中文摘要 | 第4-6页 |
英文摘要 | 第6-14页 |
第一章 前言 | 第14-28页 |
1.1 胃癌的流行病学分析 | 第14页 |
1.2 胃癌病因及发病机制 | 第14-17页 |
1.2.1 环境因素 | 第14-15页 |
1.2.2 饮食因素 | 第15-16页 |
1.2.3 幽门螺杆菌感染 | 第16-17页 |
1.2.4 慢性胃病病史 | 第17页 |
1.2.5 遗传因素 | 第17页 |
1.3 胃癌的病理分型 | 第17-18页 |
1.4 胃癌的分期 | 第18页 |
1.5 胃癌的诊断、治疗及预后 | 第18-19页 |
1.6 家族性胃癌概述 | 第19-21页 |
1.7 胃癌易感基因研究现状 | 第21-23页 |
1.7.1 CDH1基因 | 第21-22页 |
1.7.2 P53基因 | 第22页 |
1.7.3 其他基因 | 第22-23页 |
1.8 我国家族性胃癌研究现状 | 第23-24页 |
1.9 ANT2基因简介 | 第24-26页 |
1.10 研究目的及意义 | 第26-28页 |
第二章 实验材料与实验方法 | 第28-42页 |
2.1 实验材料 | 第28-31页 |
2.1.1 家族性胃癌家系来源 | 第28-29页 |
2.1.2 细胞系来源 | 第29页 |
2.1.3 主要仪器 | 第29-30页 |
2.1.4 主要试剂 | 第30-31页 |
2.1.5 胃癌组织及组织芯片来源 | 第31页 |
2.2 实验方法 | 第31-42页 |
2.2.1 敲减及过表达载体的构建及质粒DNA的转化 | 第31-32页 |
2.2.2 质粒提取(小提中量) | 第32-33页 |
2.2.3 DNA样品琼脂糖凝胶电泳 | 第33页 |
2.2.4 DNA片段回收 | 第33-34页 |
2.2.5 PCR扩增目的cDNA序列 | 第34页 |
2.2.6 DNA的限制性内切酶消化 | 第34-35页 |
2.2.7 Trizol法提取RNA | 第35-36页 |
2.2.8 RNA的反转录 | 第36页 |
2.2.9 实时荧光定量PCR | 第36-37页 |
2.2.10 蛋白提取实验 | 第37页 |
2.2.11 免疫印迹Western blot | 第37-38页 |
2.2.12 细胞培养及转染 | 第38页 |
2.2.13 Transwell实验 | 第38-39页 |
2.2.14 细胞划痕实验 | 第39页 |
2.2.15 细胞平板克隆实验 | 第39页 |
2.2.16 细胞增殖实验 | 第39-40页 |
2.2.17 免疫组化实验 | 第40-41页 |
2.2.18 裸鼠皮下移植瘤注射 | 第41页 |
2.2.19 数据库分析与ANT2相关的信号通路与蛋白 | 第41-42页 |
第三章 实验结果 | 第42-56页 |
3.1 对所收集的家族性胃癌家系样品进行外显子高通置测序及分析 | 第42-47页 |
3.2 胃癌组织中ANT2的表达情况 | 第47页 |
3.3 ANT2稳定敲减胃癌细胞株及过表达细胞株的构建及鉴定 | 第47-48页 |
3.4 敲减及过表达ANT2对胃癌细胞体外克隆形成能力的影响 | 第48-49页 |
3.5 敲减及过表达ANT2对胃癌细胞体外迁移能力的影响 | 第49-51页 |
3.6 敲减及过表达ANT2对胃癌细胞体外增殖能力的影响 | 第51-52页 |
3.7 ANT2在组织水平的表达情况 | 第52页 |
3.8 ANT2的表达水平与预后相关性 | 第52-53页 |
3.9 敲减ANT2对胃癌细胞体内成瘤能力的影响 | 第53-54页 |
3.10 GSEA分析ANT2与凋亡相关信号通路相关性 | 第54-55页 |
3.11数据库分析与ANT2共作用的基因 | 第55-56页 |
第四章 讨论 | 第56-60页 |
参考文献 | 第60-68页 |
致谢 | 第68-69页 |