| 致谢 | 第1-11页 |
| 缩写词 | 第11-15页 |
| 摘要 | 第15-17页 |
| Abstract | 第17-20页 |
| 前言 | 第20-22页 |
| 1 文献综述 | 第22-31页 |
| ·植物转录因子概述 | 第22-24页 |
| ·植物转录因子的一般概念 | 第22页 |
| ·植物转录因子的功能结构域 | 第22页 |
| ·植物转录因子的研究方法 | 第22-23页 |
| ·植物转录因子的瞬间表达分析 | 第22-23页 |
| ·植物转录因子的功能突变分析 | 第23页 |
| ·植物转录因子的生物学功能 | 第23-24页 |
| ·转录因子与植物生长发育和形态建成 | 第23页 |
| ·转录因子与植物抗逆 | 第23-24页 |
| ·植物转录因子与花粉发育 | 第24-28页 |
| ·与花药发育早期相关的转录因子 | 第25页 |
| ·与花粉囊及绒毡层发育相关的转录因子 | 第25-27页 |
| ·与花粉发育后期有关的转录因子 | 第27-28页 |
| ·C2H2锌指家族转录因子 | 第28-31页 |
| ·矮牵牛中的C2H2型锌指转录因子 | 第28-29页 |
| ·拟南芥中的C2H2型锌指转录因子 | 第29-30页 |
| ·其他作物中的C2H2型锌指转录因子 | 第30-31页 |
| 2 C2H2型锌指蛋白新基因BcMF20的克隆及序列分析 | 第31-41页 |
| ·材料与方法 | 第31-35页 |
| ·植物材料与主要试剂 | 第31页 |
| ·DNA提取 | 第31-32页 |
| ·RNA分离 | 第32页 |
| ·cDNA合成 | 第32-33页 |
| ·第一链cDNA的合成 | 第33页 |
| ·cDNA的LD-PCR扩增 | 第33页 |
| ·基因同源扩增 | 第33-34页 |
| ·cDNA和DNA测序 | 第34-35页 |
| ·回收产物的连接转化 | 第34页 |
| ·碱裂解法抽提质粒 | 第34-35页 |
| ·序列的特征分析 | 第35页 |
| ·结果与分析 | 第35-38页 |
| ·获得At1g26610同源基因的编码区序列和DNA序列 | 第35页 |
| ·BcMF20核苷酸序列 | 第35-38页 |
| ·BcMF20的特征 | 第38页 |
| ·讨论 | 第38-41页 |
| ·BcMF20的结构 | 第38页 |
| ·BcMF20的相关功能预测 | 第38-41页 |
| 3 十字花科植物BcMF20同源序列的克隆及系统进化分析 | 第41-54页 |
| ·材料与方法 | 第41-43页 |
| ·实验材料 | 第41页 |
| ·同源基因的克隆及测序 | 第41-42页 |
| ·序列差异分析和系统进化分析 | 第42-43页 |
| ·结果与分析 | 第43-51页 |
| ·十字花科BcMF20同源基因序列的特征 | 第43-48页 |
| ·十字花科BcMF20同源基因核苷酸序列相似性 | 第48-49页 |
| ·BcMF20同源基因的进化关系 | 第49-51页 |
| ·12个BcMF20近缘基因的相似性与进化关系 | 第51页 |
| ·讨论 | 第51-54页 |
| ·BcMF20基因在十字花科植物中的保守性 | 第51-53页 |
| ·3锌指蛋白来源于4锌指蛋白 | 第53-54页 |
| 4 BcMF20在'Bcajh97-01A/B'可育株中的表达分析 | 第54-59页 |
| ·材料与方法 | 第54-56页 |
| ·实验材料 | 第54页 |
| ·实验方法 | 第54-56页 |
| ·半定量PCR | 第54页 |
| ·实时定量荧光PCR | 第54-55页 |
| ·原位杂交 | 第55-56页 |
| ·结果与分析 | 第56-58页 |
| ·BcMF20在不同器官以及花蕾的不同的发育阶段有不同的表达特点 | 第56-57页 |
| ·BcMF20在发育的绒毡层及花粉中表达 | 第57-58页 |
| ·讨论 | 第58-59页 |
| 5 转基因研究 | 第59-71页 |
| ·材料与方法 | 第59-63页 |
| ·反义表达载体的构建 | 第59-61页 |
| ·反义基因片段的分离 | 第59-60页 |
| ·反义基因片段的分离 | 第60页 |
| ·质粒直接转化农杆菌 | 第60-61页 |
| ·反义载体对拟南芥的转化 | 第61-62页 |
| ·拟南芥的培养 | 第61页 |
| ·Floral Dip法转化植株 | 第61页 |
| ·拟南芥转化苗的抗生素筛选 | 第61-62页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第62-63页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第62页 |
| ·转基因植株的Southern检测 | 第62-63页 |
| ·转基因植株的形态与细胞学观察 | 第63页 |
| ·转基因植株的形态观察 | 第63页 |
| ·花粉发育透射电镜和花粉形态扫描电镜观察 | 第63页 |
| ·转基因植株的花粉萌发试验 | 第63页 |
| ·结果与分析 | 第63-69页 |
| ·反义表达载体的构建及对农杆菌的转化 | 第63-65页 |
| ·反义片段的获得 | 第64页 |
| ·CaMV35S组成型启动子表达载体的成功构建 | 第64-65页 |
| ·质粒成功转入农杆菌 | 第65页 |
| ·抗性转基因植株的获得 | 第65-66页 |
| ·转基因植株的分子检测 | 第66页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第66页 |
| ·转基因植株的Southern检测 | 第66页 |
| ·转基因植株的形态与细胞学观察 | 第66-69页 |
| ·转基因植株不能形成正常果荚 | 第66-67页 |
| ·转基因植株的花粉萌发率低 | 第67页 |
| ·转基因植株药室中花粉数量变少且花粉畸形 | 第67-69页 |
| ·转基因植株花粉异常空瘪 | 第69页 |
| ·讨论 | 第69-71页 |
| ·BcMF20与BcMF4转基因植株花粉形态相似 | 第69页 |
| ·BcMF20可能是绒毡层发育中减数分裂后期TAZ1与MS1调控机制中的一个组件 | 第69-71页 |
| 结论 | 第71-72页 |
| 参考文献 | 第72-80页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第80页 |
