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红暗柳橙脂类相关质体蛋白基因的克隆与功能初步分析

摘要第1-7页
Abstract第7-8页
缩略词表第8-9页
1 前言第9-16页
   ·课题的提出第9-10页
   ·前人研究及进展第10-15页
     ·果树芽变及色泽突变体研究第10-12页
       ·果树芽变和机理研究概况第10-11页
       ·柑橘色泽突变体的研究第11-12页
     ·植物中类胡萝卜素代谢基因工程研究第12-14页
     ·脂类相关质体蛋白的研究第14-15页
       ·脂类相关质体蛋白家族第14页
       ·PAP及其同源基因的研究第14-15页
       ·CitPAP的研究第15页
   ·本研究的目的及内容第15-16页
2 材料和方法第16-27页
   ·实验材料第16页
   ·实验方法第16-27页
     ·CsPAP基因的克隆和序列分析第16-18页
       ·扩增全长cDNA的引物序列与PCR程序第16-17页
       ·PCR扩增产物的克隆与测序第17-18页
       ·生物信息学分析第18页
     ·原核表达载体与真核超量表达载体的构建第18-20页
       ·大肠杆菌质粒提取第19页
       ·质粒的双酶切与连接重组第19-20页
     ·pET-CsPAP表达产物SDS-PAGE检测第20页
     ·植物超量表达载体PMV-CsPAP的构建第20-21页
     ·外植体的准备第21-22页
     ·农杆菌介导的CsPAP基因转化柑橘与番茄第22-24页
     ·转化抗性材料的分子检测第24-26页
       ·抗性愈伤组织和转化再生番茄叶片DNA提取及PCR检测第24-25页
       ·转化再生抗性柑橘愈伤RNA提取和单链cDNA的合成第25-26页
       ·Real-time PCR检测CsPAP基因的表达第26页
     ·ABA和几种逆境条件处理伏令夏橙愈伤组织第26-27页
3 结果第27-35页
   ·CsPAP基因的克隆与序列分析第27-28页
   ·CsPAP原核载体的构建与产物SDS-PAGE检测第28-29页
   ·CsPAP真核超量表达载体的构建第29-30页
   ·农杆菌介导柑橘愈伤组织与上胚轴以及番茄的转化第30-31页
   ·转基因柑橘愈伤组织和番茄植株的检测第31-33页
     ·抗性材料总DNA转基因PCR检测第31-33页
     ·抗性愈伤Real-time PCR检测CsPAP的表达第33页
   ·CsPAP在ABA处理和几种逆境条件下的表达第33-35页
4 讨论第35-37页
   ·CsPAP蛋白与柑橘累积类胡萝卜素的关系第35-36页
   ·CsPAP基因在其它植物中的超量表达第36页
   ·基于本课题的后续研究第36-37页
参考文献第37-43页
附录Ⅰ CsPAP基因的cDNA编码区核苷酸序列第43-44页
附录Ⅱ 硕士阶段参与发表的论文和专著第44-45页
致谢第45页

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