| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-11页 |
| 引言 | 第11-15页 |
| 1 玫瑰黄链霉菌研究进展 | 第11-12页 |
| 2 抗生素生物合成基因簇的组成特点及克隆策略 | 第12-13页 |
| 3 链霉菌线性质粒的研究进展 | 第13页 |
| 4 玫瑰黄链霉菌Men-myco-93-63 的研究进展及立题依据和目的意义 | 第13-15页 |
| 第一章 内源线性质粒的检测分析 | 第15-22页 |
| 1 材料和方法 | 第15-18页 |
| ·材料 | 第15-16页 |
| ·菌丝体培养 | 第16页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第16页 |
| ·碱性溶菌法提取内源质粒 | 第16页 |
| ·改进的碱裂解法提取内源质粒 | 第16-17页 |
| ·标准琼脂糖包埋块的制备 | 第17页 |
| ·非标准琼脂糖包埋块的制备 | 第17页 |
| ·二次处理 | 第17页 |
| ·电泳检测质粒构型 | 第17-18页 |
| ·双向电泳验证 | 第18页 |
| ·脉冲场凝胶电泳（PFGE）检测质粒种类 | 第18页 |
| ·电泳验证质粒大小 | 第18页 |
| 2 结果与分析 | 第18-20页 |
| ·基因组DNA 及内源质粒DNA 的检测 | 第18-19页 |
| ·“包埋块二次处理法”检测质粒构型 | 第19页 |
| ·双向电泳验证 | 第19页 |
| ·PFGE 检测质粒种类及大小 | 第19-20页 |
| ·验证线性质粒大小 | 第20页 |
| 3 讨论 | 第20-21页 |
| 4 结论 | 第21-22页 |
| 第二章 质粒消除 | 第22-35页 |
| 1 材料和方法 | 第22-27页 |
| ·材料 | 第22-23页 |
| ·冻融法去除质粒 | 第23页 |
| ·十二烷基硫酸钠（SDS）/高温循环法去除质粒 | 第23-24页 |
| ·原生质体法去除质粒 | 第24页 |
| ·传代培养 | 第24页 |
| ·包埋块法验证 | 第24-25页 |
| ·16s rDNA 扩增 | 第25页 |
| ·形态观察 | 第25-26页 |
| ·链霉菌菌种保存 | 第26页 |
| ·生物活性测定 | 第26页 |
| ·粗提抗生素的制备 | 第26页 |
| ·粗提抗生素的活性测定 | 第26-27页 |
| ·薄层层析分析 | 第27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-32页 |
| ·冻融质粒消除法 | 第27页 |
| ·SDS/高温循环质粒消除法 | 第27-28页 |
| ·原生质体质粒消除法 | 第28页 |
| ·传代培养 | 第28-29页 |
| ·16s rDNA 序列分析 | 第29页 |
| ·包埋块验证 | 第29-30页 |
| ·形态特征 | 第30-31页 |
| ·生物活性测定 | 第31页 |
| ·粗提抗生素的生物活性测定 | 第31-32页 |
| ·薄层层析分析 | 第32页 |
| 3 讨论 | 第32-34页 |
| 4 结论 | 第34-35页 |
| 第三章 线性质粒DNA 及大片段基因组DNA 提取方法的研究 | 第35-42页 |
| 1 材料和方法 | 第35-39页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·菌丝体的培养及检测 | 第35页 |
| ·活性成分的检测 | 第35-36页 |
| ·基因组DNA 提取方法的摸索 | 第36-38页 |
| ·线性质粒提取方法的探索 | 第38页 |
| ·脉冲场凝胶电泳 | 第38-39页 |
| ·紫外检测浓度和纯度 | 第39页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-41页 |
| ·菌株质量检测 | 第39页 |
| ·基因组DNA 的检测 | 第39-40页 |
| ·基因组DNA 的质量分析 | 第40页 |
| ·线性质粒DNA 的检测 | 第40-41页 |
| 3 讨论 | 第41页 |
| 4 结论 | 第41-42页 |
| 第四章 内源线性质粒的分子生物学研究 | 第42-58页 |
| 1 材料与方法 | 第42-44页 |
| ·材料 | 第42页 |
| ·线性质粒的分离 | 第42页 |
| ·端粒的克隆 | 第42-43页 |
| ·线性质粒DNA 文库的构建 | 第43-44页 |
| ·线性质粒的异源转化 | 第44页 |
| 2 结果与分析 | 第44-54页 |
| ·检测分离的线性质粒 | 第44页 |
| ·线性质粒的部分酶切 | 第44-45页 |
| ·检测文库质量 | 第45页 |
| ·序列分析 | 第45-54页 |
| ·线性质粒的异源转化 | 第54页 |
| 3 讨论 | 第54-57页 |
| ·非核糖体合成酶（NRPSs） | 第54-55页 |
| ·聚酮合成酶（PKSs） | 第55页 |
| ·次级代谢调控基因 | 第55-56页 |
| ·其他抗生素相关基因 | 第56-57页 |
| ·形态分化基因 | 第57页 |
| 4 结论 | 第57-58页 |
| 全文结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| 附录 | 第67-68页 |
| 作者简历 | 第68-69页 |
| 致谢 | 第69页 |