| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-13页 |
| 第一部分：文献综述 大豆品质改良的研究进展 | 第13-29页 |
| 摘要 | 第13-14页 |
| 前言 | 第14页 |
| 1. 大豆品质改良的常规育种 | 第14-18页 |
| ·大豆外观品质的改良 | 第15页 |
| ·提高大豆蛋白质和脂肪含量 | 第15-16页 |
| ·高蛋白育种 | 第15-16页 |
| ·高脂肪育种 | 第16页 |
| ·提高大豆蛋白质和脂肪的品质 | 第16-18页 |
| ·大豆蛋白质品质的改良 | 第16-17页 |
| ·大豆脂肪品质的改良 | 第17-18页 |
| 2. 大豆品质改良的基因工程育种 | 第18-27页 |
| ·大豆油脂改良 | 第19-23页 |
| ·高油大豆 | 第20-21页 |
| ·高油酸大豆 | 第21-22页 |
| ·高亚麻酸大豆 | 第22-23页 |
| ·含特殊脂肪酸的大豆 | 第23页 |
| ·大豆蛋白质改良 | 第23-27页 |
| ·培育富含硫蛋白的大豆 | 第24-26页 |
| ·通过表达异源富含硫氨基酸的蛋白基因来提高大豆含硫氨基酸的含量 | 第24-25页 |
| ·提高大豆内源含硫氨基酸的蛋白表达水平 | 第25页 |
| ·通过表达修饰后的内源蛋白基因来提高大豆蛋白质含量 | 第25-26页 |
| ·培育含赖氨酸的转基因大豆 | 第26页 |
| ·大豆过敏蛋白原改良 | 第26-27页 |
| 3. 问题与展望 | 第27-29页 |
| 第二部分：研究论文 | 第29-77页 |
| 第一篇 Gy1-Gy7 嵌合基因表达载体转化烟草的研究 | 第29-64页 |
| 摘要 | 第29-30页 |
| 前言 | 第30-32页 |
| 材料与方法 | 第32-55页 |
| 1 材料 | 第32-35页 |
| ·供试烟草 | 第32页 |
| ·菌株、质粒和主要生化试剂 | 第32-34页 |
| ·培养基 | 第34-35页 |
| ·基本培养基成分 | 第34页 |
| ·烟草遗传转化培养基 | 第34-35页 |
| ·细菌培养基 | 第35页 |
| 2 方法 | 第35-55页 |
| ·表达载体的鉴定 | 第35-40页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
| ·表达载体转化大肠杆菌 | 第36页 |
| ·大肠杆菌质粒的提取 | 第36-37页 |
| ·养菌 | 第36页 |
| ·质粒的抽提 | 第36-37页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备 | 第37页 |
| ·质粒转化农杆菌 | 第37-38页 |
| ·农杆菌质粒的提取 | 第38页 |
| ·养菌 | 第38页 |
| ·质粒的抽提 | 第38页 |
| ·质粒的PCR 检测 | 第38-39页 |
| ·引物设计 | 第38页 |
| ·反应体系 | 第38-39页 |
| ·质粒的酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·重组质粒pCAMBIA1301-Gy1-Gy7 cDNA-nos 的酶切鉴定 | 第39页 |
| ·质粒pCAMBIA1301-Gy1-Gy7-nos 的酶切鉴定 | 第39-40页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第40页 |
| ·凝胶的制备 | 第40页 |
| ·加样及进行电泳 | 第40页 |
| ·烟草无菌苗的快繁及移栽 | 第40-41页 |
| ·根癌农杆菌介导的烟草遗传转化及转基因植株的再生 | 第41-42页 |
| ·含有Gy7 全基因和Gy7 基因cDNA 序列的表达载体分别转化烟草 | 第41-42页 |
| ·农杆菌菌液的准备 | 第41页 |
| ·叶盘法转化 | 第41-42页 |
