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神经元活性依赖的lncRNA LoNA调控蛋白质翻译的机制研究

摘要第5-7页
abstract第7-8页
第一章 绪论第12-30页
    1.1 长链非编码RNA概述第12-17页
        1.1.1 lncRNA的发现第12-13页
        1.1.2 lncRNA的产生、加工成熟机制第13-15页
        1.1.3 lncRNA的广义功能作用机制第15-16页
        1.1.4 lncRNA的定位第16页
        1.1.5 lncRNA的降解方式第16-17页
    1.2 学习记忆与蛋白质翻译第17-23页
        1.2.1 学习记忆假说第17-18页
        1.2.2 蛋白质翻译概述第18-21页
        1.2.3 蛋白质翻译在学习记忆中作用第21-23页
    1.3 LncRNA通过调控蛋白质翻译参与学习记忆第23-30页
        1.3.1 lncRNA与脑功能第23-25页
        1.3.2 lncRNA在学习记忆障碍中的作用第25页
        1.3.3 lncRNA在学习记忆中作用第25-27页
        1.3.4 lncRNA在蛋白质翻译中作用第27-29页
        1.3.5 lncRNA通过调控蛋白质翻译参与学习记忆第29-30页
第二章 实验材料与方法第30-64页
    2.1 实验材料第30-35页
        2.1.1 实验所用小鼠品系第30页
        2.1.2 实验所需细胞系第30页
        2.1.3 质粒信息第30页
        2.1.4 实验试剂第30-33页
        2.1.5 实验耗材第33页
        2.1.6 实验仪器第33-35页
    2.2 实验试剂配制第35-41页
        2.2.1 大肠肝菌培养试剂(LB)第35页
        2.2.2 PBS溶液第35页
        2.2.3 免疫印迹试验相关溶液第35-36页
        2.2.4 高尔基染色相关溶液第36-37页
        2.2.5 RNA分子杂交实验试剂配制第37页
        2.2.6 Northern blot相关试剂配制第37-38页
        2.2.7 核仁分离相关试剂配制第38页
        2.2.8 Nuclear Run On实验相关试剂配制第38-40页
        2.2.9 Oligo (dT) Pull-Down实验相关试剂配制第40-41页
    2.3 实验方法第41-64页
        2.3.1 质粒大量提取实验第41-42页
        2.3.2 RNA提取第42页
        2.3.3 PCR产物纯化实验(上海生工)第42-43页
        2.3.4 胶回收实验(上海生工)第43页
        2.3.5 质粒转化实验第43-44页
        2.3.6 细胞复苏实验第44页
        2.3.7 细胞冻存实验第44页
        2.3.8 细胞转染实验第44-45页
        2.3.9 小鼠初代神经元分离培养实验第45页
        2.3.10 RNA原位杂交实验和免疫荧光实验第45-46页
        2.3.11 Northern blot实验第46-47页
        2.3.12 Western blot实验第47页
        2.3.13 RNA结合蛋白免疫沉淀实验第47-48页
        2.3.14 Nuclear Run-On实验第48-49页
        2.3.15 核仁分离实验第49-50页
        2.3.16 荧光素酶报告实验第50-51页
        2.3.17 m7 -GTP/TMG (m2,2,7G)实验第51页
        2.3.18 Oligo (dT) Pull-Down实验第51-52页
        2.3.19 蛋白质银染实验第52页
        2.3.20 生物素标记RNA沉淀实验第52-53页
        2.3.21 Puromycin标记蛋白实验第53-54页
        2.3.22 S35标记蛋白实验第54页
        2.3.23 多聚核糖体分析实验第54-55页
        2.3.24 染色体免疫沉淀实验第55-56页
        2.3.25 紫外交联免疫沉淀实验第56页
        2.3.26 rRNA甲基化水平半定量实验第56-57页
        2.3.27 AAV病毒纯化实验第57-58页
        2.3.28 小鼠海马区病毒注射实验第58-59页
        2.3.29 小鼠水迷宫实验第59-60页
        2.3.30 小鼠条件性恐惧实验第60页
        2.3.31 小鼠新物体识别实验第60-61页
        2.3.32 小鼠脑神经突触纯化实验第61页
        2.3.33 高尔基染色实验第61-62页
        2.3.34 统计学显著性差异分析第62-64页
第三章 结果与讨论第64-90页
    3.1 引言第64-65页
    3.2 实验结果第65-86页
        3.2.1 鉴定核仁中lncRNA的数目与种类第65-68页
        3.2.2 LoNA调控rRNA转录与蛋白质翻译第68-72页
        3.2.3 LoNA通过结合NCL调控rRNA转录第72-76页
        3.2.4 LoNA通过结合FBL蛋白来调控rRNA甲基化水平第76-80页
        3.2.5 LoNA调控多聚核糖体的分布以及突触可塑性第80-84页
        3.2.6 LoNA水平缺失导致学习记忆能力提升第84-86页
    3.3 小结与讨论第86-90页
参考文献第90-100页
附录第100-108页
致谢第108-110页
攻读博士期间主要成果第110页

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