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Exendin-4的生物合成及其生物活性

致谢第1-8页
摘要第8-9页
1 文献综述第9-15页
   ·Exendin-4 简介第9页
   ·Exendin-4 的发现第9-10页
   ·Exendin-4 空间结构及与受体结合第10-11页
   ·Exendin-4 基因表达特点第11-12页
   ·Exendin-4 的信号传导途径及作用机制第12-13页
   ·Exendin-4 的生物学效应第13-14页
   ·Exendin-4 应用与研究现状第14-15页
2 引言第15-16页
3 材料与方法第16-22页
   ·材料、试剂与仪器第16页
     ·菌株与载体等第16页
     ·酶和其它试剂第16页
     ·主要仪器第16页
     ·实验动物第16页
   ·实验方法第16-22页
     ·表达载体的构建第16-17页
       ·人工合成Exendin-4 基因第16-17页
       ·表达载体pRSET B-Exendin-4 的构建第17页
       ·在Exendin-4 基因两端加酶切位点第17页
       ·克隆载体pMD19-T-Exendin-4 的构建第17页
       ·表达载体pET-32a(+)-Exendin-4 的构建第17页
     ·Exendin-4 表达第17-18页
     ·纯化融合蛋白Trx-Exendin-4第18页
     ·透析融合蛋白Trx-Exendin-4第18-19页
     ·肠激酶酶切融合蛋白Trx-Exendin-4第19页
       ·酶切反应温度第19页
       ·肠激酶的用量第19页
     ·纯化Exendin-4第19页
     ·一步法纯化Exendin-4第19-20页
     ·生物活性测定第20-22页
       ·急性降糖作用第20页
       ·降糖持续时间第20页
       ·长期降糖作用第20-21页
       ·对糖化血红蛋白的影响第21页
       ·对血脂的影响第21页
       ·对体重和采食量的影响第21-22页
4 结果与分析第22-39页
   ·基因改造第22页
   ·Exendin-4 表达载体的构建第22-27页
     ·表达载体pRSET B-Exendin-4 构建策略第22-23页
     ·表达载体pRSET B-Exendin-4 的构建第23-24页
     ·表达载体pET-32a-Exendin-4 构建策略第24-25页
     ·克隆载体pMD19-T-Exendin-4 的构建第25-26页
     ·表达载体pET-32a(+)- Exendin-4 的构建第26-27页
   ·Exendin-4 表达第27-29页
     ·表达载体pRSET B-Exendin-4 的表达第27-28页
     ·表达载体pET-32a-Exendin-4 的表达第28-29页
   ·纯化融合蛋白Trx-Exendin-4第29-30页
   ·透析融合蛋白Trx-Exendin-4第30页
   ·肠激酶酶切融合蛋白Trx-Exendin-4第30-33页
     ·酶切反应温度第30-32页
     ·肠激酶用量第32-33页
   ·纯化Exendin-4第33页
   ·一步法纯化Exendin-4第33-35页
   ·生物活性测定第35-39页
     ·急性降糖作用第35-36页
     ·降糖持续时间第36页
     ·长期降糖作用第36-37页
     ·对糖化血红蛋白的影响第37页
     ·对血脂的影响第37-38页
     ·对体重和采食量的影响第38-39页
5 结论与讨论第39-42页
   ·结论第39页
   ·讨论第39-42页
     ·非融合表达载体pRSET B-Exendin-4 未表达的原因第39-41页
     ·Exendin-4 的生物活性第41-42页
参考文献第42-47页
英文摘要第47页

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