| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩写表 | 第10-12页 |
| 第一章:文献综述 | 第12-48页 |
| 第一节:ABA生物合成及代谢失活 | 第12-23页 |
| 1. ABA的生物合成过程 | 第12-13页 |
| ·ABA的合成部位 | 第12页 |
| ·ABA的合成途径 | 第12-13页 |
| ·参与ABA合成的关键酶 | 第13页 |
| 2. ABA生物合成的调节 | 第13-14页 |
| ·ABA生物合成的发育调节 | 第13-14页 |
| ·ABA合成的非生物胁迫调节 | 第14页 |
| ·ABA合成的自我调节 | 第14页 |
| 3. ABA代谢失活 | 第14-23页 |
| ·ABA的氧化失活途径 | 第15-18页 |
| ·8 ’-羟基化代谢途径 | 第15-18页 |
| ·9 ’-羟基化代谢途径和7’-羟基化代谢途径 | 第18页 |
| ·ABA的结合失活途径 | 第18-20页 |
| ·结合态ABA的存在形式 | 第19页 |
| ·ABA特异的糖基转移酶(UGT)催化结合态ABA的形成 | 第19-20页 |
| ·ABA-GE水解释放游离ABA初步研究 | 第20-23页 |
| 第二节:植物干旱应答反应及与ABA的关系 | 第23-37页 |
| 1. 干旱胁迫对植物的伤害 | 第23-25页 |
| ·植物生长受到抑制 | 第23页 |
| ·对光合作用的伤害 | 第23-24页 |
| ·活性氧对植物的氧化伤害 | 第24页 |
| ·物质代谢失调 | 第24页 |
| ·呼吸异常 | 第24页 |
| ·氮代谢紊乱 | 第24-25页 |
| ·能量代谢失调 | 第25页 |
| ·营养失调 | 第25页 |
| 2. 干旱信号的感受及传递 | 第25-28页 |
| ·植物对干旱信号的感知 | 第25-27页 |
| ·干旱信号的细胞内转导 | 第27-28页 |
| 3. 植物抗旱机制研究进展 | 第28-36页 |
| ·功能基因与植物抗旱性 | 第28-35页 |
| ·渗透调节物质与植物抗旱性 | 第29-31页 |
| ·转录因子与植物抗旱性 | 第31-35页 |
| ·干旱诱导基因的转录组分析 | 第35-36页 |
| 4. 结语 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-48页 |
| 第二章:研究的立题依据及意义 | 第48-49页 |
| 第三章:研究报告 | 第49-103页 |
| 第一节:bglu10功能获得性突变体筛选及基因克隆 | 第49-53页 |
| 1. 前言 | 第49-50页 |
| 2. bglu10突变体筛选及基因克隆 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-53页 |
| 第二节:bglu10突变体鉴定及组织表达分析和蛋白亚细胞定位 | 第53-76页 |
| 1. 前言 | 第53-54页 |
| 2. 材料与方法 | 第54-65页 |
| ·实验材料 | 第54-56页 |
| ·植物材料 | 第54页 |
| ·菌种和载体 | 第54页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第54页 |
| ·DNA测序及引物合成 | 第54页 |
| ·主要仪器 | 第54-55页 |
| ·PCR引物 | 第55页 |
| ·常用培养基 | 第55-56页 |
| ·实验方法 | 第56-65页 |
| ·小量基因组DNA提取方法 | 第56-57页 |
| ·质粒DNA的提取(碱裂解法) | 第57页 |
| ·PCR产物的回收和纯化 | 第57-58页 |
| ·PCR鉴定突变体纯合植株 | 第58页 |
| ·总RNA提取(Trizol法) | 第58-59页 |
| ·RT-PCR检测基因表达 | 第59页 |
| ·重组质粒构建 | 第59-62页 |
