摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
目录 | 第8-11页 |
第一章 前言 | 第11-27页 |
·番木瓜概述 | 第11-14页 |
·植物学特性及生物学特性 | 第11-12页 |
·番木瓜果实的营养及药用价值 | 第12页 |
·世界番木瓜生产及分析 | 第12-13页 |
·我国番木瓜发展现状及前景 | 第13-14页 |
·实时荧光定量PCR介绍 | 第14-17页 |
·利用SYBR Green Ⅰ荧光染料进行定量检测 | 第14-15页 |
·实时荧光定量PCR的定量方法 | 第15-16页 |
·实时定量PCR分析相对基因表达差异的不同方法 | 第16-17页 |
·果实成熟的生理学与分子生物学研究 | 第17-23页 |
·乙烯与果实成熟 | 第17-18页 |
·ABA与果实成熟 | 第18-19页 |
·细胞壁水解酶与果实成熟 | 第19页 |
·Expansin与果实成熟 | 第19页 |
·脂氧合酶与果实成熟 | 第19-20页 |
·乙烯生物合成途径 | 第20-21页 |
·乙烯调控果实成熟的分子生物学机制 | 第21-23页 |
·植物信息传递 | 第21页 |
·乙烯影响果实成熟的分子机制 | 第21-22页 |
·乙烯信号转导途径 | 第22-23页 |
·乙烯调节果实成熟相关基因的表达 | 第23页 |
·番木瓜果实采后生理学及分子生物学研究 | 第23-25页 |
·番木瓜果实采后生理学的研究 | 第24-25页 |
·果实成熟过程颜色的变化 | 第24页 |
·碳水化合物的变化 | 第24页 |
·果实成熟软化相关酶的变化 | 第24页 |
·果实采后呼吸及乙烯变化 | 第24-25页 |
·本研究的目的和意义 | 第25-26页 |
·技术路线 | 第26-27页 |
第二章 与番木瓜成熟相关的八个候选基因表达的荧光定量分析 | 第27-42页 |
·材料 | 第27-29页 |
·植物材料 | 第27页 |
·试剂和主要仪器 | 第27-28页 |
·引物 | 第28页 |
·与番木瓜果实才后成熟前后的差异表达的EST的选择 | 第28-29页 |
·方法 | 第29-32页 |
·总RNA的提取 | 第29-30页 |
·反转录 | 第30页 |
·实时荧光定量PCR(qPCR) | 第30-31页 |
·预备试验 | 第30-31页 |
·看家基因和目的基因标准曲线制作 | 第31页 |
·番木瓜glu、cy、1671、1678、1691、1689、1711和1729时空表达qPCR实验 | 第31页 |
·重复性实验与数据处理 | 第31-32页 |
·结果与分析 | 第32-42页 |
·总RNA提取 | 第32-33页 |
·预备实验的分析 | 第33页 |
·看家基因和目的基因标准曲线制作 | 第33-36页 |
·glu、cy、1671、1678、1691、1689、1711和1729基因时空表达的荧光定量PCR分析 | 第36-42页 |
第三章 1729、1678、1671和1689全长基因的克隆和生物信息学分析 | 第42-65页 |
·材料 | 第42页 |
·植物材料 | 第42页 |
·菌株和质粒 | 第42页 |
·酶与试剂盒 | 第42页 |
·方法 | 第42-45页 |
·总RNA提取 | 第42页 |
·反转录 | 第42-43页 |
·引物设计 | 第43页 |
·PCR扩增程序 | 第43-44页 |
·1729、1678、1671、1689基因的电子克隆 | 第44页 |
·PCR产物回收 | 第44页 |
·PCR回收片段与pMD18-T载体连接 | 第44页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备(氯化钙法) | 第44-45页 |
·重组质粒转化感受态细胞 | 第45页 |
·序列测定和分析 | 第45页 |
·结果与分析 | 第45-65页 |
·番木瓜果实总RNA的提取 | 第45-46页 |
·番木瓜1729(L-苏氨酸醛缩酶)基因全长序列的获得 | 第46-48页 |
·番木瓜1729(L-苏氨酸醛缩酶)基因的结构分析 | 第48-50页 |
·番木瓜1678(胞苷尿甘激酶)基因全长序列的获得 | 第50-52页 |
·番木瓜1678(胞苷尿甘激酶)基因的结构分析 | 第52-55页 |
·番木瓜1671(匹林蛋白)基因全长序列的获得 | 第55-56页 |
·番木瓜1671(匹林蛋白)基因的结构分析 | 第56-59页 |
·番木瓜1689(耐重金属蛋白)基因全长序列的获得 | 第59-60页 |
·番木瓜1689(耐重金属蛋白)基因的结构分析 | 第60-65页 |
讨论与结论 | 第65-71页 |
·讨论 | 第65-69页 |
·番木瓜基因表达研究的样品采集和番木瓜总RNA的提取 | 第65-66页 |
·番木瓜基因表达研究的样品采集 | 第65页 |
·番木瓜总RNA的提取 | 第65-66页 |
·克隆番木瓜1722 1678、1671和1689基因的策略及方法 | 第66页 |
·glu、cy、1671、1678、1691、1689、1711和1729基因在番木瓜成熟过程中存在差异表达 | 第66-69页 |
·结论 | 第69-71页 |
参考文献 | 第71-75页 |
缩写词(Abbreviation) | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |