| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-9页 |
| 1 绪论 | 第9-23页 |
| ·胶原蛋白概述 | 第9-16页 |
| ·胶原蛋白的结构 | 第9-10页 |
| ·胶原蛋白的类型 | 第10-11页 |
| ·胶原蛋白的生产 | 第11页 |
| ·胶原蛋白的功能 | 第11-13页 |
| ·胶原蛋白在生物医学材料领域的应用 | 第13-16页 |
| ·毕赤酵母高密度发酵概况 | 第16-21页 |
| ·高密度发酵的影响因素 | 第16-19页 |
| ·高密度发酵动力学 | 第19-21页 |
| ·类人胶原蛋白的分离纯化 | 第21-22页 |
| ·本论文的研究内容 | 第22-23页 |
| 2 实验材料和方法 | 第23-32页 |
| ·实验材料 | 第23-27页 |
| ·菌株 | 第23页 |
| ·药品及试剂 | 第23-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25页 |
| ·培养基 | 第25页 |
| ·常用溶液 | 第25-27页 |
| ·实验方法 | 第27-32页 |
| ·菌体培养 | 第27页 |
| ·菌体浓度 | 第27页 |
| ·菌体湿重 | 第27页 |
| ·菌体干重 | 第27页 |
| ·考马斯亮蓝比色法测总蛋白含量 | 第27-28页 |
| ·SDS-PAGE法测定胶原蛋白分子量、含量及纯度 | 第28-29页 |
| ·甲醇含量测定 | 第29-30页 |
| ·甘油含量测定 | 第30-32页 |
| 3 重组毕赤酵母高表达条件优化 | 第32-41页 |
| ·BBD设计 | 第32-34页 |
| ·确定实验因素 | 第32-33页 |
| ·确定因素水平范围 | 第33页 |
| ·实验设计安排及结果 | 第33-34页 |
| ·实验数据统计分析 | 第34-35页 |
| ·因素水平优化 | 第35-39页 |
| ·模型适合性检验 | 第39-40页 |
| ·优化验证 | 第40-41页 |
| 4 重组毕赤酵母高密度发酵动力学 | 第41-55页 |
| ·高密度发酵工艺 | 第41-44页 |
| ·蛋白测定标准曲线 | 第44-45页 |
| ·甲醇测定标准曲线 | 第45-46页 |
| ·发酵动力学 | 第46-55页 |
| ·菌体生长的非结构动力学模型 | 第48-49页 |
| ·产物形成模型 | 第49-51页 |
| ·基质消耗动力学 | 第51-55页 |
| 5 类人胶原蛋白的鉴定 | 第55-62页 |
| ·发酵液预处理 | 第55页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE电泳 | 第55-57页 |
| ·胞外分泌检测 | 第55-56页 |
| ·胞内表达检测 | 第56-57页 |
| ·透析浓缩 | 第57页 |
| ·离子交换层析 | 第57页 |
| ·凝胶过滤层析 | 第57页 |
| ·纯化产物的SDS-PAGE电泳 | 第57-58页 |
| ·产物紫外光谱鉴定 | 第58-59页 |
| ·产物红外光谱鉴定 | 第59-62页 |
| 结论 | 第62-63页 |
| 展望 | 第63-64页 |
| 致谢 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |