中文摘要 | 第5-7页 |
英文摘要 | 第7-9页 |
中英文缩写表 | 第13-14页 |
第一章 前言 | 第14-18页 |
1.1 研究背景 | 第14-16页 |
1.2 主要研究内容和技术路线图 | 第16-18页 |
1.2.1 主要研究内容 | 第16-17页 |
1.2.2 技术路线图 | 第17-18页 |
第二章 高氧暴露对早产大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞CCAAT增强子结合蛋白α和肺泡表面活性蛋白的影响 | 第18-40页 |
2.1 实验材料 | 第18-22页 |
2.1.1 实验动物 | 第18-19页 |
2.1.2 主要试剂 | 第19-20页 |
2.1.3 主要试剂的配制 | 第20-21页 |
2.1.4 主要设备和器材 | 第21-22页 |
2.2 实验方法 | 第22-31页 |
2.2.1 AECⅡ的分离、纯化与培养 | 第22-23页 |
2.2.2 AECⅡ高氧细胞损伤的模型建立及分组 | 第23页 |
2.2.3 倒置相差显微镜观察AECⅡ状态及改变 | 第23页 |
2.2.4 Q-PCR检测各组细胞中相应mRNA的表达 | 第23-27页 |
2.2.5 Westernblot法检测各组细胞中相应蛋白的表达 | 第27-30页 |
2.2.6 CCK-8法检测各组细胞的增殖 | 第30-31页 |
2.3 统计学分析 | 第31页 |
2.4 实验结果 | 第31-38页 |
2.4.1 高氧暴露对AECⅡ细胞生长状况的影响 | 第31-32页 |
2.4.2 高氧暴露对AECⅡ细胞中C/EBPα、SP-A、SP-B、SP-C、SP-D mRNA表达的影响 | 第32-34页 |
2.4.3 高氧暴露对AECⅡ细胞中C/EBPα、SP-A、SP-B、SP-C、SP-D蛋白表达的影响 | 第34-35页 |
2.4.4 高氧暴露对AECⅡ细胞增殖的影响 | 第35-36页 |
2.4.5 相关性分析 | 第36-38页 |
2.5 讨论 | 第38-40页 |
第三章 过表达C/EBPα对高氧暴露后肺泡Ⅱ型上皮细胞增殖、凋亡及肺泡表面活性蛋白C的影响 | 第40-58页 |
3.1 实验材料 | 第40-43页 |
3.1.1 实验细胞 | 第40页 |
3.1.2 主要试剂 | 第40-41页 |
3.1.3 主要试剂的配制 | 第41-42页 |
3.1.4 主要设备和器材 | 第42-43页 |
3.2 实验方法 | 第43-48页 |
3.2.1 AECⅡ细胞培养 | 第43-44页 |
3.2.2 AECⅡ细胞分组 | 第44页 |
3.2.3 pcDNA3.1(+)-C/EBPα质粒瞬时转染和转染效果检测 | 第44-46页 |
3.2.4 Q-PCR检测各组细胞C/EBPα及SP-CmRNA表达 | 第46页 |
3.2.5 Western blot检测各组细胞C/EBPα及SP-C蛋白表达 | 第46页 |
3.2.6 CCK-8检测各组细胞增殖 | 第46-47页 |
3.2.7 流式细胞仪检测各组细胞周期 | 第47页 |
3.2.8 流式细胞仪检测各组细胞凋亡 | 第47-48页 |
3.3 统计学分析 | 第48页 |
3.4 实验结果 | 第48-56页 |
3.4.1 pcDNA3.1(+)-C/EBPα及pcDNA3.1(+)-空质粒转染结果 | 第48-50页 |
3.4.2 各组细胞C/EBPα和SP-CmRNA表达 | 第50页 |
3.4.3 各组细胞C/EBPα和SP-C蛋白表达 | 第50-51页 |
3.4.4 各组细胞增殖情况 | 第51-52页 |
3.4.5 各组细胞周期及凋亡情况 | 第52-56页 |
3.5 讨论 | 第56-58页 |
第四章 结论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-65页 |
综述 | 第65-74页 |
参考文献 | 第70-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
攻读学位期间发表文章 | 第75页 |