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秀丽线虫酪胺信号调控白色念珠菌规避行为分子机制研究

摘要第5-7页
Abstract第7-8页
主要缩略词表第9-15页
前言第15-19页
第一章 文献综述 秀丽线虫应对致病性微生物的规避行为研究进展第19-51页
    1.神经元中参与秀丽线虫规避行为调控的分子信号第20-26页
        1.1 HECW-1-NPR-1参与秀丽线虫规避行为调控第20-21页
        1.2 TAX-2/TAX-4cGMP门控通道蛋白参与秀丽线虫规避行为调控第21页
        1.3 DAF-10参与秀丽线虫规避行为调控第21-22页
        1.4 硒蛋白T(SELT-1.1)参与秀丽线虫规避行为调控第22-23页
        1.5 Toll/TOL-1信号参与秀丽线虫规避行为调控第23页
        1.6 TIR-1-NSY-1-SEK-1-PMK-1信号参与秀丽线虫规避行为调控第23-24页
        1.7 DAF-7/TGF-β信号参与秀丽线虫规避行为调控第24页
        1.8 ILR/DAF-2信号参与秀丽线虫规避行为调控第24-25页
        1.9 Gαq蛋白EGL-30参与秀丽线虫规避行为调控第25页
        1.10 SOD-1参与秀丽线虫规避行为调控第25-26页
    2.感觉神经元参与秀丽线虫规避行为调控第26-27页
    3.肠道中参与秀丽线虫规避行为调控的分子信号第27-29页
        3.1 INS-11参与秀丽线虫规避行为调控第27页
        3.2 GPCRFSHR-1参与秀丽线虫规避行为调控第27-29页
    4.秀丽线虫应对致病性微生物的学习行为第29-32页
        4.1 5-羟色胺信号参与秀丽线虫的学习行为调控第29-30页
        4.2 神经肽信号INS-6/INS-7参与秀丽线虫的学习行为调控第30-31页
        4.3 保守蛋白EOL-1参与秀丽线虫的学习行为调控第31页
        4.4 TGF-β/DBL-1信号参与秀丽线虫的学习行为调控第31-32页
    5.smallRNA信号参与秀丽线虫的规避行为调控第32-33页
        5.1 mir-67-SAX-7参与秀丽线虫的规避行为调控第32页
        5.2 苏云金芽孢杆菌中smallRNA介导秀丽线虫的规避行为调控第32-33页
    6 问题与展望第33-36页
    参考文献第36-51页
第二章 秀丽线虫酪氨酸脱羧酶TDC-1对白色念珠菌规避行为调控的分子机制研究..第51-119页
    前言第51-52页
    2.1 材料与方法第52-67页
        2.1.1 实验材料第52-54页
            2.1.1.1 秀丽线虫品系第52-53页
            2.1.1.2 实验菌株第53页
            2.1.1.3 实验试剂第53-54页
        2.1.2 实验方法第54-67页
            2.1.2.1 秀丽线虫的培养第54-55页
            2.1.2.2 秀丽线虫的同步化第55页
            2.1.2.3 秀丽线虫的冻存与复苏第55-56页
            2.1.2.4 质粒构建第56-57页
            2.1.2.5 RNAi菌株的质粒构建第57-58页
            2.1.2.6 秀丽线虫喂饲法RNAi第58页
            2.1.2.7 基因枪遗传操作第58-60页
            2.1.2.8 显微注射遗传转化第60-61页
            2.1.2.9 秀丽线虫的RNA提取与逆转录第61-62页
            2.1.2.10 实时定量PCR(qRT-PCR)分析相关基因表达量变化第62-63页
            2.1.2.11 秀丽线虫的规避行为研究模型第63-65页
            2.1.2.12 秀丽线虫的咽泵速率检测第65页
            2.1.2.13 统计分析第65-67页
    2.2 结果与分析第67-108页
        2.2.1 酪氨酸脱羧酶TDC-1参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为调控第67-69页
        2.2.2 外源性酪胺可以增强秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为第69-70页
        2.2.3 外源性酪胺抑制秀丽线虫的咽泵速率,并导致其体内的白色念珠菌积累量显著增加第70-73页
        2.2.4 tdc-1基因缺失突变会导致秀丽线虫体内白色念珠菌的积累量显著增加第73-75页
        2.2.5 TDC-1在RIM中间神经元中特异性调控秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为第75-77页
        2.2.6 特异性沉默RIM中间神经元活性能够导致秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为缺陷第77-80页
        2.2.7 验证TDC-1参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为调控功能第80-81页
        2.2.8 tdc-1基因缺失突变能够改变RIM中间神经元中一些基因的表达模式第81-83页
        2.2.9 nkat-1和flp-18参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为调控第83-85页
        2.2.10 nkat-1和flp-18可以在RIM神经元参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为调控第85-87页
        2.2.11 鉴定TDC-1和NKAT-1在参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为调控中的遗传关系第87-88页
