摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第12-30页 |
1.1 长链非编码RNA概述 | 第12-17页 |
1.1.1 lncRNA的发现 | 第12-13页 |
1.1.2 lncRNA的产生、加工成熟机制 | 第13-15页 |
1.1.3 lncRNA的广义功能作用机制 | 第15-16页 |
1.1.4 lncRNA的定位 | 第16页 |
1.1.5 lncRNA的降解方式 | 第16-17页 |
1.2 学习记忆与蛋白质翻译 | 第17-23页 |
1.2.1 学习记忆假说 | 第17-18页 |
1.2.2 蛋白质翻译概述 | 第18-21页 |
1.2.3 蛋白质翻译在学习记忆中作用 | 第21-23页 |
1.3 LncRNA通过调控蛋白质翻译参与学习记忆 | 第23-30页 |
1.3.1 lncRNA与脑功能 | 第23-25页 |
1.3.2 lncRNA在学习记忆障碍中的作用 | 第25页 |
1.3.3 lncRNA在学习记忆中作用 | 第25-27页 |
1.3.4 lncRNA在蛋白质翻译中作用 | 第27-29页 |
1.3.5 lncRNA通过调控蛋白质翻译参与学习记忆 | 第29-30页 |
第二章 实验材料与方法 | 第30-64页 |
2.1 实验材料 | 第30-35页 |
2.1.1 实验所用小鼠品系 | 第30页 |
2.1.2 实验所需细胞系 | 第30页 |
2.1.3 质粒信息 | 第30页 |
2.1.4 实验试剂 | 第30-33页 |
2.1.5 实验耗材 | 第33页 |
2.1.6 实验仪器 | 第33-35页 |
2.2 实验试剂配制 | 第35-41页 |
2.2.1 大肠肝菌培养试剂(LB) | 第35页 |
2.2.2 PBS溶液 | 第35页 |
2.2.3 免疫印迹试验相关溶液 | 第35-36页 |
2.2.4 高尔基染色相关溶液 | 第36-37页 |
2.2.5 RNA分子杂交实验试剂配制 | 第37页 |
2.2.6 Northern blot相关试剂配制 | 第37-38页 |
2.2.7 核仁分离相关试剂配制 | 第38页 |
2.2.8 Nuclear Run On实验相关试剂配制 | 第38-40页 |
2.2.9 Oligo (dT) Pull-Down实验相关试剂配制 | 第40-41页 |
2.3 实验方法 | 第41-64页 |
2.3.1 质粒大量提取实验 | 第41-42页 |
2.3.2 RNA提取 | 第42页 |
2.3.3 PCR产物纯化实验(上海生工) | 第42-43页 |
2.3.4 胶回收实验(上海生工) | 第43页 |
2.3.5 质粒转化实验 | 第43-44页 |
2.3.6 细胞复苏实验 | 第44页 |
2.3.7 细胞冻存实验 | 第44页 |
2.3.8 细胞转染实验 | 第44-45页 |
2.3.9 小鼠初代神经元分离培养实验 | 第45页 |
2.3.10 RNA原位杂交实验和免疫荧光实验 | 第45-46页 |
2.3.11 Northern blot实验 | 第46-47页 |
2.3.12 Western blot实验 | 第47页 |
2.3.13 RNA结合蛋白免疫沉淀实验 | 第47-48页 |
2.3.14 Nuclear Run-On实验 | 第48-49页 |
2.3.15 核仁分离实验 | 第49-50页 |
2.3.16 荧光素酶报告实验 | 第50-51页 |
2.3.17 m7 -GTP/TMG (m2,2,7G)实验 | 第51页 |
2.3.18 Oligo (dT) Pull-Down实验 | 第51-52页 |
2.3.19 蛋白质银染实验 | 第52页 |
2.3.20 生物素标记RNA沉淀实验 | 第52-53页 |
2.3.21 Puromycin标记蛋白实验 | 第53-54页 |
2.3.22 S35标记蛋白实验 | 第54页 |
2.3.23 多聚核糖体分析实验 | 第54-55页 |
2.3.24 染色体免疫沉淀实验 | 第55-56页 |
2.3.25 紫外交联免疫沉淀实验 | 第56页 |
2.3.26 rRNA甲基化水平半定量实验 | 第56-57页 |
2.3.27 AAV病毒纯化实验 | 第57-58页 |
2.3.28 小鼠海马区病毒注射实验 | 第58-59页 |
2.3.29 小鼠水迷宫实验 | 第59-60页 |
2.3.30 小鼠条件性恐惧实验 | 第60页 |
2.3.31 小鼠新物体识别实验 | 第60-61页 |
2.3.32 小鼠脑神经突触纯化实验 | 第61页 |
2.3.33 高尔基染色实验 | 第61-62页 |
2.3.34 统计学显著性差异分析 | 第62-64页 |
第三章 结果与讨论 | 第64-90页 |
3.1 引言 | 第64-65页 |
3.2 实验结果 | 第65-86页 |
3.2.1 鉴定核仁中lncRNA的数目与种类 | 第65-68页 |
3.2.2 LoNA调控rRNA转录与蛋白质翻译 | 第68-72页 |
3.2.3 LoNA通过结合NCL调控rRNA转录 | 第72-76页 |
3.2.4 LoNA通过结合FBL蛋白来调控rRNA甲基化水平 | 第76-80页 |
3.2.5 LoNA调控多聚核糖体的分布以及突触可塑性 | 第80-84页 |
3.2.6 LoNA水平缺失导致学习记忆能力提升 | 第84-86页 |
3.3 小结与讨论 | 第86-90页 |
参考文献 | 第90-100页 |
附录 | 第100-108页 |
致谢 | 第108-110页 |
攻读博士期间主要成果 | 第110页 |