中文摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
第一章 前言 | 第14-23页 |
1. 马铃薯Y 病毒属病毒的生物学特性 | 第14-15页 |
·马铃薯Y 病毒属病毒的形态特性 | 第14页 |
·寄主范围 | 第14页 |
·病毒的传播 | 第14-15页 |
·细胞病理 | 第15页 |
2. 马铃薯Y 病毒属病毒的分子生物学特性 | 第15-19页 |
·病毒基因组的结构 | 第15页 |
·病毒基因的功能 | 第15-19页 |
·5′-非翻译区(5′-UTR) | 第16页 |
·3′-非翻译区(3′-UTR) | 第16页 |
·P1 蛋白 | 第16-17页 |
·HC-Pro 蛋白 | 第17页 |
·P3 蛋白 | 第17页 |
·6K1 蛋白 | 第17-18页 |
·CI 蛋白 | 第18页 |
·6K2 蛋白 | 第18页 |
·NIa-Pro 和NIa-VPg 蛋白 | 第18-19页 |
·NIb 蛋白 | 第19页 |
·CP 蛋白 | 第19页 |
3. 马铃薯Y 病毒属病毒的分类 | 第19-21页 |
4. 马铃薯Y 病毒属病毒全基因组序列的研究 | 第21-22页 |
5. 本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
第二章 两个芜菁花叶病毒中国分离物的全基因组序列测定及分析 | 第23-63页 |
1. 材料与方法 | 第26-36页 |
·材料 | 第26-27页 |
·病毒样品的采集 | 第26页 |
·菌株和载体 | 第26页 |
·生化及分子生物学试剂 | 第26-27页 |
·引物合成 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-36页 |
·生物学测定 | 第27页 |
·植物总RNA 的提取 | 第27-28页 |
·引物设计 | 第28-29页 |
·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和5'-RACE 扩增 | 第29-33页 |
·PCR 产物回收 | 第33页 |
·连接反应 | 第33页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第33-34页 |
·连接产物转化大肠杆菌 | 第34页 |
·改良碱裂解法提取质粒DNA | 第34-35页 |
·重组质粒鉴定 | 第35-36页 |
·序列测定与分析 | 第36页 |
2. 结果与分析 | 第36-61页 |
·生物学特性 | 第36-37页 |
·TuMV 分离物的 RT-PCR 结果 | 第37-39页 |
·重组质粒的电泳鉴定及PCR 鉴定 | 第39页 |
·TuMV 分离物的核苷酸与氨基酸序列分析 | 第39-52页 |
·与其它TuMV 分离物序列一致率分析比较 | 第52-53页 |
·TuMV 分离物的分子变异 | 第53-61页 |
·系统进化树分析 | 第53-58页 |
·重组分析 | 第58页 |
·中国TuMV 分离物变异分析 | 第58-61页 |
3. 结论与讨论 | 第61-63页 |
第三章 烟草脉带花叶病毒 HN39 分离物全基因组序列测定及分析 | 第63-92页 |
1. 材料与方法 | 第64-69页 |
·材料 | 第64-65页 |
·病毒样品的采集和分离纯化 | 第64页 |
·菌株和载体 | 第64页 |
·生化及分子生物学试剂 | 第64页 |
·引物合成 | 第64-65页 |
·实验方法 | 第65-69页 |
·生物学测定 | 第65页 |
·植物总RNA 的提取 | 第65页 |
·引物设计 | 第65-66页 |
·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和5'-RACE 扩增 | 第66-68页 |
·PCR 产物回收 | 第68页 |
·连接反应 | 第68页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第68-69页 |
·连接产物转化大肠杆菌 | 第69页 |
·改良碱裂解法提取质粒DNA | 第69页 |
·重组质粒鉴定 | 第69页 |
·序列测定与分析 | 第69页 |
2. 结果与分析 | 第69-85页 |
·生物学测定 | 第69-70页 |
·TVBMV 分离物的 RT-PCR 结果 | 第70-71页 |
·重组质粒的电泳鉴定及PCR 鉴定 | 第71页 |
·序列分析 | 第71-83页 |
·与TVBMV-YND 分离物序列比较 | 第83-84页 |
·TVBMV-HN39 与其它potyviruses 的关系 | 第84-85页 |
3. 结论与讨论 | 第85-92页 |
第四章 甜菜花叶病毒莴苣分离物3'-末端基因的克隆及序列分析 | 第92-99页 |
1. 材料与方法 | 第92-95页 |
·材料 | 第92-93页 |
·病毒样品的采集和分离纯化 | 第92页 |
·菌株和载体 | 第92页 |
·生化及分子生物学试剂 | 第92-93页 |
·引物合成 | 第93页 |
·实验方法 | 第93-95页 |
·SDS-琼脂免疫双扩散试验 | 第93页 |
·植物总RNA 的提取 | 第93页 |
·引物设计 | 第93-94页 |
·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR) | 第94页 |
·PCR 产物回收 | 第94页 |
·连接反应 | 第94-95页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第95页 |
·连接产物转化大肠杆菌 | 第95页 |
·改良碱裂解法提取质粒DNA | 第95页 |
·重组质粒鉴定 | 第95页 |
·序列测定与分析 | 第95页 |
·Western blotting 分析 | 第95页 |
2. 结果与分析 | 第95-98页 |
·病株田间症状 | 第95-96页 |
·血清学鉴定 | 第96页 |
·基因的扩增及克隆 | 第96-97页 |
·序列测定与分析 | 第97-98页 |
·Western blotting 分析 | 第98页 |
3. 讨论 | 第98-99页 |
结论 | 第99-100页 |
参考文献 | 第100-112页 |
致谢 | 第112-113页 |
攻读硕士学位期间发表论文情况 | 第113-114页 |
附彩图 | 第114-115页 |