        2.2.12 鉴定TDC-1和FLP-18在参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为调控中的遗传关系第88-90页
        2.2.13 鉴定NKAT-1和FLP-18在参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为调控中的遗传关系第90-92页
        2.2.14 NPR-1介导神经肽FLP-18下游参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为调控第92-94页
        2.2.15 鉴定TDC-1参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314规避行为调控的上游信号分子第94-96页
        2.2.16 鉴定GLR-1、MOD-1、CAM-1和TDC-1在参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314规避行为调控中的关系第96-98页
        2.2.17 GLR-1在RIM神经元参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314规避行为调控.第98-100页
        2.2.18 鉴定GLR-1参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314规避行为调控作用中的下游转录因子第100-102页
        2.2.19 GLR-1通过下游转录因子LIM-4介导TDC-1上游参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314规避行为调控第102-104页
        2.2.20 GLR-1通过下游转录因子LIM-4参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314规避行为调控第104-106页
        2.2.21 LIM-4介导TDC-1上游参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为调控第106-108页
    2.3 讨论第108-112页
    2.4 总结第112-113页
    参考文献第113-119页
第三章 酪胺受体SER-2调控秀丽线虫对白色念珠菌规避行为的分子机制研究第119-157页
    前言第119-120页
    3.1 材料与方法第120-124页
        3.1.1 实验材料第120-121页
            3.1.1.1 秀丽线虫野生型、突变体和转基因品系第120页
            3.1.1.2 实验菌株第120页
            2.1.1.3 实验试剂第120-121页
        3.1.2 实验方法第121-124页
            2.1.2.1 秀丽线虫的培养第121页
            2.1.2.2 秀丽线虫的同步化第121页
            2.1.2.3 秀丽线虫的冻存与复苏第121页
            2.1.2.4 质粒构建第121-122页
            2.1.2.5 RNAi菌株的质粒构建第122页
            2.1.2.6 秀丽线虫喂饲法RNAi第122页
            2.1.2.7 基因枪遗传操作第122-123页
            2.1.2.8 显微注射遗传转化第123页
            2.1.2.9 秀丽线虫的RNA提取与逆转录第123页
            2.1.2.10 实时定量PCR(qRT-PCR)分析相关基因表达量变化第123-124页
            2.1.2.11 秀丽线虫的规避行为研究模型第124页
            2.1.2.12 秀丽线虫的咽泵速率检测第124页
            2.1.2.13 统计分析第124页
    3.2 结果与分析第124-148页
        3.2.1 酪胺受体SER-2参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为调控第124-127页
        3.2.2 ser-2缺失突变引起秀丽线虫体内白色念珠菌积累量明显增加第127-130页
        3.2.3 AIY中间神经元可能参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为调控第130-131页
        3.2.4 SER-2在AIY中间神经元中特异性调控秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为第131-135页
        3.2.5 特异性沉默AIY中间神经元活性导致秀丽线虫对白色念珠菌SC5314规避行为缺陷第135-137页
        3.2.6 鉴定ser-2参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314规避行为调控的靶基因第137-139页
        3.2.7 FAX-1可以在AIY中间神经元中参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为调控第139-141页
        3.2.8 AIY中间神经元中过表达fax-1能够增强秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为响应第141-143页
        3.2.9 秀丽线虫中酪胺受体SER-2对于FAX-1的表达是必需的第143-144页
        3.2.10 鉴定FAX-1在秀丽线虫对白色念珠菌SC5314规避行为调控中的下游靶点蛋白第144-147页
        3.2.11 NCS-1介导FAX-1在AIY中间神经元参与秀丽线虫对白色念珠菌SC5314的规避行为调控第147-148页
    3.3 讨论第148-152页
    3.4 总结第152-153页
    参考文献第153-157页
致谢第157-159页
附录1 攻读博士学位期间发表的论文目录第159-160页

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