摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略词表 | 第8-9页 |
1 前言 | 第9-16页 |
·课题的提出 | 第9-10页 |
·前人研究及进展 | 第10-15页 |
·果树芽变及色泽突变体研究 | 第10-12页 |
·果树芽变和机理研究概况 | 第10-11页 |
·柑橘色泽突变体的研究 | 第11-12页 |
·植物中类胡萝卜素代谢基因工程研究 | 第12-14页 |
·脂类相关质体蛋白的研究 | 第14-15页 |
·脂类相关质体蛋白家族 | 第14页 |
·PAP及其同源基因的研究 | 第14-15页 |
·CitPAP的研究 | 第15页 |
·本研究的目的及内容 | 第15-16页 |
2 材料和方法 | 第16-27页 |
·实验材料 | 第16页 |
·实验方法 | 第16-27页 |
·CsPAP基因的克隆和序列分析 | 第16-18页 |
·扩增全长cDNA的引物序列与PCR程序 | 第16-17页 |
·PCR扩增产物的克隆与测序 | 第17-18页 |
·生物信息学分析 | 第18页 |
·原核表达载体与真核超量表达载体的构建 | 第18-20页 |
·大肠杆菌质粒提取 | 第19页 |
·质粒的双酶切与连接重组 | 第19-20页 |
·pET-CsPAP表达产物SDS-PAGE检测 | 第20页 |
·植物超量表达载体PMV-CsPAP的构建 | 第20-21页 |
·外植体的准备 | 第21-22页 |
·农杆菌介导的CsPAP基因转化柑橘与番茄 | 第22-24页 |
·转化抗性材料的分子检测 | 第24-26页 |
·抗性愈伤组织和转化再生番茄叶片DNA提取及PCR检测 | 第24-25页 |
·转化再生抗性柑橘愈伤RNA提取和单链cDNA的合成 | 第25-26页 |
·Real-time PCR检测CsPAP基因的表达 | 第26页 |
·ABA和几种逆境条件处理伏令夏橙愈伤组织 | 第26-27页 |
3 结果 | 第27-35页 |
·CsPAP基因的克隆与序列分析 | 第27-28页 |
·CsPAP原核载体的构建与产物SDS-PAGE检测 | 第28-29页 |
·CsPAP真核超量表达载体的构建 | 第29-30页 |
·农杆菌介导柑橘愈伤组织与上胚轴以及番茄的转化 | 第30-31页 |
·转基因柑橘愈伤组织和番茄植株的检测 | 第31-33页 |
·抗性材料总DNA转基因PCR检测 | 第31-33页 |
·抗性愈伤Real-time PCR检测CsPAP的表达 | 第33页 |
·CsPAP在ABA处理和几种逆境条件下的表达 | 第33-35页 |
4 讨论 | 第35-37页 |
·CsPAP蛋白与柑橘累积类胡萝卜素的关系 | 第35-36页 |
·CsPAP基因在其它植物中的超量表达 | 第36页 |
·基于本课题的后续研究 | 第36-37页 |
参考文献 | 第37-43页 |
附录Ⅰ CsPAP基因的cDNA编码区核苷酸序列 | 第43-44页 |
附录Ⅱ 硕士阶段参与发表的论文和专著 | 第44-45页 |
致谢 | 第45页 |