致谢 | 第1-12页 |
缩写词 | 第12-15页 |
摘要 | 第15-17页 |
Abstract | 第17-20页 |
前言 | 第20-22页 |
1 文献综述 | 第22-44页 |
·植物矮化突变体的获得 | 第22-24页 |
·植物矮化突变体的遗传学研究 | 第24-29页 |
·植物矮化突变体的解剖学研究 | 第29-31页 |
·植物矮化突变体与植物激素之间的关系 | 第31-33页 |
·植物矮化突变体的激素敏感性研究 | 第31-32页 |
·植物矮化突变体与内源激素的关系 | 第32-33页 |
·植物矮化突变体相关基因 | 第33-44页 |
·与GA相关的植物矮化突变体相关基因 | 第34-41页 |
·GA的生物合成 | 第34-35页 |
·与GA缺陷型植物矮化突变体相关基因 | 第35-37页 |
·与GA不敏感型植物矮化突变体相关基因 | 第37-41页 |
·与BR相关的植物矮化突变体相关基因 | 第41-42页 |
·其它植物矮化突变体相关基因 | 第42-44页 |
2 南瓜矮化突变体cga的遗传学分析 | 第44-52页 |
·材料与方法 | 第45-46页 |
·植物材料 | 第45页 |
·南瓜矮化突变体cga及其野生型、F_1s、F_2和BC_1s的构建 | 第45页 |
·生物学性状测定 | 第45页 |
·遗传学分析 | 第45-46页 |
·胚轴伸长速率测定 | 第46页 |
·细胞学观察 | 第46页 |
·结果与分析 | 第46-49页 |
·南瓜矮化突变体cga及其野生型、F_1s、F_2和BC_1s的获得 | 第46-47页 |
·南瓜矮化突变体cga及其野生型生物学性状的比较 | 第47-48页 |
·南瓜矮化基因的遗传学分析 | 第48-49页 |
·南瓜矮化突变体cga植株胚轴伸长速率小于其野生型植株 | 第49页 |
·南瓜矮化突变体cga植株胚轴和节间细胞均小于长蔓植株 | 第49页 |
·讨论 | 第49-52页 |
·南瓜矮化突变体cga为单基因显性遗传 | 第49-50页 |
·南瓜矮化突变体cga的产生可能是由于细胞伸长受阻所致 | 第50-52页 |
3 南瓜矮化突变体cga的激素敏感性研究 | 第52-62页 |
·材料与方法 | 第53-54页 |
·材料与试剂 | 第53页 |
·激素处理 | 第53-54页 |
·结果与分析 | 第54-58页 |
·外源喷施BR不能促进南瓜蔓伸长 | 第54-55页 |
·外源喷施IAA不能促进南瓜蔓伸长 | 第55页 |
·外源喷施GA_3能够在一定程度上促进南瓜蔓的伸长 | 第55-57页 |
·外源喷施GA_(4+7)能够在一定程度上促进南瓜蔓的伸长 | 第57页 |
·外源喷施BR、IAA、GA_3和GA_(4+7)对南瓜叶柄、叶片发育的影响 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58-62页 |
·南瓜矮化突变体cga既不属于激素缺陷型也不属于激素不敏感型突变体 | 第58-59页 |
·控制南瓜属植物蔓伸长的不同基因可能具有不同的激素敏感性 | 第59-60页 |
·南瓜蔓伸长基因可能通过调节植物激素受体水平来调控蔓伸长 | 第60-62页 |
4 南瓜矮化突变体cga的生理生化特征分析 | 第62-78页 |
·材料与方法 | 第63-68页 |
·试验材料 | 第63-64页 |
·酶液的提取与抗氧化酶活性的测定 | 第64页 |
·O_2~(-·)和H_2O_2含量测定 | 第64-65页 |
·内源激素含量的测定 | 第65-67页 |
·主要试验试剂及其配制 | 第65页 |
·样品中内源激素的提取与纯化 | 第65-66页 |
·ELISA测定内源激素 | 第66-67页 |
·SDS-PAGE分析 | 第67页 |
·主要试验试剂及其配制 | 第67页 |
·蛋白质提取及SDS-PAGE分析 | 第67页 |
·POD同工酶的聚丙烯酰胺凝胶电泳分析 | 第67-68页 |
·统计分析 | 第68页 |
·结果与分析 | 第68-74页 |
·O_2~(-·)和H_2O_2含量差异比较 | 第68-69页 |
·CAT、SOD和APX活性差异比较 | 第69-70页 |
·POD活性及同工酶比较 | 第70-73页 |
·可溶性蛋白SDS-PAGE电泳分析 | 第73页 |
·内源GA_3、GA_4、IAA含量差异比较 | 第73-74页 |
·讨论 | 第74-78页 |
·O_2~(-·)和APX可能在南瓜蔓伸长过程中发挥负调节作用 | 第74-75页 |
·南瓜cga与其野生型的基因型差异影响POD活性及其同工酶的表达 | 第75-76页 |
·南瓜cga与其野生型的基因型差异对其蛋白质表达谱带影响不大 | 第76页 |
·Bu可能通过不同机制调控cga及其野生型内源激素含量 | 第76-78页 |
5 南瓜矮化突变体cga及其野生型植株基因差异表达的cDNA-AFLP分析 | 第78-96页 |
·材料与方法 | 第79-85页 |
·材料与试剂 | 第79-80页 |
·RNA的分离及检测 | 第80-81页 |
·cDNA-AFLP技术 | 第81-84页 |
·cDNA的合成 | 第81-82页 |
·cDNA纯化 | 第82页 |
·cDNA酶切 | 第82页 |
·连接 | 第82页 |
·模板预扩增 | 第82-83页 |
·选择性扩增 | 第83页 |
·测序胶电泳、染色 | 第83-84页 |
·特异性片段克隆和序列分析 | 第84页 |
·RT-PCR检测 | 第84-85页 |
·结果与分析 | 第85-92页 |
·提取的南瓜组织总RNA及合成的cDNA质量较高 | 第85-86页 |
·南瓜矮化突变体cga与其野生型植株基因表达的cDNA-AFLP分析 | 第86-87页 |
·南瓜蔓伸长相关基因的功能类群 | 第87页 |
·部分南瓜蔓伸长相关基因表达模式的RT-PCR分析 | 第87-92页 |
·讨论 | 第92-96页 |
·cDNA-AFLP分析能够部分探明基因突变引起的下游基因的表达变化 | 第92-93页 |
·克隆得到的差异片段可能代表着南瓜蔓伸长相关基因 | 第93-95页 |
·cga可能与植物激素生物合成或信号传导受阻没有直接联系 | 第95-96页 |
6 南瓜蔓伸长相关基因CmBul的克隆和表达特征分析 | 第96-108页 |
·材料与方法 | 第96-100页 |
·材料与试剂 | 第96-97页 |
·RNA的分离及检测 | 第97页 |
·cDNA的合成 | 第97页 |
·DNA提取 | 第97-98页 |
·引物合成和PCR扩增 | 第98页 |
·cDNA和DNA全长序列的扩增 | 第98-99页 |
·PCR产物的克隆及测序 | 第99页 |
·基因全长序列的特征分析 | 第99页 |
·RT-PCR分析 | 第99-100页 |
·结果与分析 | 第100-106页 |
·差异片段A17T5-3的获得 | 第100页 |
·CmBul的cDNA和DNA全长序列 | 第100-102页 |
·CmBul基因的相似性 | 第102页 |
·CmBul基因的基本特征 | 第102-105页 |
·CmBul基因编码蛋白的二级结构 | 第105-106页 |
·CmBul在南瓜不同器官中的表达特征 | 第106页 |
·讨论 | 第106-108页 |
结论 | 第108-110页 |
参考文献 | 第110-126页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第126页 |