| Abstract | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-11页 |
| Chapter I | 第11-47页 |
| ·General Introduction | 第11页 |
| ·Genetics and Cancer | 第11-14页 |
| ·Hall marks of cancer | 第14页 |
| ·Epigenetic and cancer | 第14-20页 |
| ·DNA methylation in cancer | 第17-18页 |
| ·Hypomethylation | 第17-18页 |
| ·Hypermethylation | 第18页 |
| ·Histone modifications | 第18-19页 |
| ·Small interference RNA | 第19-20页 |
| ·Cell cycle, apoptosis and cancer | 第20-22页 |
| ·Gastric cancer | 第22-23页 |
| ·Tumor suppressor gene of PTEN | 第23-25页 |
| ·SMAD proteins | 第25-28页 |
| ·Transforming growth factor beta | 第28-30页 |
| ·RAS oncogene | 第30-33页 |
| References | 第33-47页 |
| Chapter II | 第47-83页 |
| ·General literature review | 第47页 |
| ·Phosphatase and tensin homolog (PTEN) | 第47-52页 |
| ·PTEN mutations and cancer | 第48-51页 |
| ·Gastric cancer and PTEN | 第51-52页 |
| ·Transforming Growth Factor beta TGF-β | 第52-58页 |
| ·TGF-βand cancer | 第54-58页 |
| ·SMAD proteins | 第58-64页 |
| ·SMAD proteins and cancer | 第58-64页 |
| ·R-SMADs and cancer | 第58-61页 |
| ·Co-SMAD (SMAD-4) and cancer | 第61-64页 |
| ·RAS oncogene | 第64-68页 |
| ·RAS oncogene and cancer | 第64-66页 |
| ·RAS oncogene and gastric cancer | 第66-68页 |
| ·Literature review in summary and gastric cancer | 第68-70页 |
| ·Goal of the study | 第70-71页 |
| References | 第71-83页 |
| Chapter III | 第83-89页 |
| ·Materials and Methods | 第83页 |
| ·Materials and equipments | 第83页 |
| ·Reagents | 第83-84页 |
| ·Cell culture | 第84页 |
| ·Plasmids | 第84页 |
| ·Transient transfection of the Cells | 第84页 |
| ·Luciferase assay | 第84-85页 |
| ·Chromatin Immunoprecipitation (ChIP) | 第85页 |
| ·Total RNA Isolation and RT-PCR | 第85-86页 |
| ·Nuclear-cytoplasmic fractions and Western blotting | 第86-87页 |
| ·Cell apoptosis and flow Cytometry | 第87页 |
| ·Data analysis | 第87-88页 |
| References | 第88-89页 |
| Chapter IV | 第89-101页 |
| ·Results and Discussion | 第89页 |
| ·PTEN promoter activity and luciferase assay | 第89-90页 |
| ·TGF-βsignaling time and PTEN response | 第90页 |
| ·SMAD-4 and TGF-β upregulation for the expression of PTEN in 293T cells | 第90-91页 |
| ·Influence of absence of SMAD-4 in 293T cell via SiRNA | 第91-92页 |
| ·Chromatin Immuno Precipitation （ChIP）for PTEN promoter | 第92-93页 |
| ·SMAD-4 behavior in malignant gastric carcinoma MGC-803 over PTEN expression | 第93-94页 |
| ·Active RAS/ERK pathway alters SMAD-4 function in MGC-803 | 第94-97页 |
| ·Cell cycle and flow cytometry | 第97-99页 |
| ·Conclusion | 第99-100页 |
| References | 第100-101页 |
| Appendices (protocols) | 第101-119页 |
| ·Transfection protocols | 第101-104页 |
| ·Calcium chloride transfection protocol | 第101-102页 |
| ·Lipofectamine transfection protocol | 第102-104页 |
| ·Luciferase reporter assay protocol | 第104-105页 |
| ·Protocol for Preparing Cell Lysates | 第104页 |
| ·Protocol for luciferase assay | 第104-105页 |
| ·RT-PCR | 第105-107页 |
| ·RNA preparation | 第105页 |
| ·RT reaction | 第105-106页 |
| ·PCR reaction | 第106-107页 |
| ·Western Blot | 第107-111页 |
| ·Harvesting cells | 第107-108页 |
| ·SDS PAGE (Volume for 1 mm BioRad MiniProtean gel) | 第108页 |
| ·Electrotransfer (using Ellard Instruments HEB 2020 semi-dry blotter) | 第108-111页 |
| ·Cross-linking chromatin immunoprecipitation | 第111-116页 |
| ·Cross-linking and Cell Harvesting | 第111-112页 |
| ·Sonication | 第112-113页 |
| ·Determination of DNA concentration | 第113页 |
| ·Immunoprecipitation | 第113-114页 |
| ·Elution and reverse cross-links | 第114-116页 |
| ·Collection the single clone bacteria and the plasmid extraction | 第116-119页 |
| ·DNA plasmid mini preparation protocol | 第116-117页 |
| ·DNA plasmid maxi preparation protocol | 第117-119页 |
| Acknowledgement | 第119-121页 |
| Publications | 第121页 |
| SCI publications | 第121页 |
| Non-SCI publications | 第121页 |
