缩略语表 | 第7-10页 |
中文摘要 | 第10-16页 |
ABSTRACT | 第16-22页 |
前言 | 第22-25页 |
文献回顾 | 第25-62页 |
研究假说 | 第62-63页 |
实验设计 | 第63-64页 |
实验一 HHCY诱导大鼠心肌结构及功能变化的分子机制及牛磺酸干预的研究 | 第64-86页 |
1 材料 | 第64-66页 |
1.1 主要试剂 | 第64页 |
1.2 主要试剂的配制 | 第64-65页 |
1.3 实验动物与喂养 | 第65页 |
1.4 主要实验仪器及厂家 | 第65-66页 |
2 方法 | 第66-71页 |
2.1 高同型半胱氨酸血症大鼠模型的建立及实验分组 | 第66页 |
2.2 无创尾动脉血压检测仪检测大鼠动脉SBP | 第66-67页 |
2.3 小动物超声检测大鼠心脏功能 | 第67页 |
2.4 颈动脉插管法检测大鼠左心室内血流动力 | 第67页 |
2.5 便携式Hcy自动检测仪检测大鼠血清Hcy浓度 | 第67-68页 |
2.6 柱前衍生化反相高效液相色谱法测定大鼠心肌组织牛磺酸含量 | 第68页 |
2.7 扫描电镜观察大鼠心肌组织超微结构 | 第68页 |
2.8 免疫组化染色检测相关蛋白在大鼠心肌组织的表达 | 第68-69页 |
2.9 Western blot检测相关蛋白在大鼠心肌组织的表达 | 第69-71页 |
2.10 TUNEL凋亡试剂盒检测大鼠心肌细胞凋亡 | 第71页 |
2.11 统计学处理 | 第71页 |
3 结果 | 第71-80页 |
3.1 各组大鼠心率、SBP及血清Hcy水平检测结果 | 第71-72页 |
3.2 各组大鼠心脏功能指标的变化 | 第72-73页 |
3.3 各组大鼠血流动力学指标的变化 | 第73页 |
3.4 免疫组化检测GRP78及CRT在各组大鼠心肌组织中表达的变化 | 第73-74页 |
3.5 免疫组化检测Bcl-2 及Bax在各组大鼠心肌组织中表达的变化 | 第74-75页 |
3.6 各组大鼠心肌组织中牛磺酸浓度及TAUT表达的变化 | 第75-76页 |
3.7 Western blot检测内质网应激相关蛋白在各组大鼠心肌组织中表达水平的变化 | 第76-77页 |
3.8 Western blot检测线粒体应激相关蛋白在各组大鼠心肌组织中表达水平的变化 | 第77-79页 |
3.9 TUNEL检测各组大鼠心肌细胞的凋亡 | 第79页 |
3.10 扫描电镜检测各组大鼠心肌组织的超微结构 | 第79-80页 |
4 讨论 | 第80-86页 |
实验二 HCY诱导ERS调控H9C2心肌细胞凋亡的研究 | 第86-106页 |
1 材料 | 第86-87页 |
1.1 主要试剂及厂家 | 第86页 |
1.2 主要试剂的配制 | 第86-87页 |
1.3 细胞来源 | 第87页 |
1.4 主要实验仪器及厂家 | 第87页 |
2 方法 | 第87-90页 |
2.1 H9C2心肌细胞培养与实验分组 | 第87-88页 |
2.2 CCK-8 检测H9C2心肌细胞活力 | 第88页 |
2.3 流式细胞术检测H9C2心肌细胞凋亡 | 第88-89页 |
2.4 Western blot检测H9C2心肌细胞中各相关蛋白的表达 | 第89页 |
2.5 钙离子荧光探针检测H9C2心肌细胞钙离子浓度 | 第89-90页 |
2.6 统计学处理 | 第90页 |
3 结果 | 第90-102页 |
3.1 Hcy对H9C2心肌细胞活力及形态的影响 | 第90-91页 |
3.2 Hcy对H9C2心肌细胞凋亡的影响 | 第91-92页 |
3.3 Hcy对H9C2心肌细胞内钙离子稳态的影响 | 第92-93页 |
