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高温和氧化条件下酵母细胞应激产生活性物质的研究

1 前言第1-19页
   ·自由基与氧化应激第7-9页
     ·自由基理论第7页
     ·细胞内活性氧的生成第7页
     ·自由基对生命大分子物质的损害第7-9页
     ·氧化应激反应第9页
   ·酿酒酵母的应激反应第9-13页
     ·酿酒酵母的氧化防护体系第9-12页
     ·酿酒酵母的热应激反应第12-13页
   ·应激反应中的调节机制第13-15页
     ·bZIP转录因子第13页
     ·与Cu结合的转录因子第13-14页
     ·锌指转录因子第14页
     ·转录抑制因子第14页
     ·信号转导途径第14-15页
   ·功能性化妆品-活酵母细胞衍生物第15-17页
     ·衰老的自由基理论第15页
     ·皮肤衰老与氧自由基第15-16页
     ·活酵母细胞衍生物的应用第16-17页
   ·本课题的立题依据及研究内容第17-19页
     ·立论依据第17页
     ·论文研究的主要内容第17-18页
     ·论文研究的意义第18-19页
2 材料与方法第19-29页
   ·材料第19-20页
     ·菌种第19页
     ·培养基第19页
     ·试剂第19-20页
     ·仪器第20页
   ·实验方法第20-29页
     ·斜面菌种的活化第20页
     ·种子培养方法第20页
     ·生长曲线的测定方法第20页
     ·细胞数的测定第20-21页
     ·氧化应激实验第21页
     ·热应激实验第21页
     ·活性酵母细胞衍生物(LYCD)和酵母提取物(YE)的制备第21页
     ·蛋白含量的测定第21-22页
     ·样品中GSH含量的测定第22页
     ·SOD酶活力的测定第22-23页
     ·CAT酶活力的测定第23页
     ·样品中丙二醛浓度的测定第23-24页
     ·双向凝胶电泳第24-25页
     ·LYCD保护细胞抗氧化能力的测试第25-26页
     ·LYCD制备条件的优化第26页
     ·抗极端环境酵母菌的筛选-耐高温突变株的筛选第26-27页
     ·抗极端环境酵母突变株和正常酵母在普通培养条件下应激反应的比较第27-28页
     ·抗极端环境酵母突变株产物对细胞抗氧化能力的测试第28页
     ·耐高温酵母胞内抗氧化水平与蛋白的分析第28-29页
3 结果与讨论第29-49页
   ·实验菌株的培养第29-30页
     ·呼吸缺陷突变株的选育第29页
     ·生长曲线的测定第29-30页
   ·线粒体功能在酵母氧化应激反应中的作用第30-32页
     ·H_2O_2致死浓度的确定第30-31页
     ·H_2O_2作用不同时间对酵母细胞的影响第31页
     ·酿酒酵母对H_2O_2的适应性反应第31-32页
   ·线粒体功能对酵母热应激反应的影响第32-35页
     ·致死温度作用时间单因子实验第33页
     ·酵母细胞对高温的适应性反应第33-34页
     ·交叉适应性实验第34-35页
   ·预处理对细胞内抗氧化水平的影响第35-38页
   ·预处理对正常酵母细胞脂质过氧化的保护效应第38页
   ·正常酵母细胞预处理前后应激蛋白的变化第38-41页
   ·LYCD保护细胞抗氧化能力的测试第41-42页
     ·保护作用检测方法的确定第41页
     ·LYCD保护细胞抗氧化能力的测定第41页
     ·不同剂量LYCD对细胞的保护作用第41-42页
   ·LYCD制备条件的优化第42-44页
     ·H_2O_2制备LYCD条件的优化第42-43页
     ·热预处理制备LYCD条件的优化第43-44页
   ·抗极端环境酵母菌-耐高温突变株的筛选第44-45页
     ·紫外诱变致死曲线的绘制第44-45页
     ·诱变育种第45页
     ·耐高温突变株生长曲线的绘制第45页
   ·耐高温酵母突变株和正常酵母在普通培养条件下应激反应的比较第45-47页
     ·热应激反应的比较第46页
     ·氧化应激反应的比较第46-47页
   ·抗极端环境酵母突变株产物对细胞抗氧化能力的测试第47页
   ·耐高温酵母提取物与正常酵母提取物成分的分析第47-49页
     ·抗氧化剂的分析第47页
     ·耐高温酵母蛋白的分析第47-49页
4 结论与展望第49-51页
   ·结论第49-50页
   ·论文的创新点第50页
   ·展望第50-51页
5 参考文献第51-54页
6 致谢第54-55页
7 攻读硕士学位期间发表的论文第55页

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