| 摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-14页 |
| 缩略词 | 第14-15页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-26页 |
| ·miRNA分子的特点 | 第15-17页 |
| ·miRNA分子的发现 | 第15-16页 |
| ·植物miRNA的特点 | 第16-17页 |
| ·miRNA的生物合成及作用机制 | 第17-20页 |
| ·植物miRNA的生物合成 | 第17-19页 |
| ·植物miRNA的作用机制 | 第19-20页 |
| ·植物miRNA的生物学功能 | 第20-22页 |
| ·miRNA与植物的生长发育 | 第20-21页 |
| ·miRNA与植物的抗逆性 | 第21-22页 |
| ·miRNA的表达特性 | 第22页 |
| ·miRNA的检测方法 | 第22-25页 |
| ·Northern杂交 | 第23页 |
| ·原位杂交 | 第23页 |
| ·基因芯片 | 第23-24页 |
| ·反转录聚合酶链式反应 | 第24-25页 |
| ·本研究的目的意义 | 第25-26页 |
| 第二章 草莓植株中miRNA的基因芯片检测 | 第26-40页 |
| ·材料与方法 | 第26-30页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·试剂 | 第26页 |
| ·芯片探针的设计 | 第26-27页 |
| ·芯片的合成与点制 | 第27页 |
| ·草莓叶片中小分子RNA的提取及检测 | 第27-28页 |
| ·miRNA样品的荧光标记 | 第28-29页 |
| ·芯片杂交与清洗 | 第29页 |
| ·图像获得和数据处理 | 第29页 |
| ·检测到的miRNA基因的保守性分析 | 第29-30页 |
| ·结果与分析 | 第30-37页 |
| ·草莓小分子RNA的分离和鉴定 | 第30-31页 |
| ·芯片检测到的草莓植株中的miRNA | 第31-36页 |
| ·草莓植株中的miRNA与其它陆地植物中的miRNA的保守性分析 | 第36-37页 |
| ·讨论 | 第37-39页 |
| ·小分子RNA富集方法 | 第37页 |
| ·miRNA基因芯片技术 | 第37-38页 |
| ·miRNA存在的广泛性 | 第38页 |
| ·miRNA序列的保守性 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39-40页 |
| 第三章 草莓植株中miRNA的RT-PCR检测体系的建立 | 第40-60页 |
| ·材料与方法 | 第40-50页 |
| ·植物材料 | 第40页 |
| ·试剂 | 第40页 |
| ·引物及接头的设计与合成 | 第40-45页 |
| ·核酸提取方法 | 第45-46页 |
| ·RT-PCR鉴定方法 | 第46-47页 |
| ·PCR特异片段的回收 | 第47-48页 |
| ·PCR产物克隆测序 | 第48-49页 |
| ·实时定量RT-PCR | 第49-50页 |
| ·结果与分析 | 第50-57页 |
| ·三种利用RT-PCR技术检测miRNA方法的比较 | 第50-51页 |
| ·不同性质的核酸为模板的茎环RT-PCR | 第51-54页 |
| ·草莓不同器官中miRNA的RT-PCR检测 | 第54-55页 |
| ·草莓植株中miRNA的定量RT-PCR分析 | 第55-57页 |
| ·讨论 | 第57-59页 |
| ·RT-PCR鉴定miRNA方法的比较 | 第57-58页 |
| ·miRNA的定量检测方法 | 第58-59页 |
| ·小结 | 第59-60页 |
| 第四章 草莓miRNA差异表达研究 | 第60-80页 |
| ·材料与方法 | 第60-64页 |
| ·植物材料的获得与培养 | 第60-61页 |
| ·试剂 | 第61页 |
| ·引物及探针 | 第61-63页 |
| ·芯片的合成与点制 | 第63页 |
| ·草莓总RNA的提取及检测 | 第63页 |
| ·小分子RNA的富集 | 第63页 |
| ·miRNA样品的荧光标记 | 第63页 |
| ·芯片杂交与清洗 | 第63页 |
| ·图像获得和数据处理 | 第63-64页 |
| ·实时定量RT-PCR | 第64页 |
| ·结果与分析 | 第64-75页 |
| ·草莓不同器官中的miRNA表达差异 | 第64-65页 |
| ·微繁殖原种苗与传统匍匐茎繁殖苗的miRNA表达差异 | 第65-67页 |
| ·草莓离体植株与活体植株miRNA的表达差异 | 第67-73页 |
| ·草莓成年阶段不同发育时期miRNA表达差异 | 第73-75页 |
| ·讨论 | 第75-79页 |
| ·miRNA的表达特性 | 第75-76页 |
| ·miRNA在阶段转变中的作用 | 第76-77页 |
| ·微繁殖导致的miRNA表达差异 | 第77-78页 |
| ·miRNA与表观遗传变异 | 第78-79页 |
| ·小结 | 第79-80页 |
| 第五章 结论及创新点 | 第80-81页 |
| ·结论 | 第80页 |
| ·创新点 | 第80页 |
| ·下一步研究设想 | 第80-81页 |
| 参考文献 | 第81-90页 |
| 附录 | 第90-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 攻读学位期间发表的文章 | 第106-107页 |
