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胚胎WOW培养法的研究及应用

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-12页
文献综述第12-35页
 第一章 传统核移植的研究进展第12-22页
   ·哺乳动物胚胎细胞核移植的研究进展第12-13页
   ·哺乳动物体细胞核移植研究进展第13页
   ·体细胞核移植的程序第13-16页
     ·供体细胞的选择第13-14页
     ·受体细胞选择和去核方法第14页
     ·细胞核的移植第14页
     ·重构胚的激活第14-16页
     ·融合到激活时间的影响第16页
     ·重构胚的培养和移植第16页
   ·影响核移植效率的因素第16-22页
     ·细胞周期同步化对核移植胚的影响第16-17页
     ·卵母细胞成熟质量对核移植的影响第17-20页
     ·去核操作对核移植胚胎的影响第20页
     ·细胞松弛素处理对核移植的影响第20页
     ·激活核移植胚的影响第20-21页
     ·核移植胚的体外培养对发育的影响第21-22页
 第二章 手工核移植研究进展第22-28页
   ·无透明带核移植技术过程及难题的解决第22-28页
     ·透明带的去除第22页
     ·去核第22-23页
     ·融合第23-24页
     ·激活第24页
     ·胚胎培养第24-25页
     ·妊娠率和出生率第25-26页
     ·局限性第26-28页
 第三章 体细胞克隆存在的问题及应用前景第28-35页
   ·体细胞克隆存在的问题第28页
     ·供体核重新编程第28页
     ·供体细胞端粒长度第28页
   ·哺乳动物核移植相关机理的研究第28-32页
     ·甲基化和印迹第28-29页
     ·组蛋白乙酰化第29-30页
     ·X 染色体失活第30-31页
     ·端粒第31页
     ·MPF 在核质互换中的作用第31-32页
   ·体细胞核移植意义及应用前景第32-35页
     ·治疗性克隆第33页
     ·拯救濒危动物第33页
     ·应用于转基因技术第33页
     ·促进基础学科的发展第33-35页
实验部分第35-49页
 第四章 WOW 培养法的研究第35-42页
   ·材料和方法第35-37页
     ·试验材料及主要试剂仪器第35-36页
     ·操作液第36页
     ·WOW 的制备第36页
     ·牛卵巢的采集、运输以及卵母细胞的采集第36页
     ·卵母细胞的体外成熟培养第36页
     ·卵母细胞的激活和体外培养第36-37页
     ·试验设计第37页
     ·囊胚细胞计数第37页
     ·数据处理第37页
   ·结果第37-39页
     ·离子霉素和6-DMAP 对胚胎发育的影响第37-38页
     ·不同胚胎数对其发育的影响第38-39页
   ·讨论第39-40页
   ·小结第40-42页
 第五章 提高重构胚的融合率和胚胎发育率第42-49页
   ·材料与方法第42-45页
     ·试验材料及主要试剂仪器第42页
     ·操作液第42-43页
     ·牛卵母细胞的采集第43页
     ·卵母细胞的体外成熟培养第43页
     ·供体细胞的准备第43-44页
     ·重构胚的构建第44-45页
     ·重构胚的激活和培养第45页
   ·实验设计第45页
   ·数据分析第45页
   ·结果第45-47页
     ·成熟率的统计第45-46页
     ·细胞消化不同程度对融合率和重构胚发育的影响第46页
     ·不同培养方法对胚胎发育的影响第46-47页
   ·讨论第47-48页
   ·小结第48-49页
结论第49-50页
参考文献第50-64页
致谢第64-65页
作者简介第65页

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