| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 前言 | 第9-19页 |
| 1 文献综述 | 第9-17页 |
| ·白藜芦醇 | 第9-15页 |
| ·植物启动子 | 第15-17页 |
| 2 本研究的意义和目的 | 第17-18页 |
| 3 本研究的技术路线 | 第18-19页 |
| 第一章 基因克隆 | 第19-35页 |
| 1 实验材料 | 第19页 |
| ·植物材料 | 第19页 |
| ·培养基 | 第19页 |
| ·菌种 | 第19页 |
| ·分子生物学与生物化学试剂 | 第19页 |
| ·主要仪器 | 第19页 |
| ·试验用具与耗材 | 第19页 |
| 2 试验方法 | 第19-24页 |
| ·DNA 的提取 | 第19-20页 |
| ·RNA 的提取 | 第20页 |
| ·RNA 纯化 | 第20页 |
| ·cDNA 第一链的合成 | 第20-21页 |
| ·七种植物RS 基因片段的DNA 克隆 | 第21-23页 |
| ·川鄂爬山虎RS 基因cDNA 保守区的扩增 | 第23-24页 |
| ·草莓果实特异性启动子RJ39 的基因组扩增 | 第24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-34页 |
| ·七种植物RS 基因片段的DNA 克隆及序列分析 | 第24-26页 |
| ·川鄂爬山虎 RS 基因 cDNA 保守区的克隆与序列分析 | 第26-30页 |
| ·草莓果实特异性启动子RJ39 的克隆和序列分析 | 第30-34页 |
| 4 讨论 | 第34-35页 |
| 第二章 植物表达载体的构建 | 第35-44页 |
| 1 实验材料 | 第35页 |
| ·酶和试剂 | 第35页 |
| ·试剂盒 | 第35页 |
| ·菌种与表达载体 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35页 |
| 2 试验方法 | 第35-37页 |
| ·碱裂解法小量制备质粒DNA | 第35-36页 |
| ·质粒的限制性内切酶酶切反应 | 第36页 |
| ·DNA 片断连接反应体系 | 第36-37页 |
| ·连接产物的转化 | 第37页 |
| ·重组质粒的检测 | 第37页 |
| 3 结果与分析 | 第37-42页 |
| ·pCAMBIA3300-RJ39-RS-Tnos 表达载体的构建 | 第37-40页 |
| ·阳性菌落的PCR 检测 | 第40-42页 |
| ·酶切鉴定 | 第42页 |
| 4 讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 农杆菌介导的草莓遗传转化研究 | 第44-54页 |
| 1 实验材料 | 第44-45页 |
| ·植物材料 | 第44页 |
| ·培养基 | 第44页 |
| ·菌种及表达载体 | 第44-45页 |
| ·酶和试剂 | 第45页 |
| ·主要仪器 | 第45页 |
| ·试验用具与耗材 | 第45页 |
| 2 试验方法 | 第45-49页 |
| ·农杆菌LBA4404 感受态细胞的制备及转化 | 第45-46页 |
| ·ppt 筛选浓度的确定 | 第46页 |
| ·农杆菌转化叶盘 | 第46页 |
| ·转化芽的筛选、增殖及生根 | 第46页 |
| ·转基因植株的鉴定 | 第46-47页 |
| ·试管苗的移栽 | 第47页 |
| ·外源基因RS Southern 印记杂交鉴定 | 第47-49页 |
| 3 结果与分析 | 第49-53页 |
| ·表达载体 pCAMBIA3300-RJ39-RS-T 转化农杆菌 | 第49-50页 |
| ·ppt 筛选浓度的确定 | 第50-51页 |
| ·草莓叶盘重组载体pCAMBIA3300-RJ39-RS -Tnos 农杆菌转化与鉴定 | 第51-52页 |
| ·Southern 印记杂交鉴定 | 第52-53页 |
| 4 讨论 | 第53-54页 |
| ·农杆菌侵染时间长短对遗传转化的影响 | 第53页 |
| ·农杆菌对外植体的毒害作用 | 第53页 |
| ·选择方式对草莓转化效率的影响 | 第53页 |
| ·PCR 检测 | 第53-54页 |
| 第四章 结论与展望 | 第54-55页 |
| 1 结论 | 第54页 |
| 2 展望 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-62页 |
| 附录1: 主要缩略词表 | 第62-63页 |
| 附录2: 常用溶液 | 第63-65页 |
| 附录3: 七种植物的RS 基因短片段 | 第65-69页 |
| 附录4: ppt 浓度的确定 | 第69-70页 |
| 附录5: 农杆菌叶盘转化草莓 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
