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海胆(Psammechinus miliaris L.)受精卵中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶定位及定量方法的建立和应用

摘要第1-7页
Abstract第7-11页
第一章 前言第11-26页
 1 海胆及其受精过程第11-17页
   ·海胆概述第11-13页
   ·海胆的受精过程第13-17页
 2 目标酶蛋白:葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)第17-19页
 3 免疫细胞化学相关方法概述第19-25页
   ·低温冷冻超薄切片技术第20-21页
   ·免疫荧光标记技术第21-22页
   ·免疫金银染色技术第22-25页
 4 论文的研究目的和意义第25-26页
第二章 基于低温冷冻半薄切片技术的两种酶蛋白定位方法的建立第26-39页
 0 引言第26页
 1 材料与方法第26-33页
   ·试验材料第26-27页
   ·海胆成熟卵细胞的收集第27页
   ·低温冷冻半薄切片第27-30页
     ·固定第27页
     ·明胶(gelatine)包埋第27-28页
     ·冷冻保护:蔗糖渗透第28页
     ·样品架置及冰冻第28-29页
     ·切片第29-30页
   ·酶蛋白定位的免疫标记方法比较第30-33页
     ·免疫金银染第30-32页
     ·免疫荧光标记第32-33页
 2 结果与分析第33-36页
 3 讨论第36-39页
   ·低温冷冻半薄切片技术第36-37页
   ·海胆受精卵中酶蛋白定位新方法第37-39页
第三章 基于酶蛋白定位、定量新方法的葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 的研究第39-49页
 0 引言第39页
 1 材料与方法第39-42页
   ·试验材料第39-40页
   ·海胆配子收集及in vitro 受精第40页
   ·低温冷冻半薄切片第40-41页
     ·固定第40页
     ·明胶(gelatine)包埋第40-41页
     ·冷冻保护:蔗糖渗透第41页
     ·样品架置及冰冻第41页
     ·切片第41页
   ·免疫金银染第41页
   ·免疫荧光标记第41-42页
 2 结果与分析第42-46页
   ·海胆受精卵中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的分布第42-44页
   ·海胆受精卵中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的定量测定第44-46页
 3 讨论第46-49页
第四章 基于in vivo 图像分析技术的酶蛋白活性测定新方法的建立和应用第49-63页
 0 引言第49-50页
 1 材料与方法第50-55页
   ·试验材料第50页
   ·海胆配子收集及in vitro 受精第50页
   ·显微镜及照相机的调试设定第50-51页
   ·吸收度—灰度级对照表的建立第51-52页
   ·Macro 程序编写第52-53页
   ·硝基四氮唑蓝定量测定法检测葡萄糖-6-磷酸脱氢酶活性第53-55页
 2 结果与分析第55-60页
   ·“吸收度—灰度级”对照表的绘制第55-56页
   ·受精过程中G6PDH 酶活性区域的in vivo 测定第56-60页
     ·定时图像拍摄和酶活性区域的选择第56-58页
     ·受精过程中G6PDH 的活性测量第58-59页
     ·受精过程中G6PDH 酶活性的区域的测定第59-60页
 3 讨论第60-63页
   ·in vivo 图像和“灰度—吸光度”分析法在蛋白酶活性测定中的应用第60-61页
   ·海胆受精卵中葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的活性分布第61-63页
参考文献第63-69页
附录第69-80页
致谢第80-81页
个人简历第81页
发表的学术论文第81页

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