摘要 | 第1-7页 |
ABSTRACT | 第7-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-23页 |
1. 植物细胞程序性死亡的研究进展 | 第12-16页 |
·动物细胞程序性死亡及分类 | 第12-13页 |
·植物细胞程序性死亡及分类 | 第13-15页 |
·植物细胞程序性死亡发生的场所 | 第15-16页 |
2 细菌质膜通透性及生物膜形成的调控机制 | 第16-19页 |
·细菌质膜上的CidAB/LrgAB体系 | 第16-18页 |
·CidAB/LrgAB体系调控细菌生物膜形成 | 第18-19页 |
·细菌生物膜培养及检测技术研究进展 | 第18页 |
·细菌CidAB/LrgAB调控体系对生物膜的影响 | 第18-19页 |
3 植物叶绿体膜通透性调控蛋白的发现 | 第19页 |
4 模式植物小立碗藓的研究进展和研究意义 | 第19-20页 |
·小立碗藓的生活史 | 第19-20页 |
·小立碗藓在分子生物学上的研究进展 | 第20页 |
5 研究内容及意义 | 第20-23页 |
第二章 材料和方法 | 第23-38页 |
·实验材料 | 第23-24页 |
·植物材料 | 第23页 |
·菌株及原始载体 | 第23页 |
·试剂和主要仪器 | 第23-24页 |
·序列分析和比对 | 第24页 |
·入门载体的构建 | 第24-28页 |
·引物设计 | 第24-25页 |
·植物cDNA克隆获取 | 第25-27页 |
·植物总RNA提取 | 第25-26页 |
·逆转录 | 第26页 |
·RT-PCR | 第26-27页 |
·PCR及产物回收 | 第27页 |
·TOPO反应构建Entry载体 | 第27-28页 |
·转化及阳性克隆鉴定 | 第28页 |
·表达载体的构建 | 第28页 |
·转基因和筛选 | 第28-29页 |
·电转化 | 第28-29页 |
·转基因 | 第29页 |
·筛选 | 第29页 |
·种子萌发和表型观察 | 第29-30页 |
·小立碗藓原丝体培养 | 第30页 |
·小立碗藓敲除载体的构建 | 第30-31页 |
·小立碗藓基因组DNA提取(CTAB法) | 第30页 |
·敲除载体的构建 | 第30-31页 |
·构建同源臂 | 第30-31页 |
·同源臂连接敲除载体 | 第31页 |
·实时定量PCR | 第31-33页 |
·引物设计 | 第31-32页 |
·定量PCR | 第32-33页 |
·原核表达 | 第33-36页 |
·表达载体的构建 | 第33页 |
·目的基因诱导表达 | 第33-34页 |
·SDS-PAGE分析 | 第34页 |
·Western blot检测 | 第34-36页 |
·细菌生物膜检测 | 第36页 |
·拟南芥原生质体提取 | 第36-38页 |
第三章 结果和分析 | 第38-53页 |
·植物LrgB基因的进化分析 | 第38-41页 |
·LrgB从细菌到高等植物的分离与进化 | 第38-40页 |
·几种模式植物LrgB结构域的预测与分析 | 第40页 |
·含有两个LrgB同源基因的植物及其定位预测 | 第40-41页 |
·植物LrgB同源基因在拟南芥中的表达及亚细胞定位 | 第41-44页 |
·拟南芥表达植物LrgB同源基因的表型观察 | 第41-43页 |
·植物LrgB同源基因在拟南芥中的亚细胞定位 | 第43-44页 |
·几种植物中LrgB同源基因的表达模式 | 第44-46页 |
·植物中LrgB同源基因的表达部位及表达量的比较 | 第44-45页 |
·植物中LrgB同源基因的表达模式 | 第45-46页 |
·在细菌中表达小立碗藓LrgB同源基因(PpLrgB) | 第46-51页 |
·PpLrgB对细菌生长的影响 | 第46-47页 |
·PpLrgB对细菌抗氧胁迫的影响 | 第47-48页 |
·PpLrgB对细菌抗生素敏感性的影响 | 第48-49页 |
·PpLrgB对细菌在葡萄糖作为碳源的条件下生长的影响 | 第49-50页 |
·PpLrgB对细菌生物膜形成的影响 | 第50-51页 |
·小立碗藓LrgB同源基因敲除载体构建 | 第51-53页 |
第四章 讨论 | 第53-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
附录 | 第64-66页 |