摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-10页 |
1 引言 | 第10-33页 |
·STLV-1 的流行病学和分子病毒学 | 第10-19页 |
·STLV-1 病毒粒子的形态及生物特性 | 第10-12页 |
·PTLV-1 的进化、流行病学及传播途径 | 第12-19页 |
·BV(HESPESVIRUS B)的病毒学和流行病学 | 第19-25页 |
·B 病毒的一般特征 | 第19-21页 |
·B 病毒的分子生物学特性 | 第21-22页 |
·B 病毒病的病理学和发病机理 | 第22-24页 |
·B 病毒感染的诊断 | 第24-25页 |
·体液免疫及免疫应答 | 第25-27页 |
·B 细胞介导的体液免疫应答 | 第25页 |
·体液免疫的特征、方式 | 第25-27页 |
·动物疫病实验室常用的诊断方法及SPF 动物的实验意义 | 第27-31页 |
·PCR 在病原学检测方面的应用 | 第27-28页 |
·酶联免疫吸附试验(ELISA)在抗原抗体检测方面的应用 | 第28页 |
·免疫印迹法(Western blotting) | 第28-29页 |
·液相芯片技术(Luminex) | 第29-31页 |
·SPF 动物对于实验研究的重大意义 | 第31页 |
·本实验的目的和意义 | 第31-33页 |
2 BV、STLV-1 抗原基因的克隆及融合HIS-TAG 蛋白的原核构建 | 第33-46页 |
·实验材料 | 第33页 |
·主要试剂 | 第33页 |
·主要仪器 | 第33页 |
·质粒与菌种 | 第33页 |
·实验方法 | 第33-37页 |
·抗原基因的克隆及其表达载体构建的技术路线 | 第33-34页 |
·STLV-1、BV 抗原基因片段的克隆与序列测定 | 第34-37页 |
·实验结果 | 第37-44页 |
·化学合成目的片段的结果 | 第37-39页 |
·酶切电泳及测序结果 | 第39-44页 |
·讨论 | 第44-46页 |
3 重组蛋白在大肠杆菌中表达与纯化 | 第46-70页 |
·实验材料 | 第46-47页 |
·主要试剂 | 第46页 |
·主要仪器 | 第46页 |
·质粒 | 第46-47页 |
·表达宿主 | 第47页 |
·实验方法 | 第47-65页 |
·表达质粒转化表达宿主 | 第47页 |
·重组蛋白的小量表达及SDS-PAGE 分析 | 第47-49页 |
·重组蛋白的大量表达——发酵 | 第49-52页 |
·重组蛋白的大量纯化 | 第52-63页 |
·BV 重组蛋白的透析 | 第63页 |
·透析产物的超滤及浓缩 | 第63页 |
·表达、纯化的重组蛋白Western Blot 分析 | 第63-64页 |
·考马斯亮蓝法测定蛋白浓度 | 第64-65页 |
·实验结果 | 第65-67页 |
·STLV-1、BV 重组蛋白纯化后SDS-PAGE 检测 | 第65-66页 |
·蛋白免疫印迹(Western Blot) | 第66-67页 |
·浓度的测定 | 第67页 |
·讨论 | 第67-70页 |
4 重组蛋白检测恒河猴血清STLV-1、BV 抗体 | 第70-90页 |
·实验材料 | 第70页 |
·实验试剂 | 第70页 |
·实验仪器 | 第70页 |
·实验方法 | 第70-75页 |
·血清的收集 | 第70-71页 |
·酶联免疫吸附实验(ELISA) | 第71-72页 |
·发光底物显色Western Blot | 第72页 |
·液相芯片(荧光微球技术—LUMINEX) | 第72-74页 |
·商品化试剂盒检测方法 | 第74-75页 |
·实验结果 | 第75-84页 |
·重组抗原与商品化ELISA 诊断试剂盒检测结果 | 第75-76页 |
·Western Blot 结果 | 第76-82页 |
·LUMINEX 结果 | 第82-84页 |
·讨论 | 第84-90页 |
·重组蛋白用于检测STLV-1 抗体与商品化试剂盒对比的讨论 | 第84-86页 |
·重组蛋白用于检测BV 抗体与商品化试剂盒对比 | 第86-87页 |
·液相芯片方法的建立对猴群净化的意义 | 第87-90页 |
5 结论 | 第90-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
参考文献 | 第92-105页 |
附录1 | 第105-149页 |
附录2 | 第149-153页 |
附录3 | 第153-156页 |
作者简介 | 第156页 |