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稳定整合人乳铁蛋白cDNA山羊胎儿成纤维细胞的制备

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-10页
第一部分 文献综述第10-28页
 第一章 激素诱导的奶蛋白基因表达信号转导通路第10-22页
   ·复合型应答元件第12-17页
     ·STAT5第13页
     ·C/EBPs 相关的激素和发育调控第13-15页
     ·C/EBPβ在乳腺发育过程中的表达第15页
     ·C/EBPδ第15页
     ·NFI第15-16页
     ·糖皮质激素(GR)第16页
     ·负向调节因子:YYI 和Milk Box Region第16-17页
   ·奶蛋白基因表达信号通路间的对话第17-19页
     ·转录因子在β酪蛋白基因启动子的模式分布第18页
     ·GR 和STAT5 间的协同作用第18页
     ·NF-γ和STAT5 间的拮抗作用第18-19页
   ·催乳素和糖皮质激素在β酪蛋白启动子的整合第19-21页
     ·关于β酪蛋白基因转录的特异性转录因子和染色质修饰子间的相互作用第20-21页
     ·基础转录装置与DNA 模板的结合以及β酪蛋白转录的抑制第21页
   ·结论第21-22页
 第二章 乳腺特异性表达载体的构建第22-28页
   ·乳腺特异性表达载体的启动子及其调控序列第22-24页
     ·乳清酸蛋白基因(WAP)第22-23页
     ·β-乳球蛋白基因(β-lactoglobulin BLG)第23页
     ·酪蛋白基因(casein gene)第23-24页
   ·内含子对转基因动物表达效率的影响第24-26页
     ·位置效应对转基因动物表达效率的影响第25-26页
     ·目的基因第26页
   ·其它载体的研究第26-27页
     ·人工染色体第26页
     ·同源重组技术第26-27页
   ·小结与展望第27页
   ·乳腺生物反应器存在的问题第27-28页
第二部分 试验部分第28-50页
 第三章 人乳铁蛋白基因克隆及载体构建第28-42页
   ·材料和方法第28-37页
     ·材料第28-30页
     ·试验方法第30-37页
   ·结果第37-40页
     ·调控序列GBC4.5 与 GBC6.5 的扩增结果第37页
     ·pEGFP-6.5 BspE I 和Sal I 的双酶切及pEGFP-4.5 的Sal I 单酶切结果第37-38页
     ·从pBL 扩增长约2.3 kb 的人乳铁蛋白(hLF)cDNA第38页
     ·p6.5hLF-EGFP 和 p4.5hLF-EGFP 的 Sal I/BamH I 双酶切结果第38-39页
     ·p6.5hLF-EGFP 和p4.5hLF-EGFP 载体检测结果第39页
     ·p6.5hLF-EGFP 和p4.5hLF-EGFP 载体示意图第39-40页
   ·讨论第40页
   ·结论第40-42页
 第四章 山羊胎儿成纤维细胞培养体系的建立第42-50页
   ·材料与方法第42-45页
     ·材料第42-43页
     ·方法第43-45页
   ·结果第45-48页
     ·山羊胎儿成纤维细胞转染质粒p6.5hLF-EGFP 和p4.5hLF-EGFP后报告基因EGFP 的表达第45-47页
     ·稳定转染hLFcDNA 山羊胎儿成纤维细胞基因组DNA 的多重PCR 鉴定结果第47页
     ·稳定整合hLFcDNA 阳性细胞的核型分析结果第47-48页
   ·讨论第48-49页
   ·结论第49-50页
总结第50-51页
参考文献第51-67页
致谢第67-68页
个人简历第68页

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