摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-11页 |
第一章 前言 | 第11-26页 |
1 海胆及其受精过程 | 第11-17页 |
·海胆概述 | 第11-13页 |
·海胆的受精过程 | 第13-17页 |
2 目标酶蛋白:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH) | 第17-19页 |
3 免疫细胞化学相关方法概述 | 第19-25页 |
·低温冷冻超薄切片技术 | 第20-21页 |
·免疫荧光标记技术 | 第21-22页 |
·免疫金银染色技术 | 第22-25页 |
4 论文的研究目的和意义 | 第25-26页 |
第二章 基于低温冷冻半薄切片技术的两种酶蛋白定位方法的建立 | 第26-39页 |
0 引言 | 第26页 |
1 材料与方法 | 第26-33页 |
·试验材料 | 第26-27页 |
·海胆成熟卵细胞的收集 | 第27页 |
·低温冷冻半薄切片 | 第27-30页 |
·固定 | 第27页 |
·明胶(gelatine)包埋 | 第27-28页 |
·冷冻保护:蔗糖渗透 | 第28页 |
·样品架置及冰冻 | 第28-29页 |
·切片 | 第29-30页 |
·酶蛋白定位的免疫标记方法比较 | 第30-33页 |
·免疫金银染 | 第30-32页 |
·免疫荧光标记 | 第32-33页 |
2 结果与分析 | 第33-36页 |
3 讨论 | 第36-39页 |
·低温冷冻半薄切片技术 | 第36-37页 |
·海胆受精卵中酶蛋白定位新方法 | 第37-39页 |
第三章 基于酶蛋白定位、定量新方法的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 的研究 | 第39-49页 |
0 引言 | 第39页 |
1 材料与方法 | 第39-42页 |
·试验材料 | 第39-40页 |
·海胆配子收集及in vitro 受精 | 第40页 |
·低温冷冻半薄切片 | 第40-41页 |
·固定 | 第40页 |
·明胶(gelatine)包埋 | 第40-41页 |
·冷冻保护:蔗糖渗透 | 第41页 |
·样品架置及冰冻 | 第41页 |
·切片 | 第41页 |
·免疫金银染 | 第41页 |
·免疫荧光标记 | 第41-42页 |
2 结果与分析 | 第42-46页 |
·海胆受精卵中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的分布 | 第42-44页 |
·海胆受精卵中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的定量测定 | 第44-46页 |
3 讨论 | 第46-49页 |
第四章 基于in vivo 图像分析技术的酶蛋白活性测定新方法的建立和应用 | 第49-63页 |
0 引言 | 第49-50页 |
1 材料与方法 | 第50-55页 |
·试验材料 | 第50页 |
·海胆配子收集及in vitro 受精 | 第50页 |
·显微镜及照相机的调试设定 | 第50-51页 |
·吸收度—灰度级对照表的建立 | 第51-52页 |
·Macro 程序编写 | 第52-53页 |
·硝基四氮唑蓝定量测定法检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性 | 第53-55页 |
2 结果与分析 | 第55-60页 |
·“吸收度—灰度级”对照表的绘制 | 第55-56页 |
·受精过程中G6PDH 酶活性区域的in vivo 测定 | 第56-60页 |
·定时图像拍摄和酶活性区域的选择 | 第56-58页 |
·受精过程中G6PDH 的活性测量 | 第58-59页 |
·受精过程中G6PDH 酶活性的区域的测定 | 第59-60页 |
3 讨论 | 第60-63页 |
·in vivo 图像和“灰度—吸光度”分析法在蛋白酶活性测定中的应用 | 第60-61页 |
·海胆受精卵中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的活性分布 | 第61-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
附录 | 第69-80页 |
致谢 | 第80-81页 |
个人简历 | 第81页 |
发表的学术论文 | 第81页 |