| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 缩略词 | 第8-10页 |
| 第一章 研究目的及意义 | 第10-14页 |
| 一、盐芥耐盐机理研究的目的及意义 | 第10-11页 |
| 二、盐芥中谷胱甘肽过氧化物酶研究的目的及意义 | 第11-12页 |
| 三、磷酯氢谷胱甘肽过氧化物酶基因对抗逆研究的意义 | 第12-14页 |
| 第二章 国内外研究进展 | 第14-20页 |
| 一、盐生植物盐芥的相关研究进展 | 第14-16页 |
| (一) 盐芥——新型抗盐研究模式植物 | 第14页 |
| (二) 盐芥相关分子生物学研究 | 第14-16页 |
| 二、谷胱甘肽过氧化物酶的研究进展 | 第16-18页 |
| (一) 动物谷胱甘肽过氧化物酶的结构及分类 | 第16-17页 |
| (二) 谷胱甘肽过氧化物酶的功能和催化机制 | 第17页 |
| (三) 磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶 | 第17-18页 |
| 三、植物中GPX基因的克隆研究 | 第18-20页 |
| 第三章 实验材料与方法 | 第20-31页 |
| 一、实验材料 | 第20-23页 |
| (一) 植物材料、E.coli菌株 | 第20页 |
| (二) 质粒载体及引物序列 | 第20-22页 |
| (三) 工具酶、分子量标准及主要试剂盒 | 第22页 |
| (四) 主要化学试剂 | 第22页 |
| (五) 主要仪器、生物信息学软件及网址 | 第22-23页 |
| 二、实验方法 | 第23-31页 |
| (一) 植物材料处理方法 | 第23页 |
| (二) Trizol法提取总RNA | 第23-24页 |
| (三) 总RNA质量及浓度测定 | 第24页 |
| (四) cDNA第一链的合成 | 第24页 |
| (五) 基因片段的克隆 | 第24-25页 |
| (六) SMART~(TM) 3′-RACE(Rapid amplification of cDNA Ends)方法 | 第25-27页 |
| (七) PCR产物的回收及纯化 | 第27页 |
| (八) 连接反应 | 第27页 |
| (九) 超级感受态菌的制备(参照《分子克隆实验指南》2002年版) | 第27-28页 |
| (十) 大肠杆菌转化及蓝白斑筛选方法 | 第28页 |
| (十一) 反应产物的琼脂糖凝胶电泳检测 | 第28页 |
| (十二) DNA序列测定 | 第28页 |
| (十三) 序列拼接 | 第28-29页 |
| (十四) cDNA和蛋白质序列的生物信息学分析 | 第29页 |
| (十五) 半定量RT-PCR实验方法 | 第29-31页 |
| 第四章 实验结果与分析 | 第31-50页 |
| 一、ThGPX2和ThGPX6基因的克隆 | 第31-46页 |
| (一) 总RNA提取与质量检测 | 第31页 |
| (二) cDNA一链鉴定 | 第31-32页 |
| (三) ThGPX2基因全长的获取及序列分析 | 第32-39页 |
| (四) ThGPX6基因全长的获取及序列分析 | 第39-46页 |
| 二、半定量RT-PCR | 第46-50页 |
| (一) RNA质量检测 | 第46页 |
| (二) 指数扩增初期及模板量的确定 | 第46-48页 |
| (三) 调节内参基因的光密度 | 第48页 |
| (四) ThGPX2和ThGPX6的半定量分析 | 第48-50页 |
| 第五章 讨论 | 第50-54页 |
| 一、GPX基因序列研究 | 第50-52页 |
| 二、RACE技术研究 | 第52页 |
| 三、半定量RT-PCR研究及展望 | 第52-54页 |
| 基本结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65页 |