| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 英文缩略语表 | 第10-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 第一章 斑马鱼—发育生物学的模式动物 | 第12-19页 |
| ·斑马鱼作为模式动物的优点 | 第12-13页 |
| ·斑马鱼的生物学特性 | 第13-14页 |
| ·斑马鱼的配子发生和胚胎发育过程 | 第14-18页 |
| ·斑马鱼的卵子发生 | 第15-16页 |
| ·斑马鱼的精子发生 | 第16页 |
| ·斑马鱼胚胎发育过程 | 第16-18页 |
| ·斑马鱼优势或特异表达基因的研究进展 | 第18-19页 |
| 第二章 ZRAP55的生物信息学分析 | 第19-31页 |
| ·生物信息学方法 | 第19-20页 |
| ·实验结果 | 第20-28页 |
| ·zRAP55 cDNA序列的同源性比对 | 第20-21页 |
| ·zRAP55基因在斑马鱼染色体上的定位 | 第21-22页 |
| ·zRAP55 cDNA及其基因组结构 | 第22-23页 |
| ·zRAP55编码的蛋白质序列分析 | 第23-28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| ·生物信息学在新基因研究中的作用 | 第28-29页 |
| ·zRAP55的保守结构域 | 第29-30页 |
| ·本章小结 | 第30-31页 |
| 第三章 免疫组织化学实验 | 第31-58页 |
| ·材料与方法 | 第33-34页 |
| ·实验动物 | 第33页 |
| ·试剂、主要溶液 | 第33-34页 |
| ·实验技术路线 | 第34-36页 |
| ·表达载体的构建 | 第36页 |
| ·实验方法 | 第36-43页 |
| ·zRAP55基因的筛选 | 第36-37页 |
| ·RT-PCR | 第37页 |
| ·表达引物设计和PCR扩增 | 第37页 |
| ·T-A连接和感受态细胞(DH-5α)的制备 | 第37-38页 |
| ·转化 | 第38页 |
| ·对质粒进行鉴定 | 第38-39页 |
| ·克隆测序 | 第39页 |
| ·酶切及纯化回收 | 第39页 |
| ·连接以及感受态细胞(BL21)的制备 | 第39页 |
| ·转化、阳性克隆筛选和测序 | 第39页 |
| ·诱导蛋白表达 | 第39-40页 |
| ·SDS-PAGE实验方法 | 第40-41页 |
| ·zRAP55蛋白质的纯化 | 第41页 |
| ·利用表达蛋白作为抗原制作抗体 | 第41-42页 |
| ·双向琼脂扩散实验检测抗体的存在和效价 | 第42-43页 |
| ·利用抗血清做冰冻切片荧光免疫组化 | 第43页 |
| ·实验结果 | 第43-51页 |
| ·zRAP55 mRNA在成体斑马鱼组织中的RT-PCR结果 | 第43-44页 |
| ·引物设计结果 | 第44-45页 |
| ·PCR扩增产物的回收检测及pGEX-6p-1载体质粒抽提检测 | 第45-46页 |
| ·PCR检测重组质粒 | 第46-47页 |
| ·斑马鱼GST-zRAP55融合蛋白的诱导表达和鉴定 | 第47-49页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第49页 |
| ·免疫组织化学结果 | 第49-51页 |
| ·讨论 | 第51-56页 |
| ·关于表达宿主的选择 | 第51页 |
| ·关于表达载体的选择 | 第51-52页 |
| ·关于表达片段的确定 | 第52页 |
| ·关于表达引物设计 | 第52-53页 |
| ·关于双酶切及酶切产物纯化 | 第53页 |
| ·诱导条件的优化 | 第53-54页 |
| ·免疫组化常见的问题的处理 | 第54-55页 |
| ·zRAP55蛋白功能初探 | 第55-56页 |
| ·本试验研究目的和意义 | 第56-57页 |
| ·未来主要研究方向 | 第57页 |
| ·本章小结 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
