| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-23页 |
| ·植物抗坏血酸的研究进展 | 第11-18页 |
| ·植物中抗坏血酸的生物学功能 | 第11-15页 |
| ·抗坏血酸作为抗氧化剂保护植物体免受氧化损伤 | 第11页 |
| ·抗坏血酸在植物抵抗其它逆境胁迫时的作用 | 第11-14页 |
| ·抗坏血酸在细胞壁代谢和细胞膨大中的作用 | 第14页 |
| ·抗坏血酸在细胞分裂和分化中的作用 | 第14页 |
| ·参与其它物质的合成 | 第14-15页 |
| ·植物抗坏血酸的生物合成途径 | 第15-17页 |
| ·邻酮醛糖合成途径 | 第15页 |
| ·碳链倒位途径 | 第15页 |
| ·L-半乳糖途径 | 第15-16页 |
| ·可能的交替途径：糖醛酸转变途径 | 第16-17页 |
| ·植物抗坏血酸的调控机制 | 第17页 |
| ·植物抗坏血酸的代谢和转运 | 第17-18页 |
| ·植物抗坏血酸过氧化物酶（APX）的研究进展 | 第18-19页 |
| ·植物脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)的研究进展 | 第19-20页 |
| ·植物的L-半乳糖内酯脱氢酶(L-GALLDH)的研究进展 | 第20-21页 |
| ·外源基因原核表达的研究进展和应用现状 | 第21-22页 |
| ·原核表达载体 | 第21页 |
| ·目的蛋白在原核表达中的形式 | 第21页 |
| ·大肠杆菌表达系统研究的新进展 | 第21-22页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 材料和方法 | 第23-29页 |
| ·试验材料 | 第23-24页 |
| ·菌种与载体 | 第23页 |
| ·酶及生化试剂 | 第23页 |
| ·引物的设计与合成 | 第23-24页 |
| ·主要仪器设备 | 第24页 |
| ·试验内容及方法 | 第24-29页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第24-25页 |
| ·APX 基因原核表达载体的构建 | 第24页 |
| ·DHAR 基因原核表达载体的构建 | 第24-25页 |
| ·GALDH 基因原核表达载体的构建 | 第25页 |
| ·37℃条件下不同浓度IPTG 对转化子的诱导表达 | 第25-26页 |
| ·诱导蛋白的可溶性分析 | 第26页 |
| ·转化子不同温度、IPTG 浓度和不同时间的诱导表达和表达蛋白的可溶性分析 | 第26页 |
| ·可溶性目标蛋白的纯化 | 第26-27页 |
| ·纯化蛋白的酶活测定 | 第27-29页 |
| ·APX 基因表达蛋白纯化的酶活测定方法 | 第27页 |
| ·DHAR 基因表达蛋白纯化的酶活测定方法 | 第27页 |
| ·ALGALDH 基因表达蛋白纯化的酶活测定方法 | 第27-29页 |
| 第三章 结果与分析 | 第29-46页 |
| ·苹果APX 基因的原核表达 | 第29-34页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第29页 |
| ·苹果APX 基因的诱导表达SDS-PAGE 分析 | 第29-31页 |
| ·低温诱导及蛋白可溶性分析 | 第31-33页 |
| ·重组质粒PET-APX 在37℃条件下诱导表达的总蛋白的可溶性分析 | 第31-32页 |
| ·低温条件下重组质粒PET-APX 的诱导表达蛋白的可溶性分析 | 第32-33页 |
| ·重组质粒PET-APX 诱导表达的可溶性蛋白的纯化 | 第33-34页 |
| ·纯化的重组质粒PET-APX 的诱导表达蛋白的酶活测定 | 第34页 |
| ·苹果DHAR 基因的原核表达 | 第34-41页 |
| ·苹果DHAR 基因原核表达载体的构建 | 第34-35页 |
| ·重组质粒PET-DHAR 的诱导表达及SDS-PAGE 分析 | 第35-37页 |
| ·低温诱导及蛋白可溶性分析 | 第37-39页 |
| ·重组质粒PET-DHAR 在37℃条件下诱导表达的总蛋白的可溶性分析 | 第37-38页 |
| ·低温条件下重组质粒PET-DHAR 的诱导表达蛋白的可溶性分析 | 第38-39页 |
| ·重组质粒PET-DHAR 诱导表达的可溶性蛋白的纯化 | 第39-40页 |
| ·纯化的重组质粒PET-DHAR 诱导表达的可溶性蛋白的酶活测定 | 第40-41页 |
| ·阔叶猕猴桃GALDH 基因的原核表达 | 第41-46页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第41页 |
| ·猕猴桃ALGALDH 基因的诱导表达与SDS-PAGE 分析 | 第41-42页 |
| ·重组质粒PET-ALGALDH 低温诱导表达及蛋白可溶性分析 | 第42-45页 |
| ·重组质粒PET-ALGALDH 在37℃条件下诱导表达的总蛋白的可溶性分析 | 第42-43页 |
| ·低温条件下重组质粒PET-ALGALDH 的诱导表达蛋白的可溶性分析 | 第43-45页 |
| ·重组质粒PET-ALGALDH 诱导表达的可溶性蛋白的纯化 | 第45页 |
| ·纯化的重组质粒PET-ALGALDH 诱导表达的可溶性蛋白的酶活测定 | 第45-46页 |
| 第四章 讨论 | 第46-48页 |
| ·关于原核表达载体的选择 | 第46页 |
| ·原核表达宿主菌的选择 | 第46页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第46-47页 |
| ·可溶性蛋白的纯化 | 第47-48页 |
| 第五章 结论 | 第48-49页 |
| ·载体的构建 | 第48页 |
| ·重组质粒PET-APX 的诱导表达 | 第48页 |
| ·重组质粒PET-DHAR 的诱导表达 | 第48页 |
| ·重组质粒PET-ALGALDH 的诱导表达 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 作者简介 | 第59页 |
