摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
英文缩略词 | 第12-14页 |
1 绪论 | 第14-23页 |
1.1 高血压、张应力和血管重建 | 第14-17页 |
1.2 细胞核结构与力学因素 | 第17-18页 |
1.2.1 细胞核结构与力学因素 | 第17页 |
1.2.2 核膜蛋白与细胞功能 | 第17-18页 |
1.3 LaminA/C的研究现状和生物学功能 | 第18-21页 |
1.4 本文研究的主要内容和思路 | 第21-23页 |
2 实验方法 | 第23-33页 |
2.1 细胞实验 | 第23-25页 |
2.2 VSMCs加载周期性张应变 | 第25-27页 |
2.3 ELASA检测凋亡 | 第27-28页 |
2.4 siRNA干扰实验 | 第28页 |
2.5 miRs的Inhibitor和mimics转染实验 | 第28-29页 |
2.6 RNA的提取(TRIzol法) | 第29-30页 |
2.7 反转录 | 第30页 |
2.8 实时定量PCR实验 | 第30页 |
2.9 蛋白质免疫印迹检测 | 第30-32页 |
2.10 统计学分析 | 第32-33页 |
3 实验结果 | 第33-51页 |
3.1 15%高张应变对VSMCs凋亡的影响 | 第33页 |
3.2 15%高张应变抑制VSMCs核骨架蛋白LaminA和LaminC表达 | 第33-35页 |
3.3 网站预测调控LMNA的miR | 第35-37页 |
3.4 双荧光素酶检测miR-124-3p与LMNA3’UTR结合 | 第37-39页 |
3.5 15%高张应变上调miR-124-3p的表达 | 第39-40页 |
3.6 miR-124-3p的inhibitor上调VSMCs中LaminA和LaminC表达含量 | 第40-41页 |
3.7 miR-124-3p的mimics下调VSMCs中LaminA、LaminC表达含量 | 第41-42页 |
3.8 miR-124-3p的inhibitor抑制VSMCs凋亡 | 第42-43页 |
3.9 miR-124-3p的mimics促进VSMCs凋亡 | 第43-44页 |
3.10 siRNA干扰抑制LaminA和LaminC表达水平 | 第44-45页 |
3.11 siRNA干扰LMNA上调VSMCs凋亡 | 第45-46页 |
3.12 下调LaminA和LaminC表达水平调控多种转录因子活性 | 第46-48页 |
3.13 活性变化的转录因子参与细胞凋亡功能的调控 | 第48-51页 |
4 讨论 | 第51-56页 |
4.1 病理性张应变促进VSMCs的凋亡 | 第51-53页 |
4.2 micoRNA对LaminA/C的靶向调控作用 | 第53-54页 |
4.3 检测LaminA/C调控的VSMCs凋亡相关转录因子 | 第54-55页 |
4.4 结论与展望 | 第55-56页 |
全文小结 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-63页 |
附录 实验仪器&实验试剂&实验溶剂 | 第63-67页 |
主要仪器 | 第63-64页 |
实验试剂 | 第64-65页 |
实验溶液 | 第65-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
攻读硕士学位期间已完成和发表的学术论文 | 第68-70页 |