中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-46页 |
第一节 基因表达差异的研究方法 | 第12-25页 |
1 前言 | 第12页 |
2 基因表达差异的研究方法 | 第12-20页 |
3 mRNA差异显示技术的应用 | 第20-24页 |
4 小结 | 第24-25页 |
第二节 表达序列标签的研究及应用 | 第25-28页 |
1 前言 | 第25页 |
2 表达序列标签的研究及应用 | 第25-27页 |
3 畜禽表达序列标签的研究概况 | 第27-28页 |
4 小结 | 第28页 |
第三节 乌骨鸡遗传特性研究进展 | 第28-44页 |
1 前言 | 第28-29页 |
2 乌骨鸡的营养价值研究 | 第29-33页 |
3 乌骨鸡的药用价值研究 | 第33-34页 |
4 乌骨鸡遗传多样性研究 | 第34-38页 |
5 乌骨鸡特异性状遗传研究进展 | 第38-43页 |
6 小结 | 第43-44页 |
第四节 本试验的总体研究思路及意义 | 第44-46页 |
1 本试验的研究思路 | 第44页 |
2 本研究的目的意义 | 第44-46页 |
第二章 四个品种鸡肝脏差异表达cDNA片段的筛选 | 第46-62页 |
第一节 材料与方法 | 第46-54页 |
1 试验材料 | 第46-49页 |
2 肝脏组织总RNA的提取及纯化 | 第49-51页 |
3 差异显示逆转录PCR (DDRT-PCR) | 第51-52页 |
4 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) | 第52-53页 |
5 差异片段的切取与再扩增 | 第53-54页 |
第二节 试验结果 | 第54-58页 |
1 肝脏组织总RNA的提取及纯化 | 第54-55页 |
2 差异显示逆转录PCR (DDRT-PCR)产物的电泳结果 | 第55页 |
3 差异片段的切取 | 第55-58页 |
4 差异片段的再扩增与回收 | 第58页 |
第三节 讨论与分析 | 第58-61页 |
1 总RNA的抽提 | 第58-59页 |
2 关于DNase Ⅰ处理 | 第59页 |
3 反应条件对试验结果的影响 | 第59-60页 |
4 差异条带的回收和再扩增 | 第60-61页 |
第四节 小结 | 第61-62页 |
第三章 差异表达cDNA片段真实性的验证 | 第62-78页 |
第一节 材料与方法 | 第62-67页 |
1 试验材料 | 第62页 |
2 单链构象多态性(SSCP)分析差异条带单一性 | 第62-64页 |
3 反向Northern杂交验证差异条带的真实表达 | 第64-66页 |
4 Northern杂交 | 第66-67页 |
第二节 试验结果 | 第67-73页 |
1 SSCP筛选结果 | 第67-68页 |
2 反向Northern杂交筛选结果 | 第68-72页 |
3 乌骨鸡差异表达条带的Northern杂交结果 | 第72-73页 |
第三节 讨论与分析 | 第73-76页 |
1 SSCP的原理及特点 | 第73-74页 |
2 Northern杂交和反向Northern杂交 | 第74-76页 |
第四节 小结 | 第76-78页 |
第四章 乌骨鸡肝脏差异表达cDNA片段的克隆和测序 | 第78-92页 |
第一节 材料与方法 | 第79-83页 |
1 试验材料 | 第79页 |
2 真实差异cDNA片段的克隆 | 第79-80页 |
3 转化子的筛选 | 第80页 |
4 质粒DNA提取及纯化 | 第80-81页 |
5 序列测定 | 第81-82页 |
6 确定差异显示cDNA片段序列 | 第82-83页 |
第二节 试验结果 | 第83-88页 |
1 阳性片段的克隆与筛选 | 第83页 |
2 质粒提取和鉴定 | 第83页 |
3 阳性克隆的序列测定 | 第83-84页 |
4 差异显示cDNA片段的序列 | 第84-88页 |
第三节 讨论与分析 | 第88-90页 |
1 PCR产物与载体的连接与克隆效率 | 第88-89页 |
2 关于测序结果 | 第89页 |
3 单引物扩增现象 | 第89-90页 |
第四节 小结 | 第90-92页 |
第五章 乌骨鸡肝脏特异的表达序列标签的初步分析鉴定 | 第92-120页 |
第一节 分析方法 | 第92-94页 |
1 向GENEBANK递交序列 | 第92-93页 |
2 序列相似性搜索 | 第93页 |
3 与差异显示片段同源的已知基因的分析 | 第93页 |
4 未知功能差异显示片段的分析 | 第93-94页 |
第二节 分析结果 | 第94-111页 |
1 序列递交结果 | 第94页 |
2 相似性搜索结果 | 第94-96页 |
3 乌骨鸡差异表达已知基因分析 | 第96-98页 |
4 未知功能ESTs分析 | 第98-111页 |
第三节 讨论与分析 | 第111-118页 |
1 关于ESTs的分析方法 | 第111-115页 |
2 关于乌骨鸡差异显示的基因 | 第115-118页 |
第四节 小结 | 第118-120页 |
第六章 总结 | 第120-122页 |
主要参考文献 | 第122-138页 |
致谢 | 第138页 |
附录 | 第138-140页 |
附录1 常用词语缩写 | 第138页 |
附录2 主要仪器设备 | 第138-139页 |
附录3 所用差异显示引物的序列信息 | 第139-140页 |
附录4 作者简介 | 第140页 |