中文摘要 | 第1-12页 |
ABSTRACT | 第12-14页 |
1 引言 | 第14-26页 |
·植物的主动防御系统 | 第14-15页 |
·植物系统获得性抗性 | 第15-18页 |
·SA 介导的植物系统获得抗性 | 第16页 |
·JA/茉莉酸甲酯和ET 介导的植物系统获得抗性 | 第16-18页 |
·植物中交替氧化酶基因的研究进展 | 第18-24页 |
·交替氧化途径 | 第18-19页 |
·交替氧化酶基因的克隆 | 第19-20页 |
·交替氧化酶基因的分类 | 第20-21页 |
·交替氧化酶基因的结构特点 | 第21-23页 |
·交替氧化酶基因的功能 | 第23-24页 |
·本研究的目的及意义 | 第24-26页 |
2 材料与方法 | 第26-52页 |
·实验材料 | 第26-29页 |
·植物材料 | 第26页 |
·植物材料培养与处理 | 第26页 |
·菌株与质粒 | 第26-27页 |
·酶与各种生化试剂 | 第27页 |
·PCR 引物 | 第27-29页 |
·实验方法 | 第29-52页 |
·植物总RNA 的提取及检测 | 第29-31页 |
·cDNA 全长序列的获得 | 第31-35页 |
·植物总DNA 的提取及纯化 | 第35-36页 |
·NgAOX1a 全长基因组序列的获得 | 第36-37页 |
·NgAOX1a 基因启动子的分离 | 第37-39页 |
·目的片段的回收 | 第39-40页 |
·目的片段与克隆载体的连接 | 第40-41页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备 | 第41页 |
·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第41页 |
·质粒DNA 的提取 | 第41-44页 |
·对重组质粒的鉴定 | 第44-45页 |
·半定量RT-PCR 检测目的基因的表达 | 第45-46页 |
·Northern 杂交 | 第46-47页 |
·Southern 杂交 | 第47-48页 |
·植物表达载体的构建 | 第48-50页 |
·根癌农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备、转化 | 第50页 |
·农杆菌介导转化烟草 | 第50-52页 |
3 结果与分析 | 第52-74页 |
·心叶烟NGAOX1A 基因的分离 | 第52-58页 |
·心叶烟RNA 的提取及反转录 | 第52页 |
·NgAOX1a 基因中间片段的分离 | 第52-53页 |
·NgAOX1a 5′片段的分离 | 第53-54页 |
·NgAOX1a 3′片段的分离 | 第54页 |
·NgAOX1a 全长cDNA 的分离 | 第54-56页 |
·NgAOX1a 基因组DNA 的分离 | 第56页 |
·NgAOX1a 启动子的分离 | 第56-57页 |
·NgAOX1a 启动子缺失片段的获得 | 第57-58页 |
·NGAOX1A 的序列分析 | 第58-64页 |
·NgAOX1a 的全长cDNA 分析 | 第58-60页 |
·NgAOX1a 基因编码蛋白序列分析 | 第60-62页 |
·NgAOX1a 基因组序列分析 | 第62-63页 |
·NgAOX1a 基因启动子序列分析 | 第63-64页 |
·NGAOX1A 基因在心叶烟基因组中的拷贝数分析 | 第64-65页 |
·NGAOX1A 基因在外界胁迫条件下的表达特性分析 | 第65-68页 |
·非生物胁迫条件下NgAOX1a 基因在mRNA 水平的变化 | 第65-67页 |
·生物胁迫条件下NgAOX1a 基因在mRNA 水平的变化 | 第67-68页 |
·NGAOX1A 基因在转基因烟草中的表达 | 第68-71页 |
·转基因烟草表达载体的构建 | 第68-69页 |
·再生植株的获得 | 第69-71页 |
·T1 代转基因植株的PCR 鉴定 | 第71页 |
·NGAOX1A 启动子缺失分析 | 第71-74页 |
·p81121 载体酶切位点的改造 | 第71-73页 |
·表达载体的构建 | 第73页 |
·再生植株的获得 | 第73-74页 |
4 讨论 | 第74-77页 |
·NGAOX1A 基因序列特征分析 | 第74页 |
·NGAOX1A 在外界胁迫条件下的诱导表达分析 | 第74-75页 |
·NGAOX1A 基因启动子的克隆 | 第75-77页 |
5 结论 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-89页 |
附录 | 第89-92页 |
致谢 | 第92-93页 |
附:硕士阶段已发表的论文 | 第93页 |