| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-17页 |
| 1. 植物病原线虫的危害与防治 | 第10页 |
| 2. 捕食线虫真菌的研究 | 第10-13页 |
| 2.1 食线虫真菌的多样性 | 第10-11页 |
| 2.2 捕食线虫真菌捕器的多样性 | 第11-13页 |
| 3. 捕食线虫真菌产生捕器的诱导因子 | 第13-16页 |
| 3.1 非氮源相关因子 | 第13-15页 |
| 3.2 氮源相关因子 | 第15-16页 |
| 4. 本论文的选题依据和研究意义 | 第16-17页 |
| 第二章 尿素诱导少孢节丛孢产生捕器的转录组学研究 | 第17-32页 |
| 1. 前言 | 第17页 |
| 2. 实验材料和仪器 | 第17-18页 |
| 2.1 实验材料 | 第17页 |
| 2.2 实验培养基 | 第17页 |
| 2.3 实验试剂及仪器 | 第17-18页 |
| 3. 实验方法 | 第18-23页 |
| 3.1 诱导培养基,诱导浓度及诱导时间的确定 | 第18页 |
| 3.2 高通量测序样品的制备 | 第18-21页 |
| 3.3 RNA-Seq | 第21-22页 |
| 3.4 荧光定量PCR | 第22-23页 |
| 4. 实验结果与分析 | 第23-30页 |
| 4.1 诱导培养基及浓度的筛选 | 第23-24页 |
| 4.2 诱导时间的确定 | 第24-25页 |
| 4.3 RNA质量检测 | 第25页 |
| 4.4 转录组数据分析 | 第25-28页 |
| 4.5 荧光定量结果 | 第28-30页 |
| 5. 小结与讨论 | 第30-32页 |
| 第三章 少孢节丛孢中精氨酸酶基因功能的初步研究 | 第32-50页 |
| 1. 前言 | 第32页 |
| 2. 实验材料和方法 | 第32-33页 |
| 2.1 实验所用菌株和质粒 | 第32页 |
| 2.2 实验培养基及相关缓冲液 | 第32-33页 |
| 2.3 实验所需试剂及仪器 | 第33页 |
| 3. 实验方法 | 第33-39页 |
| 3.1 基因的序列分析 | 第33页 |
| 3.2 基因敲除技术路线 | 第33-34页 |
| 3.3 引物设计 | 第34页 |
| 3.4 少孢节丛孢全基因组DNA的提取 | 第34页 |
| 3.5 pCSN44质粒的提取 | 第34页 |
| 3.6 pRS426质粒的提取 | 第34-35页 |
| 3.7 少孢节丛孢尿素转运相关基因同源重组载体的构建 | 第35-36页 |
| 3.8 目的基因全长片段的制备 | 第36-37页 |
| 3.9 少孢节丛孢原生质体的制备及转化 | 第37-38页 |
| 3.10 少孢节丛孢相关基因的回复突变的研究 | 第38-39页 |
| 4. 实验结果 | 第39-47页 |
| 4.1 少孢节丛孢中相关基因的序列分析 | 第39-41页 |
| 4.2 基因同源重组载体的制备 | 第41-43页 |
| 4.3 转化子的筛选及PCR验证 | 第43-44页 |
| 4.4 回复突变的研究 | 第44-47页 |
| 5. 小结与讨论 | 第47-50页 |
| 第四章 少孢节丛孢突变体库的构建 | 第50-60页 |
| 1. 前言 | 第50-51页 |
| 2. 实验材料与仪器 | 第51-52页 |
| 2.1 实验菌株及质粒 | 第51页 |
| 2.2 实验培养基及相关缓冲液 | 第51页 |
| 2.3 实验所需试剂及仪器 | 第51-52页 |
| 3. 实验方法 | 第52-55页 |
| 3.1 少孢节丛孢的活化 | 第52页 |
| 3.2 引物设计 | 第52页 |
| 3.3 载体的构建 | 第52-54页 |
| 3.4 农杆菌的化学转化 | 第54页 |
| 3.5 突变体的筛选 | 第54页 |
| 3.6 共培养条件的筛选 | 第54-55页 |
| 4. 实验结果与分析 | 第55-58页 |
| 4.1 载体的构建 | 第55-57页 |
| 4.2 农杆菌的化学转化 | 第57页 |
| 4.3 突变体的筛选 | 第57-58页 |
| 4.4 转化子的PCR验证 | 第58页 |
| 5. 小结与讨论 | 第58-60页 |
| 第五章 少孢节丛孢野生型菌株与几株突变株的比较 | 第60-71页 |
| 1. 前言 | 第60页 |
| 2. 实验材料及仪器 | 第60-61页 |
| 2.1 实验菌株 | 第60页 |
| 2.2 主要培养基 | 第60页 |
| 2.3 实验药品 | 第60-61页 |
| 2.4 实验仪器 | 第61页 |
| 3. 实验方法 | 第61-62页 |
| 3.1 在不同培养基上生长速率的比较 | 第61页 |
| 3.2 抗逆性的比较 | 第61页 |
| 3.3 产孢数量及形态的比较 | 第61页 |
| 3.4 产捕器能力的比较 | 第61-62页 |
| 4. 实验结果 | 第62-69页 |
| 4.1 不同培养基上生长速率的比较 | 第62-64页 |
| 4.2 抗逆性的比较 | 第64-65页 |
| 4.3 产孢数量的比较 | 第65-67页 |
| 4.4 产生捕器能力的比较 | 第67-69页 |
| 5. 小结与讨论 | 第69-71页 |
| 5.1 突变株和野生株在生长速率、抗逆性方面的比较 | 第69页 |
| 5.2 产孢比较 | 第69页 |
| 5.3 产捕器的比较 | 第69-71页 |
| 全文总结 | 第71-72页 |
| 附录 | 第72-81页 |
| 参考文献 | 第81-84页 |
| 硕士研究生期间科研成果 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85页 |