| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第10-22页 |
| 一：禽（番鸭）呼肠孤病毒 | 第10-16页 |
| 1 呼肠孤病毒的研究现状 | 第10-11页 |
| ·呼肠孤病毒科简介 | 第10页 |
| ·禽呼肠孤病毒的历史、发生和分布 | 第10-11页 |
| ·禽呼肠孤病毒简介 | 第11页 |
| 2 病毒的理化特性 | 第11-12页 |
| 3 分子生物学特性 | 第12页 |
| ·基因组 | 第12页 |
| ·基因组编码的蛋白 | 第12页 |
| 4 病毒的致病性 | 第12-13页 |
| 5 禽（番鸭）呼肠孤病毒的研究现状 | 第13-14页 |
| ·简介 | 第13页 |
| ·临床症状及流行病学 | 第13页 |
| ·病理变化 | 第13-14页 |
| 6 禽呼肠孤病毒的诊断 | 第14-15页 |
| ·血清学诊断方法 | 第14页 |
| ·分子生物学诊断方法 | 第14-15页 |
| ·鉴别诊断 | 第15页 |
| 7 防治 | 第15-16页 |
| 二：实时荧光定量PCR（REAL-TIME FLUORESCENCE QUANTITIVE PCR.REAL-TIME FQ-PCR） | 第16-21页 |
| 1 FQ-PCR 的原理 | 第16-17页 |
| 2 两个重要的概念 | 第17-18页 |
| ·荧光域值(Threshold) | 第17页 |
| ·循环阈值(Cycle Threshold value,Ct) | 第17-18页 |
| 3 荧光标记与探针类型 | 第18-21页 |
| ·SYBR Green I 荧光染料 | 第18页 |
| ·分子信标（molecular beacon） | 第18页 |
| ·双杂交探针法（Lightecycler 法） | 第18-19页 |
| ·TaqMan 探针 | 第19-21页 |
| 三：番鸭呼肠孤病毒病的危害及本研究的目的 | 第21-22页 |
| 实验研究 | 第22-42页 |
| 1 材料 | 第22-23页 |
| ·番鸭与番鸭胚 | 第22页 |
| ·毒株 | 第22页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器及材料 | 第22-23页 |
| 2 实验方法 | 第23-31页 |
| ·引物及探针的设计与合成 | 第23页 |
| ·病毒的扩增 | 第23页 |
| ·病毒核酸的提取 | 第23-24页 |
| ·反应条件的优化 | 第24-25页 |
| ·反转录前病毒核酸的变性与不变性的比较 | 第24-25页 |
| ·反应退火温度的选择 | 第25页 |
| ·引物和探针的最佳配比浓度 | 第25页 |
| ·标准品的制备 | 第25-29页 |
| ·重组质粒的构建 | 第25-27页 |
| ·重组质粒的提取及鉴定 | 第27-28页 |
| ·标准品的制备 | 第28-29页 |
| ·重复性、稳定性试验 | 第29页 |
| ·标准曲线的制作 | 第29页 |
| ·灵敏度及特异性试验 | 第29-30页 |
| ·该诊断方法的应用 | 第30-31页 |
| ·人工攻毒番鸭肝脏组织中病毒核酸的检测 | 第30页 |
| ·临床样品的检测 | 第30-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-38页 |
| ·反转录前病毒核酸的不变性与变性的比较 | 第31-32页 |
| ·反应退火温度的选择 | 第32-33页 |
| ·引物和探针的最佳配比浓度(终浓度) | 第33页 |
| ·重组质粒的提取及鉴定 | 第33-34页 |
| ·重复性、稳定性试验 | 第34-35页 |
| ·标准曲线的建立 | 第35-36页 |
| ·灵敏度试验 | 第36-37页 |
| ·特异性试验 | 第37页 |
| ·攻毒番鸭肝脏组织中病毒核酸的检测 | 第37页 |
| ·临床样品的检测 | 第37-38页 |
| 4 讨论 | 第38-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-47页 |