摘要 | 第8-10页 |
ABSTRACT | 第10-11页 |
第一篇 文献综述 | 第12-44页 |
第一章 传染性皮下及造血组织坏死病毒的研究进展 | 第12-24页 |
1 地理分布 | 第12页 |
2 临床症状和传播途径 | 第12-13页 |
3 宿主范围 | 第13-14页 |
4 病毒形态和基因组结构 | 第14-15页 |
5 IHHNV的诊断方法 | 第15-18页 |
5.1 组织病理学检测 | 第15-16页 |
5.2 分子生物学方法 | 第16-18页 |
5.3 免疫学检测 | 第18页 |
6 小结 | 第18-19页 |
参考文献 | 第19-24页 |
第二章 白斑综合征病毒的研究进展 | 第24-36页 |
1 地理分布 | 第24页 |
2 临床症状和传播途径 | 第24-26页 |
3 宿主范围 | 第26页 |
4 组织病理学和细胞病理学 | 第26页 |
5 病毒形态和基因组结构 | 第26-27页 |
6 WSSV的诊断方法 | 第27-29页 |
6.1 临床症状的观察 | 第27页 |
6.2 组织病理学和电子显微镜的观察 | 第27-28页 |
6.3 分子生物学方法 | 第28页 |
6.4 免疫学方法 | 第28-29页 |
7 小结 | 第29-30页 |
参考文献 | 第30-36页 |
第三章 WSSV蛋白的研究进展 | 第36-44页 |
1 WSSV的核衣壳蛋白 | 第36页 |
1.1 VP664 | 第36页 |
1.2 VP15 | 第36页 |
2 WSSV的囊膜蛋白 | 第36-40页 |
2.1 VP19 | 第37页 |
2.2 VP24 | 第37页 |
2.3 VP26 | 第37-38页 |
2.4 VP28 | 第38页 |
2.5 VP31 | 第38页 |
2.6 VP33 | 第38页 |
2.7 VP39 | 第38-39页 |
2.8 VP110 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
第二篇 试验研究 | 第44-88页 |
第一章 江苏地区对虾3种病毒病的流行病学调查 | 第44-58页 |
1 实验材料 | 第45-46页 |
1.1 实验动物 | 第45页 |
1.2 主要试剂 | 第45页 |
1.3 主要仪器 | 第45页 |
1.4 引物设计 | 第45-46页 |
2 实验方法 | 第46-50页 |
2.1 样品处理 | 第46页 |
2.2 病毒基因组的提取 | 第46-47页 |
2.3 病毒基因组序列的扩增 | 第47-49页 |
2.4 PCR产物的鉴定回收与纯化 | 第49页 |
2.5 PCR产物的连接 | 第49页 |
2.6 连接产物的转化 | 第49-50页 |
2.7 阳性克隆的PCR鉴定及测序分析 | 第50页 |
3 实验结果 | 第50-52页 |
3.1 对虾采样情况统计 | 第50-51页 |
3.2 病毒基因序列扩增结果 | 第51-52页 |
4 讨论 | 第52-54页 |
参考文献 | 第54-58页 |
第二章 江苏地区5株IHHNV的编码区基因序列分析 | 第58-66页 |
1 实验材料 | 第58-59页 |
1.1 实验动物 | 第58-59页 |
1.2 主要试剂 | 第59页 |
1.3 主要仪器 | 第59页 |
2 实验方法 | 第59-61页 |
2.1 IHHNV基因组的克隆 | 第59-60页 |
2.2 PCR产物的鉴定回收与纯化 | 第60页 |
2.3 PCR产物的连接 | 第60页 |
2.4 连接产物的转化 | 第60页 |
2.5 阳性克隆的PCR鉴定及测序分析 | 第60-61页 |
3 实验结果 | 第61-63页 |
3.1 病毒基因序列扩增结果 | 第61页 |
3.2 江苏不同地区IHHNV编码区序列分析 | 第61-63页 |
4 讨论 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-66页 |
第三章 与NM23相互作用的WSSV结构蛋白的筛选 | 第66-88页 |
1 实验材料 | 第67页 |
1.1 病毒样品 | 第67页 |
1.2 主要酶与试剂 | 第67页 |
1.3 主要仪器 | 第67页 |
2 实验方法 | 第67-71页 |
2.1 对虾鳃细胞膜蛋白NM23的纯化 | 第67-68页 |
2.2 WSSV全蛋白的提纯 | 第68页 |
2.3 VOPBA实验 | 第68-69页 |
2.4 疑似蛋白原核表达载体的构建与鉴定 | 第69-70页 |
2.5 三种蛋白的纯化 | 第70-71页 |
2.6 3种蛋白和NM23蛋白作用VOPBA的进一步验证 | 第71页 |
2.7 3种蛋白和NM23蛋白作用免疫共沉淀的进一步验证 | 第71页 |
3 结果与分析 | 第71-81页 |
3.1 对虾鳃细胞膜蛋白NM23的纯化 | 第71-72页 |
3.2 WSSV全蛋白的提纯 | 第72-73页 |
3.3 VOPBA初筛WSSV蛋白 | 第73-74页 |
3.4 3种蛋白原核表达载体结果 | 第74-79页 |
3.4.1 3种蛋白的目的基因PCR扩增 | 第74-76页 |
3.4.2 3种重组质粒双酶切鉴定结果 | 第76-77页 |
3.4.3 3种蛋白的纯化 | 第77-79页 |
3.5 3种蛋白和NM23蛋白作用VOPBA的进一步验证结果 | 第79-80页 |
3.6 3种蛋白和NM23蛋白作用免疫共沉淀的进一步验证结果 | 第80-81页 |
4 讨论 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-88页 |
全文总结 | 第88-90页 |
附录 | 第90-94页 |
致谢 | 第94-96页 |
攻读学位期间取得的学术成果 | 第96页 |