牛体细胞核移植方法的研究
| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-13页 |
| 第一部分 研究论文 | 第13-51页 |
| 第一章 牛卵母细胞的采集、成熟培养及孤雌激活 | 第13-25页 |
| 前言 | 第13-14页 |
| 1 材料与方法 | 第14-16页 |
| ·屠宰卵巢卵母细胞的采集 | 第14页 |
| ·牛大卵泡液的制备 | 第14页 |
| ·卵母细胞的成熟培养及成熟检查 | 第14-15页 |
| ·卵母细胞的孤雌激活 | 第15页 |
| ·孤雌激活卵母细胞的培养 | 第15-16页 |
| ·数据处理 | 第16页 |
| 2 结果与分析 | 第16-19页 |
| ·不同激素添加量对牛卵母细胞体外成熟的影响 | 第16-17页 |
| ·BFF存在与否对牛卵母细胞体外成熟的影响 | 第17页 |
| ·不同激活处理方式对牛卵母细胞孤雌激活的影响 | 第17-18页 |
| ·更换培养液对牛孤雌胚发育力的影响 | 第18-19页 |
| 3 讨论 | 第19-22页 |
| ·激素对牛卵母细胞体外成熟的影响 | 第19-20页 |
| ·大卵泡液对牛卵母细胞体外成熟的影响 | 第20页 |
| ·不同激活方法对牛卵母细胞孤雌激活的影响 | 第20-21页 |
| ·换液和不换液对牛孤雌胚的发育力的影响 | 第21-22页 |
| 4 结论 | 第22-23页 |
| 参考文献 | 第23-25页 |
| 第二章 牛体细胞的分离与体外培养 | 第25-32页 |
| 前言 | 第25页 |
| 1 材料与方法 | 第25-27页 |
| ·牛耳皮肤成纤维细胞的来源 | 第25-26页 |
| ·牛颗粒细胞的原代培养 | 第26页 |
| ·培养细胞的传代 | 第26页 |
| ·培养细胞的冻存及复苏 | 第26-27页 |
| ·牛颗粒细胞的核型分析 | 第27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-29页 |
| ·牛颗粒细胞的原代培养及其生长行为 | 第27页 |
| ·牛耳皮肤成纤维细胞解冻及其生长行为 | 第27-28页 |
| ·牛颗粒细胞和耳皮肤成纤维细胞的冷冻,复苏 | 第28页 |
| ·牛颗粒细胞的核型分析 | 第28-29页 |
| 3 讨论 | 第29-30页 |
| ·牛颗粒细胞的原代培养方法的探索 | 第29页 |
| ·牛颗粒细胞和耳皮肤成纤维细胞的冷冻,复苏 | 第29-30页 |
| ·牛颗粒细胞的核型分析 | 第30页 |
| 4 结论 | 第30-31页 |
| 参考文献 | 第31-32页 |
| 第三章 兔抗牛脾细胞免疫血清的制备 | 第32-38页 |
| 前言 | 第32页 |
| 1 材料和方法 | 第32-34页 |
| ·实验动物 | 第32-33页 |
| ·兔抗牛脾细胞免疫血清的制备 | 第33页 |
| ·细胞凝集试验 | 第33页 |
| ·抗血清效价测定 | 第33页 |
| ·抗血清对牛体细胞膜裂解作用 | 第33-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-35页 |
| ·细胞凝集试验 | 第34页 |
| ·抗体效价测定 | 第34页 |
| ·抗血清对牛体细胞膜的裂解作用 | 第34-35页 |
| 3 讨论 | 第35-36页 |
| ·免抗牛脾细胞免疫血清的制备及抗体效价测定 | 第35页 |
| ·抗血清对牛体细胞膜的裂解作用 | 第35-36页 |
| 4 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-38页 |
| 第四章 显微操作用针的制备 | 第38-42页 |
| 前言 | 第38页 |
| 1 去核与注核针的制备 | 第38-40页 |
| 2 持卵针的制备 | 第40-41页 |
| 3 针的保存 | 第41页 |
| 参考文献 | 第41-42页 |
| 第五章 牛体细胞核移植 | 第42-51页 |
| 前言 | 第42-43页 |
| 1 材料与方法 | 第43-45页 |
| ·细胞质供体卵母细胞的获得 | 第43页 |
| ·核供体体细胞的获得 | 第43-44页 |
| ·重组胚的激活 | 第44页 |
| ·重组胚的体外培养 | 第44页 |
| ·实验设计 | 第44-45页 |
| ·数据处理 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-47页 |
| ·不同供核细胞对核移植效果的影响 | 第45-46页 |
| ·低温冷藏保存供体细胞一定时间对核移植效果的影响 | 第46页 |
| ·注核后不同间隔时间激活对核移植重构胚发育的影响 | 第46-47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| ·不同核供体细胞对核移植效果的影响 | 第47-48页 |
| ·低温冷藏供体细胞对核移植效果的影响 | 第48页 |
| ·注核后激活间隔时间对核移植胚胎发育的影响 | 第48-49页 |
| 4 结论 | 第49页 |
| 参考文献 | 第49-51页 |
| 图版说明 | 第51-53页 |
| 图版 | 第53-60页 |
| 附录 | 第60-64页 |
| 附录一 英文缩略词 | 第60-61页 |
| 附录二 实验试剂 | 第61-62页 |
| 附录三 主要仪器设备 | 第62-63页 |
| 附录四 主要实验耗材 | 第63-64页 |
| 第二部分 文献综述 | 第64-84页 |
| 哺乳动物体细胞核移植研究进展 | 第64-84页 |
| 致谢 | 第84-85页 |
| 硕士期间发表论文情况 | 第85页 |
