| 摘要 | 第6-7页 |
| abstract | 第7-8页 |
| 英文缩略表 | 第11-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-22页 |
| 1.1 植物的抗病防御机制 | 第12-14页 |
| 1.1.1 植物的初级免疫系统 | 第12-13页 |
| 1.1.2 植物的ETI免疫反应 | 第13-14页 |
| 1.2 水稻稻瘟病抗性基因 | 第14-16页 |
| 1.2.1 稻瘟病抗性基因的克隆 | 第14-15页 |
| 1.2.2 抗性基因在育种上的应用 | 第15-16页 |
| 1.3 基因编辑技术的研究进展 | 第16-21页 |
| 1.3.1 ZFN技术 | 第16-17页 |
| 1.3.2 TALEN技术 | 第17-18页 |
| 1.3.3 CRISPR/Cas9 系统 | 第18-21页 |
| 1.4 本研究的目的及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 CRISPR/Cas9 系统编辑水稻Pita、Pi21和ERF922 基因 | 第22-34页 |
| 2.1 材料与方法 | 第22-24页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第22页 |
| 2.1.2 表达载体和菌株 | 第22-23页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第23页 |
| 2.1.4 培养基及常用试剂的配制 | 第23-24页 |
| 2.2 试验方法 | 第24-34页 |
| 2.2.1 gRNA靶序列的设计与组装 | 第24-26页 |
| 2.2.2 最终载体的构建 | 第26-28页 |
| 2.2.3 水稻DNA的提取 | 第28页 |
| 2.2.4 总RNA提取、反转录和定量反转录检测基因表达水平 | 第28-31页 |
| 2.2.5 T0 代阳性株的获得及靶位点检测 | 第31-32页 |
| 2.2.6 T1 代无转基因成分的筛选 | 第32页 |
| 2.2.7 水稻稻瘟病的抗性鉴定 | 第32-33页 |
| 2.2.8 纯合突变株系的农艺性状考察 | 第33-34页 |
| 第三章 结果与分析 | 第34-44页 |
| 3.1 Pita、Pi21和ERF922 的表达分析 | 第34-35页 |
| 3.2 T0 代转基因阳性株的获得 | 第35页 |
| 3.3 靶位点突变情况分析 | 第35-37页 |
| 3.4 筛选无转基因成分的纯合突变株 | 第37-38页 |
| 3.5 纯合突变系的qRT-PCR检测及氨基酸序列分析 | 第38-40页 |
| 3.6 对纯合突变株系进行稻瘟病抗性鉴定 | 第40页 |
| 3.7 基因编辑株系的防卫相关基因表达量分析 | 第40-42页 |
| 3.8 基因编辑株系的农艺性状考察 | 第42-44页 |
| 第四章 讨论与结论 | 第44-46页 |
| 4.1 讨论 | 第44-45页 |
| 4.2 结论 | 第45页 |
| 4.3 问题与展望 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-53页 |
| 附录 | 第53-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 作者简介 | 第57页 |
