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盐穗木液泡膜Na~+/H~+反向运输载体基因的克隆和功能分析

摘要第1-5页
Abstract第5-9页
第一部分 文献综述第9-33页
 第一章 盐生植物耐盐机理的研究进展第9-26页
  1 盐生植物对盐渍环境的生长适应第9页
  2 盐生植物应对盐渍环境的渗透调节第9-12页
  3 盐渍环境下盐生植物对单价离子的摄入和运输第12-15页
   ·Na+的摄入第12-14页
   ·K+的摄入及积累第14-15页
   ·Cl-的摄入及积累第15页
  4 植物液泡膜Na+/H+反向运输载体蛋白研究进展第15-17页
   ·液泡膜Na+/H+反向运输载体蛋白的结构第15-16页
   ·液泡膜Na+/H+反向运输载体蛋白在植物耐盐中的分子机理第16-17页
  5 结论与展望第17-18页
  参考文献第18-26页
 第二章 植物基因表达转录分析中内参基因的研究进展第26-33页
  1 目前常用的内参对照基因第26-27页
   ·肌动蛋白基因(actin)第26页
   ·甘油醛-3-磷酸脱氢酶基因(G3PDH/GAPDH)第26-27页
   ·核糖体亚单位第27页
   ·肽链延伸因子(ef1α)基因第27页
  2 植物基因表达研究中内参基因的选择标准第27-29页
   ·选作内参的管家基因其本身的表达水平应具有良好的稳定性第28页
   ·所选内参基因的表达在给定实验设计中是恒定的第28-29页
   ·内参基因和目标基因的表达水平应当相近第29页
  3 内参基因的确定要根据具体实验条件进行验证第29-30页
  4 结语第30页
  参考文献第30-33页
第二部分 实验部分第33-67页
 第一章 盐穗木液泡膜Na+/H+反向运输载体基因(HcNHX1)的克隆和表达分析第33-47页
  1 材料及主要试剂第33-35页
   ·植物材料培养与处理第33页
   ·酶和试剂第33-34页
   ·实验引物第34-35页
  2 实验方法第35-38页
   ·盐穗木总RNA 的提取第35-36页
   ·盐穗木NHX 基因核心片段的获得第36页
   ·3’RACE 获得盐穗木NHX 基因3’端序列第36-37页
   ·盐穗木NHX 基因(HcNHX1) 开放阅读框的获得第37页
   ·盐穗木NHX 基因(HcNHX1)的生物信息学分析第37页
   ·盐胁迫及ABA 处理下盐穗木NHX 基因(HcNHX1)表达规律的分析第37-38页
  3 结果第38-43页
   ·盐穗木NHX 基因(HcNHX1)开放阅读框(ORF)的克隆第38页
   ·HcNHX1 基因氨基酸序列的生物信息学分析第38-42页
   ·盐胁迫下HcNHX1 基因的表达分析第42-43页
   ·ABA 处理下HcNHX1 基因的表达分析第43页
  4 讨论第43-44页
  参考文献第44-47页
 第二章 过表达盐穗木液泡膜 Na+第47-67页
  1 材料及主要试剂第47-49页
   ·植物材料第47页
   ·菌株和质粒第47页
   ·主要试剂第47-48页
   ·Northern 杂交有关试剂第48页
   ·培养基第48-49页
  2 实验方法第49-57页
   ·植物表达载体pCAMBIA1301-HcNHX1 的构建第49页
   ·根癌农杆菌的转化第49-50页
   ·目的基因转化拟南芥第50-51页
   ·转化植株的的PCR 鉴定第51-52页
   ·转化植株的的RT-PCR 分析第52-53页
   ·转化植株的Northern blot 检测第53-56页
   ·盐胁迫下转基因植株耐盐性分析和组织离子含量的测定第56-57页
  3 结果第57-63页
   ·植物表达载体的构建及转化根癌农杆菌及PCR 验证第57-58页
   ·潮霉素抗性苗的筛选及转化子的遗传分析第58-59页
   ·转化植株的分子鉴定第59-60页
   ·盐胁迫下转基因植株的耐盐性分析及组织离子含量的测定第60-63页
  4 讨论第63-64页
  参考文献第64-67页
第三部分 结论与展望第67-68页
 结论第67页
 展望第67-68页
致谢第68-69页
个人简历第69页

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