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同型半胱氨酸诱导内质网应激及线粒体应激调控大鼠心肌细胞凋亡及牛磺酸干预的研究

缩略语表第7-10页
中文摘要第10-16页
ABSTRACT第16-22页
前言第22-25页
文献回顾第25-62页
研究假说第62-63页
实验设计第63-64页
实验一 HHCY诱导大鼠心肌结构及功能变化的分子机制及牛磺酸干预的研究第64-86页
    1 材料第64-66页
        1.1 主要试剂第64页
        1.2 主要试剂的配制第64-65页
        1.3 实验动物与喂养第65页
        1.4 主要实验仪器及厂家第65-66页
    2 方法第66-71页
        2.1 高同型半胱氨酸血症大鼠模型的建立及实验分组第66页
        2.2 无创尾动脉血压检测仪检测大鼠动脉SBP第66-67页
        2.3 小动物超声检测大鼠心脏功能第67页
        2.4 颈动脉插管法检测大鼠左心室内血流动力第67页
        2.5 便携式Hcy自动检测仪检测大鼠血清Hcy浓度第67-68页
        2.6 柱前衍生化反相高效液相色谱法测定大鼠心肌组织牛磺酸含量第68页
        2.7 扫描电镜观察大鼠心肌组织超微结构第68页
        2.8 免疫组化染色检测相关蛋白在大鼠心肌组织的表达第68-69页
        2.9 Western blot检测相关蛋白在大鼠心肌组织的表达第69-71页
        2.10 TUNEL凋亡试剂盒检测大鼠心肌细胞凋亡第71页
        2.11 统计学处理第71页
    3 结果第71-80页
        3.1 各组大鼠心率、SBP及血清Hcy水平检测结果第71-72页
        3.2 各组大鼠心脏功能指标的变化第72-73页
        3.3 各组大鼠血流动力学指标的变化第73页
        3.4 免疫组化检测GRP78及CRT在各组大鼠心肌组织中表达的变化第73-74页
        3.5 免疫组化检测Bcl-2 及Bax在各组大鼠心肌组织中表达的变化第74-75页
        3.6 各组大鼠心肌组织中牛磺酸浓度及TAUT表达的变化第75-76页
        3.7 Western blot检测内质网应激相关蛋白在各组大鼠心肌组织中表达水平的变化第76-77页
        3.8 Western blot检测线粒体应激相关蛋白在各组大鼠心肌组织中表达水平的变化第77-79页
        3.9 TUNEL检测各组大鼠心肌细胞的凋亡第79页
        3.10 扫描电镜检测各组大鼠心肌组织的超微结构第79-80页
    4 讨论第80-86页
实验二 HCY诱导ERS调控H9C2心肌细胞凋亡的研究第86-106页
    1 材料第86-87页
        1.1 主要试剂及厂家第86页
        1.2 主要试剂的配制第86-87页
        1.3 细胞来源第87页
        1.4 主要实验仪器及厂家第87页
    2 方法第87-90页
        2.1 H9C2心肌细胞培养与实验分组第87-88页
        2.2 CCK-8 检测H9C2心肌细胞活力第88页
        2.3 流式细胞术检测H9C2心肌细胞凋亡第88-89页
        2.4 Western blot检测H9C2心肌细胞中各相关蛋白的表达第89页
        2.5 钙离子荧光探针检测H9C2心肌细胞钙离子浓度第89-90页
        2.6 统计学处理第90页
    3 结果第90-102页
        3.1 Hcy对H9C2心肌细胞活力及形态的影响第90-91页
        3.2 Hcy对H9C2心肌细胞凋亡的影响第91-92页
        3.3 Hcy对H9C2心肌细胞内钙离子稳态的影响第92-93页
        3.4 不同Hcy浓度对H9C2心肌细胞ERS-PERK信号通路相关蛋白表达的影响第93-94页
        3.5 不同Hcy浓度对H9C2心肌细胞UPR相关蛋白GRP78、IRE1及ATF6表达的影响第94-95页
        3.6 不同Hcy浓度对H9C2心肌细胞ERS促凋亡蛋白JNK及caspase-12 表达的影响第95页
        3.7 不同Hcy处理时间对H9C2心肌细胞ERS-PERK信号通路相关蛋白表达的影响第95-96页
        3.8 不同Hcy处理时间对H9C2心肌细胞UPR相关蛋白GRP78、IRE1及ATF6表达的影响第96-97页
        3.9 不同Hcy处理时间对H9C2心肌细胞ERS促凋亡蛋白JNK及caspase-12 表达的影响第97-98页
        3.10 4-PBA抑制ERS对Hcy诱导的H9C2心肌细胞凋亡的影响第98-99页
        3.11 Salubrinal阻断ERS-PERK信号通路对Hcy诱导的H9C2心肌细胞凋亡的影响第99-101页
        3.12 Si-PERK对Hcy诱导的H9C2心肌细胞凋亡的影响第101-102页
    4 讨论第102-106页
实验三 HCY诱导H9C2心肌细胞线粒体功能变化的研究第106-118页
    1 材料第106-107页
        1.5 主要试剂及厂家第106页
        1.6 主要试剂的配制第106页
        1.7 细胞来源第106页
        1.8 主要实验仪器及厂家第106-107页
    2 方法第107-109页
    3 结果第109-114页
        3.1 Hcy对H9C2心肌细胞Bcl-2、Bax及caspase-3表达的影响第109-110页
        3.2 Hcy对H9C2心肌细胞线粒体膜电位(Δψm)的影响第110-111页
        3.3 Hcy对H9C2心肌细胞胞质内Cyt C及caspase-9 表达的影响第111-112页
        3.4 Hcy对H9C2心肌细胞线粒体内ROS水平的影响第112-113页
        3.5 Hcy对H9C2心肌细胞胞质内ROS水平的影响第113页
        3.6 Salubrinal阻断PERK信号通路对Bcl-2/Bax、caspase-9及caspase-3表达的影响第113-114页
    4 讨论第114-118页
实验四 牛磺酸保护HCY诱导的H9C2心肌细胞的分子机制研究第118-127页
    1 材料第118页
        1.1 主要试剂及厂家第118页
        1.2 主要试剂的配制第118页
        1.3 细胞来源第118页
        1.4 主要实验仪器及厂家第118页
    2 方法第118-119页
    3 结果第119-124页
        3.1 牛磺酸对Hcy诱导的H9C2心肌细胞活力及细胞形态的影响第119-121页
        3.2 牛磺酸对Hcy诱导的ERS相关蛋白表达的影响第121页
        3.3 牛磺酸对Hcy诱导的线粒体应激相关蛋白及其下游相关蛋白表达的影响第121-122页
        3.4 牛磺酸对Hcy诱导的H9C2心肌细胞线粒体膜电位的影响第122-123页
        3.5 牛磺酸对Hcy诱导的H9C2心肌细胞线粒体ROS水平的影响第123-124页
        3.6 牛磺酸对Hcy诱导的H9C2心肌细胞超微结构的影响第124页
    4 讨论第124-127页
小结第127-129页
参考文献第129-143页
个人简历和研究成果第143-145页
致谢第145页

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