胚胎WOW培养法的研究及应用
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 文献综述 | 第12-35页 |
| 第一章 传统核移植的研究进展 | 第12-22页 |
| ·哺乳动物胚胎细胞核移植的研究进展 | 第12-13页 |
| ·哺乳动物体细胞核移植研究进展 | 第13页 |
| ·体细胞核移植的程序 | 第13-16页 |
| ·供体细胞的选择 | 第13-14页 |
| ·受体细胞选择和去核方法 | 第14页 |
| ·细胞核的移植 | 第14页 |
| ·重构胚的激活 | 第14-16页 |
| ·融合到激活时间的影响 | 第16页 |
| ·重构胚的培养和移植 | 第16页 |
| ·影响核移植效率的因素 | 第16-22页 |
| ·细胞周期同步化对核移植胚的影响 | 第16-17页 |
| ·卵母细胞成熟质量对核移植的影响 | 第17-20页 |
| ·去核操作对核移植胚胎的影响 | 第20页 |
| ·细胞松弛素处理对核移植的影响 | 第20页 |
| ·激活核移植胚的影响 | 第20-21页 |
| ·核移植胚的体外培养对发育的影响 | 第21-22页 |
| 第二章 手工核移植研究进展 | 第22-28页 |
| ·无透明带核移植技术过程及难题的解决 | 第22-28页 |
| ·透明带的去除 | 第22页 |
| ·去核 | 第22-23页 |
| ·融合 | 第23-24页 |
| ·激活 | 第24页 |
| ·胚胎培养 | 第24-25页 |
| ·妊娠率和出生率 | 第25-26页 |
| ·局限性 | 第26-28页 |
| 第三章 体细胞克隆存在的问题及应用前景 | 第28-35页 |
| ·体细胞克隆存在的问题 | 第28页 |
| ·供体核重新编程 | 第28页 |
| ·供体细胞端粒长度 | 第28页 |
| ·哺乳动物核移植相关机理的研究 | 第28-32页 |
| ·甲基化和印迹 | 第28-29页 |
| ·组蛋白乙酰化 | 第29-30页 |
| ·X 染色体失活 | 第30-31页 |
| ·端粒 | 第31页 |
| ·MPF 在核质互换中的作用 | 第31-32页 |
| ·体细胞核移植意义及应用前景 | 第32-35页 |
| ·治疗性克隆 | 第33页 |
| ·拯救濒危动物 | 第33页 |
| ·应用于转基因技术 | 第33页 |
| ·促进基础学科的发展 | 第33-35页 |
| 实验部分 | 第35-49页 |
| 第四章 WOW 培养法的研究 | 第35-42页 |
| ·材料和方法 | 第35-37页 |
| ·试验材料及主要试剂仪器 | 第35-36页 |
| ·操作液 | 第36页 |
| ·WOW 的制备 | 第36页 |
| ·牛卵巢的采集、运输以及卵母细胞的采集 | 第36页 |
| ·卵母细胞的体外成熟培养 | 第36页 |
| ·卵母细胞的激活和体外培养 | 第36-37页 |
| ·试验设计 | 第37页 |
| ·囊胚细胞计数 | 第37页 |
| ·数据处理 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-39页 |
| ·离子霉素和6-DMAP 对胚胎发育的影响 | 第37-38页 |
| ·不同胚胎数对其发育的影响 | 第38-39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·小结 | 第40-42页 |
| 第五章 提高重构胚的融合率和胚胎发育率 | 第42-49页 |
| ·材料与方法 | 第42-45页 |
| ·试验材料及主要试剂仪器 | 第42页 |
| ·操作液 | 第42-43页 |
| ·牛卵母细胞的采集 | 第43页 |
| ·卵母细胞的体外成熟培养 | 第43页 |
| ·供体细胞的准备 | 第43-44页 |
| ·重构胚的构建 | 第44-45页 |
| ·重构胚的激活和培养 | 第45页 |
| ·实验设计 | 第45页 |
| ·数据分析 | 第45页 |
| ·结果 | 第45-47页 |
| ·成熟率的统计 | 第45-46页 |
| ·细胞消化不同程度对融合率和重构胚发育的影响 | 第46页 |
| ·不同培养方法对胚胎发育的影响 | 第46-47页 |
| ·讨论 | 第47-48页 |
| ·小结 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 作者简介 | 第65页 |