| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第一章 前言 | 第12-28页 |
| 1.1 肝癌 | 第13-19页 |
| 1.1.1 肝癌的研究现状 | 第13-14页 |
| 1.1.2 肝癌的分子机制研究进展 | 第14-16页 |
| 1.1.3 肝癌致病的原因 | 第16-19页 |
| 1.2 GAB2生物学功能及其机制 | 第19-24页 |
| 1.2.1 Gab家族蛋白简介 | 第19-21页 |
| 1.2.2 Gab2蛋白的结构及功能 | 第21-22页 |
| 1.2.3 Gab2所涉及信号通路 | 第22-23页 |
| 1.2.4 Gab2在肿瘤中的功能及机制 | 第23-24页 |
| 1.3 FOXD3 | 第24-26页 |
| 1.3.1 Foxd3简介 | 第24-25页 |
| 1.3.2 Foxd3与肿瘤 | 第25-26页 |
| 1.4 本课题研究的意义 | 第26-28页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第28-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第28-36页 |
| 2.1.1 细胞株 | 第28页 |
| 2.1.2 菌种及质粒 | 第28页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第28-30页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第30-31页 |
| 2.1.5 试剂盒 | 第31-32页 |
| 2.1.6 主要溶液及配制 | 第32-36页 |
| 2.2 实验方法 | 第36-47页 |
| 2.2.1 人肝癌细胞培养及传代 | 第36-37页 |
| 2.2.2 感受态细胞的制备 | 第37页 |
| 2.2.3 报告基因检测 | 第37-39页 |
| 2.2.4 RT-PCR | 第39-41页 |
| 2.2.5 Western Blot实验 | 第41-42页 |
| 2.2.6 ChIP-qPCR | 第42-44页 |
| 2.2.7 重叠延伸PCR | 第44-46页 |
| 2.2.8 数据处理与分析 | 第46-47页 |
| 第三章 结果分析 | 第47-59页 |
| 3.1 Gab2启动子区报告基因质粒构建及转录活性分析 | 第47-50页 |
| 3.1.1 Gab2启动子区报告基因质粒的构建 | 第47-48页 |
| 3.1.2 肝癌细胞中Gab2基因核心启动子区分析 | 第48-50页 |
| 3.2 生物信息学方法预测Gab2核心启动子区潜在的转录因子结合位点 | 第50-53页 |
| 3.3 转录因子Foxd3与Gab2启动子结合的初步鉴定 | 第53-54页 |
| 3.4 Foxd3通过与Gab2基因核心启动子区域上结合位点相互作用调控其转录活性 | 第54-59页 |
| 3.4.1 Foxd3结合位点定点突变报告基因质粒的构建 | 第55-57页 |
| 3.4.2 转录因子Foxd3对Gab2基因转录起抑制作用 | 第57-59页 |
| 第四章 讨论 | 第59-63页 |
| 4.1 真核生物基因表达调控机制 | 第59-60页 |
| 4.2 Gab2基因核心启动子区域的鉴定及潜在转录因子的筛选 | 第60页 |
| 4.3 转录因子Foxd3对Gab2基因表达的调控作用 | 第60-62页 |
| 4.4 结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