| ·筛选培养获得抗性幼苗 | 第42页 |
| ·生根培养 | 第42页 |
| ·炼苗与移栽 | 第42页 |
| ·转基因烟草植株的鉴定及继代培养 | 第42-55页 |
| ·转基因烟草GUS 活性组织化学分析 | 第42-43页 |
| ·试剂的制备 | 第42-43页 |
| ·试验方法 | 第43页 |
| ·GUS 检测阳性植株的继代培养 | 第43页 |
| ·转基因烟草植株总DNA 的PCR 分析 | 第43-45页 |
| ·CTAB 法大量抽提烟草植株叶片的总DNA | 第43-44页 |
| ·PCR 分析 | 第44-45页 |
| ·T_0 代转基因植株的PCR-Southern blot 分析（ECL） | 第45-48页 |
| ·试剂的制备 | 第45页 |
| ·试验步骤 | 第45-48页 |
| ·大豆球蛋白G7 抗体制备 | 第48-53页 |
| ·序列比对 | 第48页 |
| ·中间载pMD-Gy7’的构建 | 第48-50页 |
| ·表达载体PET32a-Gy7’的构建 | 第50-51页 |
| ·SDS-PAGE 鉴定重组菌的表达量 | 第51-52页 |
| ·重组蛋白的回收 | 第52-53页 |
| ·回收到的蛋白送往上海中科英沐生物科技有限公司制备抗体 | 第53页 |
| ·转基因烟草种子的Western blot 分析 | 第53-55页 |
| ·烟草种子总蛋白的提取 | 第53页 |
| ·试剂的制备 | 第53页 |
| ·试验方法 | 第53-54页 |
| ·试剂准备 | 第54页 |
| ·SDS-PAGE 电泳 | 第54页 |
| ·转膜 | 第54页 |
| ·印迹 | 第54-55页 |
| 结果与分析 | 第55-62页 |
| 1. 表达载体质粒的鉴定 | 第55-57页 |
| ·PCR 分析 | 第55-56页 |
| ·酶切分析 | 第56-57页 |
| 2. 转基因烟草的生长过程 | 第57-59页 |
| 3. 转基因烟草的PCR 分析 | 第59-60页 |
| 4. 转基因烟草的PCR-Southern blot 分析 | 第60页 |
| 5. 大豆球蛋白G7 抗体检测 | 第60-61页 |
| 6. 转基因烟草的Western-Blot 检测 | 第61-62页 |
| 讨论 | 第62-64页 |
| 第二篇 大豆胚尖法再生体系的改良研究 | 第64-77页 |
| 摘要 | 第64-65页 |
| 前言 | 第65-68页 |
| 材料和方法 | 第68-70页 |
| 1、材料 | 第68页 |
| 2、试剂 | 第68页 |
| 3、培养基 | 第68-69页 |
| 4. 大豆胚尖组织培养过程 | 第69-70页 |
| 结果与分析 | 第70-75页 |
| 1. 不同激素浓度配比对大豆胚尖出芽率和平均出芽数的影响 | 第70-72页 |
| ·不同激素浓度配比对黑农35 大豆胚尖出芽率和平均出芽数的影响 | 第70-71页 |
| ·不同激素浓度配比对黑生101 大豆胚尖出芽率和平均出芽数的影响 | 第71-72页 |
| 2. 不同激素浓度配比对大豆胚尖不定芽伸长的影响 | 第72-74页 |
| ·不同激素浓度配比对黑农35 大豆胚尖不定芽伸长的影响 | 第72-73页 |
| ·不同激素浓度配比对黑生101 大豆胚尖不定芽伸长的影响 | 第73-74页 |
| 3. 两种大豆品种胚尖不定芽的生根情况 | 第74页 |
| 4. 同样条件对不同基因型大豆胚尖再生的影响 | 第74-75页 |
| 讨论 | 第75-77页 |
| 1. 激素浓度对大豆胚尖分化及出芽的影响 | 第75-76页 |
| 2. 激素浓度对大豆胚尖伸长的影响 | 第76-77页 |
| 3. 不同基因型大豆胚尖再生体系的研究 | 第77页 |
| 总结 | 第77-78页 |
| 附图 | 第78-80页 |
| 参考文献 | 第80-90页 |
| 附录：中英文对照 | 第90-91页 |
| 研究生期间论文及研究成果 | 第91页 |
