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芜菁花叶病毒与烟草脉带花叶病毒全基因组序列测定及分析

中文摘要第1-12页
ABSTRACT第12-14页
第一章 前言第14-23页
 1. 马铃薯Y 病毒属病毒的生物学特性第14-15页
   ·马铃薯Y 病毒属病毒的形态特性第14页
   ·寄主范围第14页
   ·病毒的传播第14-15页
   ·细胞病理第15页
 2. 马铃薯Y 病毒属病毒的分子生物学特性第15-19页
   ·病毒基因组的结构第15页
   ·病毒基因的功能第15-19页
     ·5′-非翻译区(5′-UTR)第16页
     ·3′-非翻译区(3′-UTR)第16页
     ·P1 蛋白第16-17页
     ·HC-Pro 蛋白第17页
     ·P3 蛋白第17页
     ·6K1 蛋白第17-18页
     ·CI 蛋白第18页
     ·6K2 蛋白第18页
     ·NIa-Pro 和NIa-VPg 蛋白第18-19页
     ·NIb 蛋白第19页
     ·CP 蛋白第19页
 3. 马铃薯Y 病毒属病毒的分类第19-21页
 4. 马铃薯Y 病毒属病毒全基因组序列的研究第21-22页
 5. 本研究的目的和意义第22-23页
第二章 两个芜菁花叶病毒中国分离物的全基因组序列测定及分析第23-63页
 1. 材料与方法第26-36页
   ·材料第26-27页
     ·病毒样品的采集第26页
     ·菌株和载体第26页
     ·生化及分子生物学试剂第26-27页
     ·引物合成第27页
   ·实验方法第27-36页
     ·生物学测定第27页
     ·植物总RNA 的提取第27-28页
     ·引物设计第28-29页
     ·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和5'-RACE 扩增第29-33页
     ·PCR 产物回收第33页
     ·连接反应第33页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第33-34页
     ·连接产物转化大肠杆菌第34页
     ·改良碱裂解法提取质粒DNA第34-35页
     ·重组质粒鉴定第35-36页
     ·序列测定与分析第36页
 2. 结果与分析第36-61页
   ·生物学特性第36-37页
   ·TuMV 分离物的 RT-PCR 结果第37-39页
   ·重组质粒的电泳鉴定及PCR 鉴定第39页
   ·TuMV 分离物的核苷酸与氨基酸序列分析第39-52页
   ·与其它TuMV 分离物序列一致率分析比较第52-53页
   ·TuMV 分离物的分子变异第53-61页
     ·系统进化树分析第53-58页
     ·重组分析第58页
     ·中国TuMV 分离物变异分析第58-61页
 3. 结论与讨论第61-63页
第三章 烟草脉带花叶病毒 HN39 分离物全基因组序列测定及分析第63-92页
 1. 材料与方法第64-69页
   ·材料第64-65页
     ·病毒样品的采集和分离纯化第64页
     ·菌株和载体第64页
     ·生化及分子生物学试剂第64页
     ·引物合成第64-65页
   ·实验方法第65-69页
     ·生物学测定第65页
     ·植物总RNA 的提取第65页
     ·引物设计第65-66页
     ·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和5'-RACE 扩增第66-68页
     ·PCR 产物回收第68页
     ·连接反应第68页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第68-69页
     ·连接产物转化大肠杆菌第69页
     ·改良碱裂解法提取质粒DNA第69页
     ·重组质粒鉴定第69页
     ·序列测定与分析第69页
 2. 结果与分析第69-85页
   ·生物学测定第69-70页
   ·TVBMV 分离物的 RT-PCR 结果第70-71页
   ·重组质粒的电泳鉴定及PCR 鉴定第71页
   ·序列分析第71-83页
   ·与TVBMV-YND 分离物序列比较第83-84页
   ·TVBMV-HN39 与其它potyviruses 的关系第84-85页
 3. 结论与讨论第85-92页
第四章 甜菜花叶病毒莴苣分离物3'-末端基因的克隆及序列分析第92-99页
 1. 材料与方法第92-95页
   ·材料第92-93页
     ·病毒样品的采集和分离纯化第92页
     ·菌株和载体第92页
     ·生化及分子生物学试剂第92-93页
     ·引物合成第93页
   ·实验方法第93-95页
     ·SDS-琼脂免疫双扩散试验第93页
     ·植物总RNA 的提取第93页
     ·引物设计第93-94页
     ·反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)第94页
     ·PCR 产物回收第94页
     ·连接反应第94-95页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第95页
     ·连接产物转化大肠杆菌第95页
     ·改良碱裂解法提取质粒DNA第95页
     ·重组质粒鉴定第95页
     ·序列测定与分析第95页
     ·Western blotting 分析第95页
 2. 结果与分析第95-98页
   ·病株田间症状第95-96页
   ·血清学鉴定第96页
   ·基因的扩增及克隆第96-97页
   ·序列测定与分析第97-98页
   ·Western blotting 分析第98页
 3. 讨论第98-99页
结论第99-100页
参考文献第100-112页
致谢第112-113页
攻读硕士学位期间发表论文情况第113-114页
附彩图第114-115页

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