| 内容提要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 1 前言 | 第12-33页 |
| ·天然橡胶生产所面临的现状 | 第12-13页 |
| ·巴西橡胶树的生物学研究现状 | 第13-20页 |
| ·巴西橡胶树的生物学背景及产胶生理 | 第13-14页 |
| ·巴西橡胶树的产胶排胶机制研究现状 | 第14-15页 |
| ·巴西橡胶树的分子生物学研究现状 | 第15-20页 |
| ·高等植物植物蔗糖转运蛋白的研究进展 | 第20-31页 |
| ·植物蔗糖转运蛋白概述 | 第22-23页 |
| ·植物蔗糖转运蛋白的结构特点和性质 | 第22页 |
| ·植物蔗糖转运蛋白的分类 | 第22-23页 |
| ·植物蔗糖转运蛋白及其编码基因 | 第23-27页 |
| ·基因的分离 | 第24-26页 |
| ·基因的表达和调控 | 第26-27页 |
| ·植物蔗糖转运蛋白的功能 | 第27-31页 |
| ·参与韧皮部的装载与卸载 | 第27-28页 |
| ·参与蔗糖的储藏 | 第28页 |
| ·参与库组织的蔗糖供给 | 第28页 |
| ·参与生物胁迫与非生物胁迫 | 第28-29页 |
| ·参与植物-微生物间的相互作用 | 第29-30页 |
| ·蔗糖信号感应与共转运效率的调控 | 第30-31页 |
| ·小结 | 第31页 |
| ·本项研究的目的和意义 | 第31-32页 |
| ·本项研究的技术路线 | 第32-33页 |
| 2 材料和方法 | 第33-47页 |
| ·材料与试剂 | 第33页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·质粒及菌种 | 第33页 |
| ·生化试剂 | 第33页 |
| ·方法与步骤 | 第33-47页 |
| ·橡胶树胶乳和叶片总RNA的提取 | 第33-35页 |
| ·橡胶树胶乳总RNA的提取 | 第33-34页 |
| ·橡胶树叶片总RNA的提取 | 第34页 |
| ·RNA电泳检测 | 第34-35页 |
| ·总RNA中微量DNA的去除 | 第35页 |
| ·逆转录合成cDNA第一链 | 第35-36页 |
| ·HbSUT保守区域的扩增 | 第36-38页 |
| ·引物设计 | 第36页 |
| ·PCR扩增 | 第36-37页 |
| ·PCR扩增产物的回收 | 第37页 |
| ·PCR扩增产物片段的亚克隆与重组子筛选 | 第37-38页 |
| ·3' RACE扩增HbSUT的3'端 | 第38-40页 |
| ·3' RACE引物 | 第38-39页 |
| ·逆转录合成cDNA第一链 | 第39页 |
| ·PCR扩增 | 第39-40页 |
| ·PCR扩增产物的回收 | 第40页 |
| ·目的片段的克隆及其重组子筛选 | 第40页 |
| ·5' RACE扩增HbSUT的5'端 | 第40-42页 |
| ·5'RACE引物 | 第40-41页 |
| ·逆转录合成cDNA第一链 | 第41页 |
| ·cDNA第一链加poly(A)尾 | 第41页 |
| ·PCR扩增 | 第41-42页 |
| ·PCR扩增产物的回收 | 第42页 |
| ·目的片段的克隆及其重组子筛选 | 第42页 |
| ·HbSUT全长cDNA的克隆 | 第42-44页 |
| ·引物设计 | 第42-43页 |
| ·扩增 | 第43页 |
| ·PCR扩增产物的回收 | 第43页 |
| ·目的片段的克隆与其重组子筛选 | 第43-44页 |
| ·HbSUT的基因的RT-PCR表达分析 | 第44页 |
| ·不同组织采样 | 第44页 |
| ·伤害和割胶的处理方法 | 第44页 |
| ·乙烯利的处理方法 | 第44页 |
| ·健康和死皮树的采样方法 | 第44页 |
| ·不同品系的采样方法 | 第44页 |
| ·酵母体内功能互补实验 | 第44-45页 |
| ·酵母重组表达载体的构建 | 第44-45页 |
| ·酵母感受态细胞制备 | 第45页 |
| ·转化 | 第45页 |
| ·筛选 | 第45页 |
| ·酵母体内C~(14)标记的蔗糖吸收实验 | 第45-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-73页 |
| ·RNA的提取 | 第47页 |
| ·HbSUT基因的克隆 | 第47-57页 |
| ·HbSUT基因的保守区扩增 | 第47-48页 |
| ·HbSUT基因的3' RACE扩增 | 第48-49页 |
| ·HbSUT基因的5' RACE扩增 | 第49-50页 |
| ·HbSUT基因的全长克隆 | 第50-57页 |
| ·HbSUT基因的生物信息学分析 | 第57-60页 |
| ·HbSUT跨膜区预测 | 第57-58页 |
| ·HbSUT同源性和系统发育分析 | 第58-60页 |
| ·HbSUT的RT-PCR表达分析 | 第60-68页 |
| ·HbSUT的组织表达分析 | 第60-62页 |
| ·HbSUT同一基因在不同组织的表达分析 | 第60-61页 |
| ·HbSUT不同基因在同一组织的表达分析 | 第61-62页 |
| ·伤害和割胶对HbSUT基因表达的影响 | 第62-64页 |
| ·伤害对HbSUT基因表达的影响 | 第62-63页 |
| ·割胶对HbSUT基因表达的影响 | 第63-64页 |
| ·乙烯利刺激对HbSUT基因表达的影响 | 第64-67页 |
| ·不同浓度的乙烯利处理同一时间对HbSUT基因表达的影响 | 第64页 |
| ·乙烯利处理不同时间对HbSUT基因表达的影响 | 第64-67页 |
| ·HbSUT基因在健康和死皮树中的表达分析 | 第67页 |
| ·HbSUT基因在不同品系间的表达分析 | 第67-68页 |
| ·HbSUT基因在不同产胶水平橡胶树单株中的表达分析 | 第67-68页 |
| ·HbSUT基因在在不同橡胶树品系中的表达分析 | 第68页 |
| ·酵母体内功能互补实验 | 第68-70页 |
| ·酵母菌株鉴定 | 第68-69页 |
| ·酵母体内功能互补实验 | 第69-70页 |
| ·酵母体内C~(14)标记的蔗糖吸收实验 | 第70-73页 |
| 4 结论 | 第73-74页 |
| 5 讨论 | 第74-77页 |
| ·关于材料的选取 | 第74页 |
| ·关于HbSUT的功能 | 第74-75页 |
| ·关于基因表达水平的检测 | 第75页 |
| ·关于HbSUT基因的酵母表达 | 第75-77页 |
| 参考文献 | 第77-89页 |
| 作者在读期间科研成果简介 | 第89-90页 |
| 附录 | 第90-94页 |
| 附录一:有关试剂的配制 | 第90-92页 |
| 附录二:缩略词 | 第92-94页 |
| 致谢 | 第94页 |