| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-13页 |
| 第一章 引言 | 第13-27页 |
| ·猪圆环病毒概述 | 第13-21页 |
| ·猪圆环病毒的发现及分离 | 第13页 |
| ·猪圆环病毒的物理化学特性和基因组结构 | 第13-14页 |
| ·流行病学 | 第14-15页 |
| ·猪圆环病毒相关疾病临床症状和致病机理 | 第15-17页 |
| ·诊断 | 第17-20页 |
| ·防制 | 第20-21页 |
| ·实时定量PCR 技术 | 第21-22页 |
| ·实时定量PCR 的定量原理 | 第21页 |
| ·荧光物质分类 | 第21-22页 |
| ·环介导的等温扩增技术 | 第22-27页 |
| ·反应原理 | 第23-25页 |
| ·引物设计原则 | 第25-26页 |
| ·操作流程 | 第26-27页 |
| 第二章 猪圆环病毒2 型间接ELISA 检测方法的建立 | 第27-43页 |
| ·材料与方法 | 第27-34页 |
| ·材料 | 第27-30页 |
| ·方法 | 第30-34页 |
| ·结果 | 第34-42页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第34页 |
| ·重组质粒的表达 | 第34-35页 |
| ·表达产物的Western blotting 鉴定 | 第35-36页 |
| ·重组蛋白的可溶性表达分析及纯化 | 第36页 |
| ·重组蛋白纯化后Western blotting 鉴定 | 第36-37页 |
| ·重组蛋白定量 | 第37-38页 |
| ·间接ELISA 条件优化结果 | 第38-41页 |
| ·批内及批间检测结果 | 第41页 |
| ·临床样品的检测与验证 | 第41-42页 |
| ·讨论 | 第42-43页 |
| 第三章 检测猪圆环病毒2 型 SYBR Green I 实时定量 PCR 方法的建立 | 第43-49页 |
| ·材料与方法 | 第43-45页 |
| ·毒株、细胞、菌株及质粒 | 第43页 |
| ·试剂与仪器 | 第43页 |
| ·PCV2 ORF2 全基因的扩增和克隆 | 第43-44页 |
| ·PCR 反应 | 第44页 |
| ·实时定量PCR 实验 | 第44-45页 |
| ·结果 | 第45-48页 |
| ·pGEX-6P-1-ORF2 重组质粒的构建 | 第45页 |
| ·实时定量PCR 结果 | 第45-48页 |
| ·讨论 | 第48-49页 |
| 第四章猪圆环病毒2 型LAMP 检测方法的建立 | 第49-57页 |
| ·材料与方法 | 第49-52页 |
| ·病毒与菌株 | 第49页 |
| ·引物 | 第49页 |
| ·试剂与试剂盒 | 第49-50页 |
| ·主要仪器设备 | 第50页 |
| ·病毒模板的制备 | 第50-51页 |
| ·LAMP 反应体系优化 | 第51-52页 |
| ·结果 | 第52-56页 |
| ·引物验证结果 | 第52-54页 |
| ·镁离子浓度优化结果 | 第54页 |
| ·内外引物比例优化结果 | 第54-55页 |
| ·灵敏度检测结果 | 第55页 |
| ·特异性检测结果 | 第55-56页 |
| ·讨论 | 第56-57页 |
| 第五章 全文结论 | 第57-58页 |
| ·猪圆环病毒 2 型 ELISA 检测方法的建立 | 第57页 |
| ·猪圆环病毒 2 型实时定量 PCR 检测方法的建立 | 第57页 |
| ·猪圆环病毒 2 型 LAMP 检测方法的建立 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
