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Bcl-2mRNA反义药物的设计和白血病细胞药物敏感性研究

英文缩略词第1-7页
中文摘要第7-10页
英文摘要第10-14页
前言第14-24页
材料和方法第24-34页
 第一部分 实验材料第24-26页
  一、 细胞株和临床标本第24页
  二、 主要试剂第24-25页
  三、 主要仪器设备第25-26页
 第二部分 实验方法第26-34页
  一、 人Bc1-2mRNA序列的获得第26页
  二、 计算机程序的获得和应用第26页
  三、 靶mRNA结构的模拟第26页
  四、 反应自由能的计算第26-27页
  五、 反义寡核苷酸的设计、合成与命名第27页
  六、 HL60和K562细胞生长曲线和倍增时间测定第27页
  七、 姬姆萨染色观察细胞形态第27页
  八、 反义寡核苷酸处理细胞第27-28页
  九、 细胞培养第28页
  十、 ALL、AML及CLL患者骨髓单个核细胞分离第28-29页
  十一、 肽核酸的分装、保存和使用第29页
  十二、 Hoechst33258和PI双染色方法第29-30页
  十三、 体外药物敏感实验第30页
  十四、 凋亡细胞DNA抽提和电泳第30页
  十五、 细胞总RNA的抽提和纯化第30-31页
  十六、 RT-PCR第31-32页
  十七、 流式细胞仪检测Bc1-2蛋白表达第32页
  十八、 流式细胞仪检测细胞凋亡第32页
  十九、 反义药物转染体外培养细胞第32-33页
  二十、 统计学处理第33-34页
实验结果第34-85页
 第一部分 Bc1-2反义靶点的设计第34-69页
  第一章 Bc1-2反义靶点的初选及相应的实验研究第34-49页
   一、 Bc1-2mRNA二级结构的模拟第34-35页
   二、 反义靶点的选择及程序评估第35-39页
   三、 HL60和K562细胞的生长曲线第39页
   四、 不同位点的反义寡核苷酸对HL60和K562细胞生长活性的影响第39-42页
   五、 不同位点的反义寡核苷酸对HL60和K562细胞Bc1-2蛋白表达的影响第42-44页
   六、 不同位点的反义寡核苷酸对HL60和K562细胞凋亡的影响第44-48页
   七、 反义寡核苷酸对HL60和K562细胞Bc1-2mRNA水平的影响第48-49页
  第二章 反义寡核苷酸对肿瘤细胞化疗药物作用的初步研究第49-69页
   一、 反义寡核苷酸对肿瘤细胞药物敏感性的影响第49-50页
   二、 反义寡核苷酸和化疗药物联用对细胞bc1-2蛋白表达的影响第50-57页
   三、 反义寡核苷酸对化疗药物诱导细胞凋亡的影响第57-65页
   四、 反义寡核苷酸与化疗药物诱导细胞凋亡后形成的DNA梯带第65-69页
 第二部分 反义肽核酸对白血病细胞的作用第69-73页
  一、 反义肽核酸对HL60和K562细胞生长活性的影响第69-70页
  二、 反义肽核酸对HL60和K562细胞Bc1-2蛋白表达的影响第70-71页
  三、 反义肽核酸对HL60和K562细胞凋亡的影响第71-73页
 第三部分 反义寡核苷酸对临床白血病病人原代白血病细胞药物敏感性的影响第73-85页
  一、 反义寡核苷酸和化疗药物联用对原代AL、CLL细胞生长活性的影响第73-76页
  二、 反义寡核苷酸和化疗药物联用对原代AL、CLL细胞Bc1-2蛋白表达的影响第76-79页
  三、 反义寡核苷酸和化疗药物联用对原代AL、CLL细胞凋亡的影响第79-85页
讨论第85-94页
结论第94-95页
参考文献第95-104页
致谢第104-105页
在校期间发表文章第105页

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