| 中文摘要 | 第10-12页 |
| 英文摘要 | 第12-15页 |
| 1 前言 | 第15-22页 |
| 1.1 热休克蛋白 | 第15-17页 |
| 1.1.1 热休克蛋白的研究史 | 第15页 |
| 1.1.2 热休克蛋白的分类 | 第15-16页 |
| 1.1.3 热休克蛋白的生物学特性 | 第16页 |
| 1.1.4 热休克蛋白主要的生物学功能 | 第16-17页 |
| 1.2 热休克蛋白HSP70 | 第17-19页 |
| 1.2.1 热休克蛋白HSP70的结构 | 第17-18页 |
| 1.2.2 热休克蛋白HSP70的生物学功能 | 第18页 |
| 1.2.3 Hsp70与Hsc70的联系与区别 | 第18-19页 |
| 1.3 昆虫热休克蛋白的研究概况 | 第19-20页 |
| 1.3.1 HSP70与昆虫耐热性 | 第19页 |
| 1.3.2 昆虫滞育与热休克蛋白 | 第19页 |
| 1.3.3 HSP70在昆虫生物学方面的研究 | 第19页 |
| 1.3.4 昆虫HSP70的医学意义 | 第19-20页 |
| 1.3.5 昆虫HSP70在环境污染监测中的应用 | 第20页 |
| 1.4 研究目的及意义 | 第20-21页 |
| 1.5 技术路线 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-30页 |
| 2.1 试验材料 | 第22页 |
| 2.1.1 昆虫来源 | 第22页 |
| 2.1.2 试验仪器及试剂 | 第22页 |
| 2.1.3 分子生物学用的酶和试剂盒以及各种试剂和培养基 | 第22页 |
| 2.1.4 生物信息学相关网站及软件 | 第22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-25页 |
| 2.2.1 叶色草蛉RNA提取 | 第22-23页 |
| 2.2.2 利用RT-PCR扩增保守区之间的cDNA序列 | 第23-24页 |
| 2.2.3 RACE引物的设计 | 第24-25页 |
| 2.2.4 3'-RACE和5'-RACE的试验步骤 | 第25页 |
| 2.2.5 全长cDNA的获取 | 第25页 |
| 2.3 序列分析 | 第25页 |
| 2.4 蛋白质分析及功能预测 | 第25页 |
| 2.5 目标基因在原核载体中的表达 | 第25-27页 |
| 2.5.1 ORF扩增 | 第25-26页 |
| 2.5.2 酶切反应 | 第26页 |
| 2.5.3 大肠杆菌表达载体的构建与表达 | 第26-27页 |
| 2.6 表达蛋白的Western blot分析 | 第27页 |
| 2.7 叶色草蛉Hsp70与Hsc70 mRNA表达水平研究 | 第27-30页 |
| 2.7.1 叶色草蛉基因的提取 | 第27-28页 |
| 2.7.2 荧光定量PCR引物的设计 | 第28-29页 |
| 2.7.3 荧光定量PCR的反应与结果分析 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-61页 |
| 3.1 叶色草蛉Hsp70/Hsc70的基因保守区片段 | 第30页 |
| 3.2 叶色草蛉Hsp70/Hsc70基因cDNA序列的3,RACE | 第30-31页 |
| 3.3 叶色草蛉Hsp70/Hsc70基因cDNA序列的5,RACE | 第31页 |
| 3.4 Hsp70/Hsc70基因cDNA全长序列 | 第31-32页 |
| 3.5 HSP70基因序列分析 | 第32-36页 |
| 3.5.1 叶色草蛉Hsp70基因序列分析 | 第32-34页 |
| 3.5.2 叶色草蛉Hsc70基因序列分析 | 第34-36页 |
| 3.6 Hsp70的基因特征分析 | 第36-41页 |
| 3.6.1 氨基酸序列组成分析 | 第36-37页 |
| 3.6.2 信号肽分析 | 第37-38页 |
| 3.6.3 氨基酸糖基化位点预测 | 第38-39页 |
| 3.6.4 预测蛋白的疏水性分析 | 第39-40页 |
| 3.6.5 空间结构预测 | 第40-41页 |
| 3.7 HSP70蛋白氨基酸序列同源性分析 | 第41-48页 |
| 3.7.1 叶色草蛉Hsp70氨基酸序列同源性比较 | 第41-45页 |
| 3.7.2 叶色草蛉Hsc70基因氨基酸序列同源性比较 | 第45-48页 |
| 3.8 叶色草蛉HSP70基因氨基酸的系统发育分析 | 第48-49页 |
| 3.8.1 叶色草蛉Hsp70基因氨基酸序列一致性分析 | 第48页 |
| 3.8.2 叶色草蛉Hsc70基因氨基酸序列一致性分析 | 第48-49页 |
| 3.9 叶色草蛉Hsp70基因的原核表达 | 第49-53页 |
| 3.9.1 重组质粒的构建与鉴定 | 第49-51页 |
| 3.9.2 叶色草蛉Hsp70诱导表达及Western blot验证 | 第51-53页 |
| 3.10 Hsp70与Hsc70表达水平研究 | 第53-61页 |
| 3.10.1 不同温度处理对叶色草蛉Hsp70/Hsc70表达分析 | 第53-56页 |
| 3.10.2 不同农药处理对叶色草蛉Hsp70/Hsc70表达分析 | 第56-58页 |
| 3.10.3 四种农药对叶色草蛉不同龄期的Hsp70/Hsc70表达分析 | 第58-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| 4.1 实验方法 | 第61页 |
| 4.2 温度和农药对叶色草蛉HSP70s表达的影响 | 第61-63页 |
| 5 结论 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-72页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第72页 |