| ·重组质粒对E.coli感受态细胞的转化 | 第62-63页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第63页 |
| ·农杆菌(GV3101)感受态细胞的制备及转化 | 第63页 |
| ·农杆菌侵染拟南芥 | 第63-64页 |
| ·PEG介导的拟南芥叶肉细胞原生质体瞬时表达 | 第64-65页 |
| ·共聚焦显微镜观察GFP与RFP荧光共定位 | 第65页 |
| ·β-葡糖苷酸酶(GUS)的组织化学染色 | 第65页 |
| 3. 结果与分析 | 第65-72页 |
| ·拟南芥bglu10 T-DNA插入突变体筛选与鉴定 | 第65-66页 |
| ·BGLU10组织表达分析 | 第66-68页 |
| ·BGLU10启动子克隆及pBGLU10∷GUS融合载体的构建与鉴定 | 第66-67页 |
| ·BGLU10基因组织表达分析 | 第67-68页 |
| ·BGLU10基因响应多种非生物胁迫表达分析 | 第68页 |
| ·BGLU10亚细胞定位 | 第68-72页 |
| ·总RNA的质量鉴定 | 第68-69页 |
| ·BGLU10∷pHBT-GFP及γ-TIP1∷pHBT-DsRed载体构建 | 第69页 |
| ·BGLU10蛋白亚细胞定位分析 | 第69-71页 |
| ·BGLU10∷1205-GFP载体构建 | 第71-72页 |
| 4. 讨论 | 第72-74页 |
| 参考文献 | 第74-76页 |
| 第三节:BGLU10基因在干旱等胁迫环境下的功能分析 | 第76-103页 |
| 1. 前言 | 第76页 |
| 2. 材料与方法 | 第76-84页 |
| ·材料 | 第76-78页 |
| ·植物材料 | 第76-77页 |
| ·质粒载体和菌株 | 第77页 |
| ·试剂 | 第77页 |
| ·主要仪器 | 第77页 |
| ·引物 | 第77-78页 |
| ·实验方法 | 第78-84页 |
| ·甘露醇、氯化钠、ABA等胁迫下种子萌发后子叶转绿统计 | 第78页 |
| ·表皮条气孔观察与分析 | 第78页 |
| ·叶片失水率的测定 | 第78-79页 |
| ·叶片表面温度测定和红外热图处理 | 第79页 |
| ·ABA含量测定 | 第79-80页 |
| ·拟南芥中总β-葡萄糖苷酶活性测定 | 第80-81页 |
| ·BGLU10蛋白原核表达及活性测定 | 第81-82页 |
| ·BGLU10∷super1300+重组质粒构建 | 第82页 |
| ·ABA或干旱标志性基因的Real-time PCR分析 | 第82-83页 |
| ·BGLU10超表达转基因植物的获得及BGLU10基因表达水平检测 | 第83-84页 |
| 3. 结果与分析 | 第84-98页 |
| ·载体构建及干旱等胁迫表型分析 | 第84-95页 |
| ·bglu10突变体对干旱敏感 | 第84-85页 |
| ·bglu10突变体干旱敏感表型的气孔行为分析 | 第85-86页 |
| ·BGLU10∷super1300+超表达载体构建与鉴定 | 第86-87页 |
| ·BGLU10超表达株系中BGLU10基因表达水平检测 | 第87-88页 |
| ·bglu10及BGLU10基因超表达植物耐旱性比较 | 第88-89页 |
| ·ABA对种子萌发后幼苗生长的影响 | 第89-91页 |
| ·NaCl对种子萌发后幼苗生长的影响 | 第91-92页 |
| ·甘露醇对种子萌发后幼苗生长的影响 | 第92-94页 |
| ·ABA和干旱反应标志性基因表达分析 | 第94-95页 |
| ·β-葡萄糖苷酶活性测定 | 第95-98页 |
| ·拟南芥中总β-葡萄糖苷酶的活性测定 | 第95-97页 |
| ·BGLU10 β-葡萄糖苷酶体外活性测定探索 | 第97-98页 |
| 4. 讨论 | 第98-101页 |
| 参考文献 | 第101-103页 |
| 第四章:结论 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
