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南瓜矮化突变体cgα的遗传、生理生化及相关基因表达分析

致谢第1-12页
缩写词第12-15页
摘要第15-17页
Abstract第17-20页
前言第20-22页
1 文献综述第22-44页
   ·植物矮化突变体的获得第22-24页
   ·植物矮化突变体的遗传学研究第24-29页
   ·植物矮化突变体的解剖学研究第29-31页
   ·植物矮化突变体与植物激素之间的关系第31-33页
     ·植物矮化突变体的激素敏感性研究第31-32页
     ·植物矮化突变体与内源激素的关系第32-33页
   ·植物矮化突变体相关基因第33-44页
     ·与GA相关的植物矮化突变体相关基因第34-41页
       ·GA的生物合成第34-35页
       ·与GA缺陷型植物矮化突变体相关基因第35-37页
       ·与GA不敏感型植物矮化突变体相关基因第37-41页
     ·与BR相关的植物矮化突变体相关基因第41-42页
     ·其它植物矮化突变体相关基因第42-44页
2 南瓜矮化突变体cga的遗传学分析第44-52页
   ·材料与方法第45-46页
     ·植物材料第45页
     ·南瓜矮化突变体cga及其野生型、F_1s、F_2和BC_1s的构建第45页
     ·生物学性状测定第45页
     ·遗传学分析第45-46页
     ·胚轴伸长速率测定第46页
     ·细胞学观察第46页
   ·结果与分析第46-49页
     ·南瓜矮化突变体cga及其野生型、F_1s、F_2和BC_1s的获得第46-47页
     ·南瓜矮化突变体cga及其野生型生物学性状的比较第47-48页
     ·南瓜矮化基因的遗传学分析第48-49页
     ·南瓜矮化突变体cga植株胚轴伸长速率小于其野生型植株第49页
     ·南瓜矮化突变体cga植株胚轴和节间细胞均小于长蔓植株第49页
   ·讨论第49-52页
     ·南瓜矮化突变体cga为单基因显性遗传第49-50页
     ·南瓜矮化突变体cga的产生可能是由于细胞伸长受阻所致第50-52页
3 南瓜矮化突变体cga的激素敏感性研究第52-62页
   ·材料与方法第53-54页
     ·材料与试剂第53页
     ·激素处理第53-54页
   ·结果与分析第54-58页
     ·外源喷施BR不能促进南瓜蔓伸长第54-55页
     ·外源喷施IAA不能促进南瓜蔓伸长第55页
     ·外源喷施GA_3能够在一定程度上促进南瓜蔓的伸长第55-57页
     ·外源喷施GA_(4+7)能够在一定程度上促进南瓜蔓的伸长第57页
     ·外源喷施BR、IAA、GA_3和GA_(4+7)对南瓜叶柄、叶片发育的影响第57-58页
   ·讨论第58-62页
     ·南瓜矮化突变体cga既不属于激素缺陷型也不属于激素不敏感型突变体第58-59页
     ·控制南瓜属植物蔓伸长的不同基因可能具有不同的激素敏感性第59-60页
     ·南瓜蔓伸长基因可能通过调节植物激素受体水平来调控蔓伸长第60-62页
4 南瓜矮化突变体cga的生理生化特征分析第62-78页
   ·材料与方法第63-68页
     ·试验材料第63-64页
     ·酶液的提取与抗氧化酶活性的测定第64页
     ·O_2~(-·)和H_2O_2含量测定第64-65页
     ·内源激素含量的测定第65-67页
       ·主要试验试剂及其配制第65页
       ·样品中内源激素的提取与纯化第65-66页
       ·ELISA测定内源激素第66-67页
     ·SDS-PAGE分析第67页
       ·主要试验试剂及其配制第67页
       ·蛋白质提取及SDS-PAGE分析第67页
     ·POD同工酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析第67-68页
     ·统计分析第68页
   ·结果与分析第68-74页
     ·O_2~(-·)和H_2O_2含量差异比较第68-69页
     ·CAT、SOD和APX活性差异比较第69-70页
     ·POD活性及同工酶比较第70-73页
     ·可溶性蛋白SDS-PAGE电泳分析第73页
     ·内源GA_3、GA_4、IAA含量差异比较第73-74页
   ·讨论第74-78页
     ·O_2~(-·)和APX可能在南瓜蔓伸长过程中发挥负调节作用第74-75页
     ·南瓜cga与其野生型的基因型差异影响POD活性及其同工酶的表达第75-76页
     ·南瓜cga与其野生型的基因型差异对其蛋白质表达谱带影响不大第76页
     ·Bu可能通过不同机制调控cga及其野生型内源激素含量第76-78页
5 南瓜矮化突变体cga及其野生型植株基因差异表达的cDNA-AFLP分析第78-96页
   ·材料与方法第79-85页
     ·材料与试剂第79-80页
     ·RNA的分离及检测第80-81页
     ·cDNA-AFLP技术第81-84页
       ·cDNA的合成第81-82页
       ·cDNA纯化第82页
       ·cDNA酶切第82页
       ·连接第82页
       ·模板预扩增第82-83页
       ·选择性扩增第83页
       ·测序胶电泳、染色第83-84页
     ·特异性片段克隆和序列分析第84页
     ·RT-PCR检测第84-85页
   ·结果与分析第85-92页
     ·提取的南瓜组织总RNA及合成的cDNA质量较高第85-86页
     ·南瓜矮化突变体cga与其野生型植株基因表达的cDNA-AFLP分析第86-87页
     ·南瓜蔓伸长相关基因的功能类群第87页
     ·部分南瓜蔓伸长相关基因表达模式的RT-PCR分析第87-92页
   ·讨论第92-96页
     ·cDNA-AFLP分析能够部分探明基因突变引起的下游基因的表达变化第92-93页
     ·克隆得到的差异片段可能代表着南瓜蔓伸长相关基因第93-95页
     ·cga可能与植物激素生物合成或信号传导受阻没有直接联系第95-96页
6 南瓜蔓伸长相关基因CmBul的克隆和表达特征分析第96-108页
   ·材料与方法第96-100页
     ·材料与试剂第96-97页
     ·RNA的分离及检测第97页
     ·cDNA的合成第97页
     ·DNA提取第97-98页
     ·引物合成和PCR扩增第98页
     ·cDNA和DNA全长序列的扩增第98-99页
     ·PCR产物的克隆及测序第99页
     ·基因全长序列的特征分析第99页
     ·RT-PCR分析第99-100页
   ·结果与分析第100-106页
     ·差异片段A17T5-3的获得第100页
     ·CmBul的cDNA和DNA全长序列第100-102页
     ·CmBul基因的相似性第102页
     ·CmBul基因的基本特征第102-105页
     ·CmBul基因编码蛋白的二级结构第105-106页
     ·CmBul在南瓜不同器官中的表达特征第106页
   ·讨论第106-108页
结论第108-110页
参考文献第110-126页
攻读博士学位期间发表的论文第126页

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