DE3)中的表达第39页
     ·亲和层析法纯化带His6标记的VP(19+28)蛋白第39-41页
   ·讨论第41-43页
第三章 囊膜蛋白VP(19+28)多克隆抗体的制备及其对病毒的中和作用第43-48页
   ·引言第43页
   ·材料与方法第43-45页
     ·材料第43页
     ·Bradford法测定蛋白质浓度第43-44页
     ·VP(19+28)多克隆抗血清的制备第44页
     ·多克隆抗体对病毒的中和作用第44-45页
       ·病毒粗提液和健康螯虾粗提液的制备第44页
       ·病毒粗提液的滴度第44-45页
       ·多克隆抗体对病毒的中和作用第45页
   ·结果第45-46页
     ·病毒粗提液的滴度第45页
     ·多克隆抗体对病毒的中和作用第45-46页
   ·讨论第46-48页
参考文献第48-56页
附页第56-59页
硕士期间发表和待发表的文章第59-60页
致谢第60页

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