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番木瓜果实成熟过程中差异表达基因的鉴定

摘要第1-6页
Abstract第6-8页
目录第8-11页
第一章 前言第11-27页
   ·番木瓜概述第11-14页
     ·植物学特性及生物学特性第11-12页
     ·番木瓜果实的营养及药用价值第12页
     ·世界番木瓜生产及分析第12-13页
     ·我国番木瓜发展现状及前景第13-14页
   ·实时荧光定量PCR介绍第14-17页
     ·利用SYBR Green Ⅰ荧光染料进行定量检测第14-15页
     ·实时荧光定量PCR的定量方法第15-16页
     ·实时定量PCR分析相对基因表达差异的不同方法第16-17页
   ·果实成熟的生理学与分子生物学研究第17-23页
     ·乙烯与果实成熟第17-18页
     ·ABA与果实成熟第18-19页
     ·细胞壁水解酶与果实成熟第19页
     ·Expansin与果实成熟第19页
     ·脂氧合酶与果实成熟第19-20页
     ·乙烯生物合成途径第20-21页
     ·乙烯调控果实成熟的分子生物学机制第21-23页
       ·植物信息传递第21页
       ·乙烯影响果实成熟的分子机制第21-22页
       ·乙烯信号转导途径第22-23页
       ·乙烯调节果实成熟相关基因的表达第23页
   ·番木瓜果实采后生理学及分子生物学研究第23-25页
     ·番木瓜果实采后生理学的研究第24-25页
       ·果实成熟过程颜色的变化第24页
       ·碳水化合物的变化第24页
       ·果实成熟软化相关酶的变化第24页
       ·果实采后呼吸及乙烯变化第24-25页
   ·本研究的目的和意义第25-26页
   ·技术路线第26-27页
第二章 与番木瓜成熟相关的八个候选基因表达的荧光定量分析第27-42页
   ·材料第27-29页
     ·植物材料第27页
     ·试剂和主要仪器第27-28页
     ·引物第28页
     ·与番木瓜果实才后成熟前后的差异表达的EST的选择第28-29页
   ·方法第29-32页
     ·总RNA的提取第29-30页
     ·反转录第30页
     ·实时荧光定量PCR(qPCR)第30-31页
       ·预备试验第30-31页
       ·看家基因和目的基因标准曲线制作第31页
       ·番木瓜glu、cy、1671、1678、1691、1689、1711和1729时空表达qPCR实验第31页
     ·重复性实验与数据处理第31-32页
   ·结果与分析第32-42页
     ·总RNA提取第32-33页
     ·预备实验的分析第33页
     ·看家基因和目的基因标准曲线制作第33-36页
     ·glu、cy、1671、1678、1691、1689、1711和1729基因时空表达的荧光定量PCR分析第36-42页
第三章 1729、1678、1671和1689全长基因的克隆和生物信息学分析第42-65页
   ·材料第42页
     ·植物材料第42页
     ·菌株和质粒第42页
     ·酶与试剂盒第42页
   ·方法第42-45页
     ·总RNA提取第42页
     ·反转录第42-43页
     ·引物设计第43页
     ·PCR扩增程序第43-44页
     ·1729、1678、1671、1689基因的电子克隆第44页
     ·PCR产物回收第44页
     ·PCR回收片段与pMD18-T载体连接第44页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法)第44-45页
     ·重组质粒转化感受态细胞第45页
     ·序列测定和分析第45页
   ·结果与分析第45-65页
     ·番木瓜果实总RNA的提取第45-46页
     ·番木瓜1729(L-苏氨酸醛缩酶)基因全长序列的获得第46-48页
     ·番木瓜1729(L-苏氨酸醛缩酶)基因的结构分析第48-50页
     ·番木瓜1678(胞苷尿甘激酶)基因全长序列的获得第50-52页
     ·番木瓜1678(胞苷尿甘激酶)基因的结构分析第52-55页
     ·番木瓜1671(匹林蛋白)基因全长序列的获得第55-56页
     ·番木瓜1671(匹林蛋白)基因的结构分析第56-59页
     ·番木瓜1689(耐重金属蛋白)基因全长序列的获得第59-60页
     ·番木瓜1689(耐重金属蛋白)基因的结构分析第60-65页
讨论与结论第65-71页
   ·讨论第65-69页
     ·番木瓜基因表达研究的样品采集和番木瓜总RNA的提取第65-66页
       ·番木瓜基因表达研究的样品采集第65页
       ·番木瓜总RNA的提取第65-66页
     ·克隆番木瓜1722 1678、1671和1689基因的策略及方法第66页
     ·glu、cy、1671、1678、1691、1689、1711和1729基因在番木瓜成熟过程中存在差异表达第66-69页
   ·结论第69-71页
参考文献第71-75页
缩写词(Abbreviation)第75-76页
致谢第76页

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