英文缩略词 | 第1-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
英文摘要 | 第10-14页 |
前言 | 第14-24页 |
材料和方法 | 第24-34页 |
第一部分 实验材料 | 第24-26页 |
一、 细胞株和临床标本 | 第24页 |
二、 主要试剂 | 第24-25页 |
三、 主要仪器设备 | 第25-26页 |
第二部分 实验方法 | 第26-34页 |
一、 人Bc1-2mRNA序列的获得 | 第26页 |
二、 计算机程序的获得和应用 | 第26页 |
三、 靶mRNA结构的模拟 | 第26页 |
四、 反应自由能的计算 | 第26-27页 |
五、 反义寡核苷酸的设计、合成与命名 | 第27页 |
六、 HL60和K562细胞生长曲线和倍增时间测定 | 第27页 |
七、 姬姆萨染色观察细胞形态 | 第27页 |
八、 反义寡核苷酸处理细胞 | 第27-28页 |
九、 细胞培养 | 第28页 |
十、 ALL、AML及CLL患者骨髓单个核细胞分离 | 第28-29页 |
十一、 肽核酸的分装、保存和使用 | 第29页 |
十二、 Hoechst33258和PI双染色方法 | 第29-30页 |
十三、 体外药物敏感实验 | 第30页 |
十四、 凋亡细胞DNA抽提和电泳 | 第30页 |
十五、 细胞总RNA的抽提和纯化 | 第30-31页 |
十六、 RT-PCR | 第31-32页 |
十七、 流式细胞仪检测Bc1-2蛋白表达 | 第32页 |
十八、 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第32页 |
十九、 反义药物转染体外培养细胞 | 第32-33页 |
二十、 统计学处理 | 第33-34页 |
实验结果 | 第34-85页 |
第一部分 Bc1-2反义靶点的设计 | 第34-69页 |
第一章 Bc1-2反义靶点的初选及相应的实验研究 | 第34-49页 |
一、 Bc1-2mRNA二级结构的模拟 | 第34-35页 |
二、 反义靶点的选择及程序评估 | 第35-39页 |
三、 HL60和K562细胞的生长曲线 | 第39页 |
四、 不同位点的反义寡核苷酸对HL60和K562细胞生长活性的影响 | 第39-42页 |
五、 不同位点的反义寡核苷酸对HL60和K562细胞Bc1-2蛋白表达的影响 | 第42-44页 |
六、 不同位点的反义寡核苷酸对HL60和K562细胞凋亡的影响 | 第44-48页 |
七、 反义寡核苷酸对HL60和K562细胞Bc1-2mRNA水平的影响 | 第48-49页 |
第二章 反义寡核苷酸对肿瘤细胞化疗药物作用的初步研究 | 第49-69页 |
一、 反义寡核苷酸对肿瘤细胞药物敏感性的影响 | 第49-50页 |
二、 反义寡核苷酸和化疗药物联用对细胞bc1-2蛋白表达的影响 | 第50-57页 |
三、 反义寡核苷酸对化疗药物诱导细胞凋亡的影响 | 第57-65页 |
四、 反义寡核苷酸与化疗药物诱导细胞凋亡后形成的DNA梯带 | 第65-69页 |
第二部分 反义肽核酸对白血病细胞的作用 | 第69-73页 |
一、 反义肽核酸对HL60和K562细胞生长活性的影响 | 第69-70页 |
二、 反义肽核酸对HL60和K562细胞Bc1-2蛋白表达的影响 | 第70-71页 |
三、 反义肽核酸对HL60和K562细胞凋亡的影响 | 第71-73页 |
第三部分 反义寡核苷酸对临床白血病病人原代白血病细胞药物敏感性的影响 | 第73-85页 |
一、 反义寡核苷酸和化疗药物联用对原代AL、CLL细胞生长活性的影响 | 第73-76页 |
二、 反义寡核苷酸和化疗药物联用对原代AL、CLL细胞Bc1-2蛋白表达的影响 | 第76-79页 |
三、 反义寡核苷酸和化疗药物联用对原代AL、CLL细胞凋亡的影响 | 第79-85页 |
讨论 | 第85-94页 |
结论 | 第94-95页 |
参考文献 | 第95-104页 |
致谢 | 第104-105页 |
在校期间发表文章 | 第105页 |