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乌骨鸡肝脏差异显示(DD)表达序列标签(ESTs)的筛选及分析鉴定

中文摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 文献综述第12-46页
 第一节 基因表达差异的研究方法第12-25页
  1 前言第12页
  2 基因表达差异的研究方法第12-20页
  3 mRNA差异显示技术的应用第20-24页
  4 小结第24-25页
 第二节 表达序列标签的研究及应用第25-28页
  1 前言第25页
  2 表达序列标签的研究及应用第25-27页
  3 畜禽表达序列标签的研究概况第27-28页
  4 小结第28页
 第三节 乌骨鸡遗传特性研究进展第28-44页
  1 前言第28-29页
  2 乌骨鸡的营养价值研究第29-33页
  3 乌骨鸡的药用价值研究第33-34页
  4 乌骨鸡遗传多样性研究第34-38页
  5 乌骨鸡特异性状遗传研究进展第38-43页
  6 小结第43-44页
 第四节 本试验的总体研究思路及意义第44-46页
  1 本试验的研究思路第44页
  2 本研究的目的意义第44-46页
第二章 四个品种鸡肝脏差异表达cDNA片段的筛选第46-62页
 第一节 材料与方法第46-54页
  1 试验材料第46-49页
  2 肝脏组织总RNA的提取及纯化第49-51页
  3 差异显示逆转录PCR (DDRT-PCR)第51-52页
  4 聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)第52-53页
  5 差异片段的切取与再扩增第53-54页
 第二节 试验结果第54-58页
  1 肝脏组织总RNA的提取及纯化第54-55页
  2 差异显示逆转录PCR (DDRT-PCR)产物的电泳结果第55页
  3 差异片段的切取第55-58页
  4 差异片段的再扩增与回收第58页
 第三节 讨论与分析第58-61页
  1 总RNA的抽提第58-59页
  2 关于DNase Ⅰ处理第59页
  3 反应条件对试验结果的影响第59-60页
  4 差异条带的回收和再扩增第60-61页
 第四节 小结第61-62页
第三章 差异表达cDNA片段真实性的验证第62-78页
 第一节 材料与方法第62-67页
  1 试验材料第62页
  2 单链构象多态性(SSCP)分析差异条带单一性第62-64页
  3 反向Northern杂交验证差异条带的真实表达第64-66页
  4 Northern杂交第66-67页
 第二节 试验结果第67-73页
  1 SSCP筛选结果第67-68页
  2 反向Northern杂交筛选结果第68-72页
  3 乌骨鸡差异表达条带的Northern杂交结果第72-73页
 第三节 讨论与分析第73-76页
  1 SSCP的原理及特点第73-74页
  2 Northern杂交和反向Northern杂交第74-76页
 第四节 小结第76-78页
第四章 乌骨鸡肝脏差异表达cDNA片段的克隆和测序第78-92页
 第一节 材料与方法第79-83页
  1 试验材料第79页
  2 真实差异cDNA片段的克隆第79-80页
  3 转化子的筛选第80页
  4 质粒DNA提取及纯化第80-81页
  5 序列测定第81-82页
  6 确定差异显示cDNA片段序列第82-83页
 第二节 试验结果第83-88页
  1 阳性片段的克隆与筛选第83页
  2 质粒提取和鉴定第83页
  3 阳性克隆的序列测定第83-84页
  4 差异显示cDNA片段的序列第84-88页
 第三节 讨论与分析第88-90页
  1 PCR产物与载体的连接与克隆效率第88-89页
  2 关于测序结果第89页
  3 单引物扩增现象第89-90页
 第四节 小结第90-92页
第五章 乌骨鸡肝脏特异的表达序列标签的初步分析鉴定第92-120页
 第一节 分析方法第92-94页
  1 向GENEBANK递交序列第92-93页
  2 序列相似性搜索第93页
  3 与差异显示片段同源的已知基因的分析第93页
  4 未知功能差异显示片段的分析第93-94页
 第二节 分析结果第94-111页
  1 序列递交结果第94页
  2 相似性搜索结果第94-96页
  3 乌骨鸡差异表达已知基因分析第96-98页
  4 未知功能ESTs分析第98-111页
 第三节 讨论与分析第111-118页
  1 关于ESTs的分析方法第111-115页
  2 关于乌骨鸡差异显示的基因第115-118页
 第四节 小结第118-120页
第六章 总结第120-122页
主要参考文献第122-138页
致谢第138页
附录第138-140页
 附录1 常用词语缩写第138页
 附录2 主要仪器设备第138-139页
 附录3 所用差异显示引物的序列信息第139-140页
 附录4 作者简介第140页

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