3.4 不同Hcy浓度对H9C2心肌细胞ERS-PERK信号通路相关蛋白表达的影响 | 第93-94页 |
3.5 不同Hcy浓度对H9C2心肌细胞UPR相关蛋白GRP78、IRE1及ATF6表达的影响 | 第94-95页 |
3.6 不同Hcy浓度对H9C2心肌细胞ERS促凋亡蛋白JNK及caspase-12 表达的影响 | 第95页 |
3.7 不同Hcy处理时间对H9C2心肌细胞ERS-PERK信号通路相关蛋白表达的影响 | 第95-96页 |
3.8 不同Hcy处理时间对H9C2心肌细胞UPR相关蛋白GRP78、IRE1及ATF6表达的影响 | 第96-97页 |
3.9 不同Hcy处理时间对H9C2心肌细胞ERS促凋亡蛋白JNK及caspase-12 表达的影响 | 第97-98页 |
3.10 4-PBA抑制ERS对Hcy诱导的H9C2心肌细胞凋亡的影响 | 第98-99页 |
3.11 Salubrinal阻断ERS-PERK信号通路对Hcy诱导的H9C2心肌细胞凋亡的影响 | 第99-101页 |
3.12 Si-PERK对Hcy诱导的H9C2心肌细胞凋亡的影响 | 第101-102页 |
4 讨论 | 第102-106页 |
实验三 HCY诱导H9C2心肌细胞线粒体功能变化的研究 | 第106-118页 |
1 材料 | 第106-107页 |
1.5 主要试剂及厂家 | 第106页 |
1.6 主要试剂的配制 | 第106页 |
1.7 细胞来源 | 第106页 |
1.8 主要实验仪器及厂家 | 第106-107页 |
2 方法 | 第107-109页 |
3 结果 | 第109-114页 |
3.1 Hcy对H9C2心肌细胞Bcl-2、Bax及caspase-3表达的影响 | 第109-110页 |
3.2 Hcy对H9C2心肌细胞线粒体膜电位(Δψm)的影响 | 第110-111页 |
3.3 Hcy对H9C2心肌细胞胞质内Cyt C及caspase-9 表达的影响 | 第111-112页 |
3.4 Hcy对H9C2心肌细胞线粒体内ROS水平的影响 | 第112-113页 |
3.5 Hcy对H9C2心肌细胞胞质内ROS水平的影响 | 第113页 |
3.6 Salubrinal阻断PERK信号通路对Bcl-2/Bax、caspase-9及caspase-3表达的影响 | 第113-114页 |
4 讨论 | 第114-118页 |
实验四 牛磺酸保护HCY诱导的H9C2心肌细胞的分子机制研究 | 第118-127页 |
1 材料 | 第118页 |
1.1 主要试剂及厂家 | 第118页 |
1.2 主要试剂的配制 | 第118页 |
1.3 细胞来源 | 第118页 |
1.4 主要实验仪器及厂家 | 第118页 |
2 方法 | 第118-119页 |
3 结果 | 第119-124页 |
3.1 牛磺酸对Hcy诱导的H9C2心肌细胞活力及细胞形态的影响 | 第119-121页 |
3.2 牛磺酸对Hcy诱导的ERS相关蛋白表达的影响 | 第121页 |
3.3 牛磺酸对Hcy诱导的线粒体应激相关蛋白及其下游相关蛋白表达的影响 | 第121-122页 |
3.4 牛磺酸对Hcy诱导的H9C2心肌细胞线粒体膜电位的影响 | 第122-123页 |
3.5 牛磺酸对Hcy诱导的H9C2心肌细胞线粒体ROS水平的影响 | 第123-124页 |
3.6 牛磺酸对Hcy诱导的H9C2心肌细胞超微结构的影响 | 第124页 |
4 讨论 | 第124-127页 |
小结 | 第127-129页 |
参考文献 | 第129-143页 |
个人简历和研究成果 | 第143-145页 |
致谢 | 第145页 |